本文關(guān)鍵詞：蟲花Isaria farinosa CH7的生物學(xué)特性及多糖研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：隨著野生蟲草資源的銳減及消費需求的增大,尋找冬蟲夏草替代品、探索簡單可行的人工培養(yǎng)技術(shù)、研究蟲草的生物活性等掀起了陣陣熱潮。本論文對一株從野外分離純化獲得的蟲草進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)蛹體及谷物原料的固體培養(yǎng)得到的子實體長勢較好,液體培養(yǎng)時生長周期短,性狀穩(wěn)定,產(chǎn)糖量較高。通過傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)方法研究了生物學(xué)特性,通過構(gòu)建進(jìn)化樹探討了該蟲草與其他種類的親緣關(guān)系；通過不同的接種方式感染不同寄主種類對其生活史循環(huán)進(jìn)行了驗證；以菌絲體生物量和胞外多糖產(chǎn)生量為衡量指標(biāo),對該菌液體發(fā)酵的培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化；在此基礎(chǔ)上初步研究胞外多糖(EPS Ⅰ、EPS Ⅱ)和胞內(nèi)多糖(IPS Ⅰ、IPS II)的體外吸濕保濕性能及抗氧化活性,主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下：1) 蟲花生物學(xué)特性研究：對該株蟲草進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察及ITS序列分析,發(fā)現(xiàn)其無性型與粉質(zhì)擬青霉的形態(tài)一致,基因相似度高達(dá)99%,命名為蟲花Isaria farinosa CH7,進(jìn)化樹的構(gòu)建發(fā)現(xiàn)其與同屬菌株間的親緣關(guān)系較近。根據(jù)科赫法則,分離純化的菌株經(jīng)液體培養(yǎng)獲得的菌絲體以注射方式感染柞蠶蛹和蓖麻蠶蛹,能夠長出子實體,子實體上能夠分離出與原始樣本相同的菌株,實現(xiàn)了生活史循環(huán)。通過蠶蛹活體、谷類原料的固體培養(yǎng)及錐形瓶中的液體發(fā)酵探討了I.farinosa CH7在不同人工培養(yǎng)基上的生長狀態(tài),發(fā)現(xiàn)固體基質(zhì)上生長旺盛,子實體質(zhì)量和數(shù)量均較理想；液體培養(yǎng)周期短,所得產(chǎn)物產(chǎn)量較高,有廣闊的開發(fā)前景。2) 蟲花發(fā)酵培養(yǎng)優(yōu)化：以菌絲體生物量和胞外多糖含量為衡量指標(biāo),通過單因素和正交試驗對蟲花I. farinosa CH7的培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化,確定了液體發(fā)酵的最佳條件為：蔗糖2.5%、牛肉膏0.8%、初始pH 4.0、溫度28℃,優(yōu)化后的菌絲體量和胞外多糖含量分別比優(yōu)化前提高了15.01%和60.41%。同樣條件下,30 L發(fā)酵罐中的擴大培養(yǎng)過程使得菌絲體生物量和糖含量分別比錐形瓶中培養(yǎng)時提升了7.98%和10.72%。液體培養(yǎng)條件易控制,代謝產(chǎn)物較易提取,不受時間、地點、季節(jié)等的限制,可在以后的實踐中大規(guī)模推廣,為后續(xù)研究、生產(chǎn)提供充足的原料。3)多糖功能分析：基于蟲草多糖諸多功效開發(fā)的產(chǎn)品種類較多,市場上已有相關(guān)化妝品的銷售、流通。通過吸濕保濕能力和抗氧化活性評價了胞內(nèi)、胞外共四種多糖的功能,進(jìn)而探究蟲花I. farinosa CH7在化妝品行業(yè)的實際應(yīng)用價值。吸濕保濕能力大小的研究表明,四種多糖均具有一定的吸濕保濕能力,總體來說,胞內(nèi)多糖比胞外多糖的吸濕能力強,而胞外多糖的保濕能力又優(yōu)于胞內(nèi)多糖,通過清除羥自由基和螯合亞鐵離子能力兩個方面對I. farinosa CH7多糖的抗氧化活性進(jìn)行評價,結(jié)果表明四種多糖均具有良好的清除羥自由基及螯合亞鐵離子的能力。由EC50值可知EPS II在四種糖中抗氧化活性較強,優(yōu)越性明顯,可加大開發(fā)利用。在以后的產(chǎn)品研發(fā)過程中,可考慮多糖的強化、復(fù)配使用,這些探索為I. farinosa CH7以高檔化妝品形式滿足市場需求提供了可能。本文為深入開發(fā)蟲花I. farinosa CH7資源、實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)、開發(fā)相關(guān)產(chǎn)品及解決蟲草供需矛盾、維護(hù)生態(tài)平衡奠定了基礎(chǔ),具有一定的學(xué)術(shù)、經(jīng)濟和社會價值。
【關(guān)鍵詞】：Isaria farinosa CH7 生物學(xué)特性 發(fā)酵優(yōu)化 多糖活性
【學(xué)位授予單位】：中國海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S567.3
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-13
• 0 前言13-27
• 0.1 蟲草資源概述13-14
• 0.2 蟲草的生物學(xué)特性14-17
• 0.2.1 形態(tài)及分布14-15
• 0.2.2 蟲草的生活史15-16
• 0.2.3 蟲草無性型的鑒定16-17
• 0.3 蟲草的活性成分與開發(fā)應(yīng)用現(xiàn)狀17-24
• 0.3.1 蟲草的主要活性成分及藥理作用17-22
• 0.3.2 蟲草的人工培養(yǎng)22-23
• 0.3.3 蟲草的產(chǎn)品開發(fā)23-24
• 0.4 蟲花的研究進(jìn)展24-25
• 0.5 立題背景及研究內(nèi)容25-27
• 0.5.1 立題依據(jù)及意義25
• 0.5.2 研究內(nèi)容25-27
• 1 蟲花I.farinosa CH7的生物學(xué)特性27-37
• 1.1 引言27-28
• 1.2 實驗材料28-29
• 1.2.1 主要材料28
• 1.2.2 主要儀器28
• 1.2.3 培養(yǎng)基28-29
• 1.3 實驗方法29-31
• 1.3.1 菌株的鑒定29
• 1.3.2 菌株的生活史循環(huán)29-30
• 1.3.3 菌株的人工培養(yǎng)30-31
• 1.4 結(jié)果與分析31-35
• 1.4.1 菌株的鑒定31-33
• 1.4.2 生活史的驗證33-35
• 1.4.3 菌株在不同基質(zhì)上的人工培養(yǎng)35
• 1.5 本章小結(jié)35-37
• 2 蟲花I.farinosa CH7發(fā)酵過程的優(yōu)化37-48
• 2.1 引言37-38
• 2.2 實驗材料38-39
• 2.2.1 試劑38
• 2.2.2 主要儀器38
• 2.2.3 培養(yǎng)基38-39
• 2.3 實驗方法39-41
• 2.3.1 測定方法39
• 2.3.2 碳源39
• 2.3.3 氮源39
• 2.3.4 初始pH值39
• 2.3.5 溫度39
• 2.3.6 裝液量39-40
• 2.3.7 接種量40
• 2.3.8 正交試驗40
• 2.3.9 發(fā)酵罐的影響40-41
• 2.4 結(jié)果與分析41-46
• 2.4.1 單因素結(jié)果分析41-45
• 2.4.2 正交結(jié)果分析45-46
• 2.4.3 產(chǎn)量對比46
• 2.4.4 發(fā)酵罐擴大培養(yǎng)46
• 2.5 本章小結(jié)46-48
• 3 蟲花I.farinosa CH7多糖的功能測定48-56
• 3.1 引言48-49
• 3.2 實驗材料49
• 3.2.1 主要試劑49
• 3.2.2 主要儀器49
• 3.3 實驗方法49-50
• 3.3.1 多糖的制備49
• 3.3.2 多糖的吸濕保濕能力49-50
• 3.3.3 多糖對羥自由基的清除作用50
• 3.3.4 多糖對亞鐵離子的螯合能力50
• 3.4 結(jié)果與分析50-54
• 3.4.1 多糖吸濕能力50-51
• 3.4.2 多糖保濕能力51-53
• 3.4.3 多糖的羥自由基清除能力53
• 3.4.4 多糖的亞鐵離子螯合能力53-54
• 3.5 本章小結(jié)54-56
• 結(jié)語與展望56-58
• 論文創(chuàng)新點58-59
• 參考文獻(xiàn)59-67
• 附圖67-68
• 致謝68-69
• 個人簡歷69
• 在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果69

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：蟲花Isaria farinosa CH7的生物學(xué)特性及多糖研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：455083