本文關(guān)鍵詞：番木瓜炭疽病拮抗菌鑒定、抗菌成分分析及作用機理研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：番木瓜是一種很有發(fā)展前景的熱帶亞熱帶水果,然而,貯運期間番木瓜果實易腐,易受到多種病原微生物的侵染而引起采后腐爛,造成經(jīng)濟損失,其中,膠孢炭疽菌(Collectotrichum gloeosporioides Pei憶)是引起番木瓜采后炭疽病的主要病原菌。生物防治作為一種對人類和環(huán)境安全的防治方法受到關(guān)注和重視,但是我國對番木瓜炭疽病的生物防治研究并不多,有效地拮抗菌資源還有限,限制著果蔬采后病害生物防治技術(shù)的發(fā)展。本研究從番木瓜果實表皮組織篩選對番木瓜炭疽病有較好防治效果的拮抗菌,鑒定獲取的拮抗菌株并其對產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)和防治作用機理進(jìn)行初步研究。 通過研究得到以下結(jié)論：1、從番木瓜果實表皮組織篩選到451株菌株,以番木瓜炭疽病菌為靶標(biāo)菌,經(jīng)過初篩、復(fù)篩,獲得有較強拮抗作用菌株20株,其中1w320菌株對番木瓜炭疽病菌(C. gloeosporioides)抑制作用最強。平板對峙試驗表明,菌株1w320對14種病原真菌的拮抗指數(shù)均在1.42以上,對番木瓜炭疽病菌(C. gloeosporioides)的拮抗指數(shù)達(dá)到2.90。通過對菌株在培養(yǎng)基上的形態(tài)描述,顯微觀察,生理生化測定并結(jié)合16S rDNA序列分析,將1w320鑒定為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)。采后防治試驗表明,1w320菌株對采后番木瓜炭疽病的防治效果達(dá)到76.5%。2、采用牛津杯法進(jìn)行體外抑菌試驗中,菌株1w320的發(fā)酵濾液能在平板上產(chǎn)生一個約20mm的抑菌圈。菌株1w320及其發(fā)酵液產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)對番木瓜炭疽病菌(C. gloeosporioides)都有較好的抑制作用。生理生化試驗表明,菌株1w320發(fā)酵濾液中抗菌物質(zhì)對溫度、pH、蛋白酶K以及金屬離子具有很好的穩(wěn)定性和耐受性,在果蔬生物防治方面具有重大的應(yīng)用潛力。解淀粉芽孢桿菌1w320所產(chǎn)生的揮發(fā)性活性物質(zhì)組分屬于烷烴,酚類,酸,酯等幾類物質(zhì)。3、體外拮抗試驗表明,抑菌帶周邊的病原菌菌絲顏色逐漸加深變黑,菌株1w320產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)能抑制炭疽菌絲生長,并使菌絲頂端畸變縊縮、膨大,甚至細(xì)胞壁破裂流出原生質(zhì)體。番木瓜炭疽病菌分生孢子多數(shù)不能夠正常萌發(fā)產(chǎn)生芽管,最終引起孢子破裂,釋放內(nèi)含物。接種試驗表明,菌株1w320在一定程度上提高了過氧化物酶、多酚氧化酶的活性,有效控制了番木瓜炭疽病情擴展。研究還發(fā)現(xiàn)番木瓜果實經(jīng)菌株1w320處理后,能夠抑制住果實顏色轉(zhuǎn)黃,減緩了果實硬度的減小及可溶性固形物的升高。
【關(guān)鍵詞】：番木瓜 炭疽病 拮抗細(xì)菌 抗菌物質(zhì) 生防作用
【學(xué)位授予單位】：海南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S436.67
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 上篇文獻(xiàn)綜述10-22
• 第一章 番木瓜采后炭疽病發(fā)生、危害與防治10-15
• 1 番木瓜生產(chǎn)現(xiàn)狀10
• 2 番木瓜采后炭疽病的危害10-12
• 3 生物防治的定義12-15
• 3.1 利用拮抗微生物的拮抗作用來控制病原菌12-13
• 3.2 通過誘導(dǎo)果實抗性來抵抗病原菌的侵染13
• 3.3 利用動植物源具抗菌活性的天然物質(zhì)13-14
• 3.4 對拮抗微生物進(jìn)行遺傳改良14-15
• 第二章 拮抗微生物的應(yīng)用現(xiàn)狀15-18
• 1 微生物資源成為新藥開發(fā)的重要原材料15
• 2 微生物抑菌活性成分分析15-16
• 3 拮抗菌解淀粉芽孢桿菌研究進(jìn)展16-18
• 第三章 拮抗菌進(jìn)行生物防治的作用機理18-21
• 1 產(chǎn)生能抑制病原菌生長的抗菌素類物質(zhì)18-19
• 2 通過快速生長繁殖在寄主傷口處實現(xiàn)有效的營養(yǎng)和空間競爭19
• 3 與病原菌產(chǎn)生吸附作用直接抑制病原菌生長19-20
• 4 誘導(dǎo)寄主產(chǎn)生抗性20-21
• 第四章 研究目的和意義21-22
• 下篇研究內(nèi)容22-48
• 第一章 番木瓜炭疽病拮抗菌的篩選及鑒定22-30
• 1 引言22
• 2 材料與方法22-25
• 2.1 材料22-23
• 2.1.1 供試果實22-23
• 2.1.2 供試菌株23
• 2.1.3 主要儀器23
• 2.2 方法23-25
• 2.2.1 拮抗細(xì)菌的分離23
• 2.2.2 拮抗細(xì)菌的初篩23-24
• 2.2.3 拮抗細(xì)菌的復(fù)篩24
• 2.2.4 抑菌譜測定24
• 2.2.5 菌株1w320生理生化性狀測定24
• 2.2.6 菌株1w320的分子鑒定24-25
• 3 結(jié)果分析25-28
• 3.1 拮抗細(xì)菌的分離篩選25
• 3.2 20拮抗細(xì)菌的抑菌活性測定25
• 3.3 抑菌譜測定25-27
• 3.4 菌株1w320的生理生化特征27
• 3.5 菌株16S rDNA序列分析27-28
• 3.6 菌株1w320的鑒定28
• 4 討論28-30
• 第二章 拮抗菌株1w320抗菌成分初步分析30-39
• 1 引言30-31
• 2 材料與方法31-33
• 2.1 供試材料31
• 2.1.1 主要儀器31
• 2.1.2 供試試劑31
• 2.1.3 供試菌株31
• 2.2 方法31-33
• 2.2.1 菌株1w320發(fā)酵濾液對番木瓜炭疽菌的抑制作用31-32
• 2.2.2 菌株1w320發(fā)酵濾液的穩(wěn)定性32
• 2.2.2.1 溫度對活性物質(zhì)抑菌活性的影響32
• 2.2.2.2 pH對活性物質(zhì)抑菌活性的影響32
• 2.2.2.3 蛋白酶K處理對活性物質(zhì)抑菌活性的影響32
• 2.2.2.4 金屬離子對活性物質(zhì)抑菌活性的影響32
• 2.2.3 菌株1w320抗菌物質(zhì)粗提物的提取32
• 2.2.4 菌株1w320揮發(fā)性物質(zhì)對番木瓜炭疽病菌的抑制作用32-33
• 2.2.5 菌株1w320揮發(fā)性物質(zhì)的GC-MS分析33
• 2.2.6 菌株1w320對番木瓜采后炭疽病防治作用33
• 3 結(jié)果分析33-38
• 3.1 菌株1w320發(fā)酵濾液對番木瓜炭疽菌的抑制作用33-36
• 3.1.1 溫度對活性物質(zhì)抑菌活性的影響34
• 3.1.2 pH對活性物質(zhì)抑菌活性的影響34-35
• 3.1.3 蛋白酶K對活性物質(zhì)抑菌活性的影響35
• 3.1.4 金屬離子對活性物質(zhì)抑菌活性的影響35-36
• 3.3 菌株1w320揮發(fā)性物質(zhì)對番木瓜炭疽病菌的抑制作用36
• 3.4 菌株1w320揮發(fā)性物質(zhì)的GC-MS分析36-37
• 3.5 菌株1w320對番木瓜采后炭疽病防治作用37-38
• 4 討論38-39
• 第三章 菌株1w320防治番木瓜炭疽病作用機理初步研究39-48
• 1 引言39-40
• 2 材料與方法40-42
• 2.1 材料40
• 2.1.1 供試水果40
• 2.1.2 供試菌株40
• 2.1.3 主要儀器40
• 2.2 菌株1w320對番木瓜炭疽病菌菌絲及孢子的影響40-41
• 2.3 番木瓜果實經(jīng)菌株1w320處理后果皮防御酶活性變化41-42
• 2.3.1 番木瓜果實接種處理41
• 2.3.2 防御酶活性測定方法41-42
• 2.3.2.1 過氧化物酶(POD)活性測定41
• 2.3.2.2 多酚氧化酶(PPO)活性測定41-42
• 2.4 菌株1w320對番木瓜果實貯藏品質(zhì)的影響42
• 2.4.1 果實顏色變化的測定42
• 2.4.2 果實硬度的變化42
• 2.4.3 果實可溶性固形物(SSC)的測定42
• 2.5 統(tǒng)計分析42
• 3 結(jié)果分析42-46
• 3.1 菌株1w320對番木瓜炭疽菌菌絲及孢子的影響42-43
• 3.2 過氧化物酶(POD)活性測定43-44
• 3.3 多酚氧化酶(PPO)活性測定44
• 3.4 菌株1w320對番木瓜果實貯藏品質(zhì)的影響44-46
• 3.4.1 果實顏色變化的測定44-45
• 3.4.2 果實硬度和可溶性固形物(SSC)的變化45-46
• 4 討論46-48
• 結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-57
• 致謝57

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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1 陳亮;番木瓜炭疽病拮抗菌鑒定、抗菌成分分析及作用機理研究[D];海南大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：番木瓜炭疽病拮抗菌鑒定、抗菌成分分析及作用機理研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：476925