本文關(guān)鍵詞：植物激素脫落酸在草莓果實(shí)成熟著色上的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：脫落酸(Abscisic acid, ABA)是植物體的一種重要內(nèi)源激素,在植物胚的形成、調(diào)控氣孔的開閉以及干旱、高鹽、低溫、機(jī)械損傷等一系列逆境條件下的生理響應(yīng)有著重要作用。近幾年有研究指出脫落酸對非呼吸越變型果實(shí)的成熟也有至關(guān)重要的影響,調(diào)控著果實(shí)的成熟著色過程。草莓是典型的非呼吸越變型果實(shí),口感酸甜適宜,營養(yǎng)成分豐富,深受廣大消費(fèi)者的喜愛。本實(shí)驗(yàn)以‘紅顏’草莓為材料,從坐果開始通過不同濃度NDGA (nordihydroguaiaretic acid,去甲二氫愈創(chuàng)木酸)抑制果實(shí)中ABA的合成,以ABA處理為正對照,清水處理為CK,研究草莓果實(shí)成熟著色過程中ABA的作用。通過酶聯(lián)免疫法測定不同處理下果實(shí)中ABA的含量；高效液相色譜法測定不同處理下草莓果實(shí)中主要花色苷天竺葵素葡萄糖苷的含量、蒽酮比色法測定糖的含量、酸堿滴定法測定酸的含量；同時(shí)結(jié)合熒光定量PCR研究了控制ABA合成代謝的相關(guān)酶基因FaNCED, FaCYP707A1、FaBG1 以及FaCHLH在草莓果實(shí)成熟發(fā)育過程中的表達(dá)模式,分析它們與ABA的關(guān)系。研究結(jié)果表明：1. NDGA抑制了草莓果實(shí)中ABA的合成,處理濃度越大抑制作用越明顯；外源ABA處理促進(jìn)了果實(shí)中ABA含量的升高。草莓果實(shí)中的ABA含量與糖、天竺葵素葡萄糖苷等密切相關(guān),與酸含量的并沒有直接關(guān)系。草莓果實(shí)中高濃度的ABA有利于糖和天竺葵素葡萄糖苷的形成。2.草莓果實(shí)中的ABA含量變化呈‘N’字型趨勢。從坐果開始到完全褪綠階段ABA含量升高花后21d達(dá)到第一個(gè)峰值,略微調(diào)整下降后,隨著果實(shí)的著色又恢復(fù)上升趨勢,到果實(shí)全紅時(shí)期含量最高。糖含量和天竺葵素葡萄糖苷總體均呈現(xiàn)升高的趨勢,酸含量總體呈下降趨勢,并且這兩種趨勢變化在果實(shí)著色期間表現(xiàn)更加明顯。3.通過改良的CTAB法提取草莓果實(shí)總RNA,反轉(zhuǎn)錄為cDNA,并設(shè)計(jì)FaNCED、FaCYP707A1、FaBG1、FaCHLH四個(gè)ABA合成代謝關(guān)鍵基因的定量PCR引物。以反轉(zhuǎn)錄的cDNA為模板,研究上述四個(gè)基因在草莓花后7d、14d、21d、28d、32d的表達(dá)模式。結(jié)果表明：FaNCED表達(dá)量總體呈上升趨勢,在花后7d-14d表達(dá)量不高,在花后21d迅速上升,28d有所降低,32d又快速升至最高水平；FaBG1和FaCYP707A1隨草莓果實(shí)的成熟表達(dá)量逐漸降低,在著色期以前果實(shí)的褪綠階段FaBG1和FaCYP707A1均高水平表達(dá),著色期以后FaBG1一直處于極低的表達(dá)水平；FaCYP707A1隨著果實(shí)的著色,表達(dá)量略微升高,在果實(shí)全紅時(shí)期又迅速降至最低；FaCHLH在果實(shí)發(fā)育的整個(gè)階段,不管是褪綠還是著色過程都有穩(wěn)定表達(dá),較于褪綠階段其著色時(shí)期的表達(dá)量相對較低,在花后21d表達(dá)量最低。綜合以上結(jié)果可以得出：FaBG1主要與坐果和果實(shí)的褪綠有關(guān),參與草莓果實(shí)早期發(fā)育階段ABA的積累；著色期以后果實(shí)ABA的積累主要與FaNCED有關(guān)；FaCHLH與果實(shí)中ABA信號(hào)的傳導(dǎo)有關(guān)促進(jìn)了糖和花色苷的積累。
【關(guān)鍵詞】：草莓果實(shí) 脫落酸 合成 代謝 受體 基因表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S668.4
【目錄】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 第一章 文獻(xiàn)綜述10-18
• 1 引言10-11
• 2 國內(nèi)外關(guān)于該課題的研究現(xiàn)狀及趨勢11-17
• 2.1 草莓果實(shí)成熟過程中主要品質(zhì)特征變化11-14
• 2.1.1 果實(shí)中的可溶性糖11
• 2.1.2 果實(shí)中的有機(jī)酸11-12
• 2.1.3 果實(shí)中的花色素和花色苷12-14
• 2.2 ABA功能的研究進(jìn)展14-17
• 2.2.1 ABA的合成、代謝及受體蛋白15-17
• 2.2.2 ABA合成代謝相關(guān)酶基因在草莓果實(shí)成熟過程中的研究進(jìn)展17
• 3 立題依據(jù)及技術(shù)路線17-18
• 3.1 課題的目的與意義17-18
• 3.2 技術(shù)路線18
• 第二章 脫落酸在草莓成熟著色上的生理作用18-31
• 1 材料與方法19-22
• 1.1 試驗(yàn)材料及處理19-20
• 1.2 方法20-22
• 1.2.1 樣品ABA的提取和測定20
• 1.2.2 可溶性糖含量測定20-21
• 1.2.3 有機(jī)酸含量測定21
• 1.2.4 花色苷定性定量分析21-22
• 1.2.5 數(shù)據(jù)分析22
• 2 結(jié)果與分析22-27
• 2.1 不同濃度NDGA對樣品ABA含量的影響22-24
• 2.2 樣品可溶性糖、有機(jī)酸含量的變化及與ABA的相關(guān)性分析24-26
• 2.3 樣品天竺葵素葡萄糖苷含量的變化及與ABA的相關(guān)性分析26-27
• 3 討論與結(jié)論27-31
• 3.1 NDGA對ABA含量的影響27-28
• 3.2 草莓果實(shí)著色前后糖、酸、花色苷和ABA的變化28-29
• 3.3 ABA對草莓果實(shí)著色和果實(shí)品質(zhì)的影響29-31
• 第三章 草莓ABA關(guān)鍵調(diào)控基因的表達(dá)模式31-48
• 1 材料與方法31-36
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料及處理31-32
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法32-35
• 1.2.1 總RNA提取32-33
• 1.2.2 RNA完整性及質(zhì)量檢測33
• 1.2.3 cDNA第一鏈合成33-34
• 1.2.4 引物的設(shè)計(jì)與合成34-35
• 1.2.5 實(shí)時(shí)定量PCR體系及程序35
• 1.3 數(shù)據(jù)處理35-36
• 2 結(jié)果與分析36-41
• 2.1 RNA完整性與純度分析36
• 2.2 基因表達(dá)模式分析36-41
• 2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的構(gòu)建36-37
• 2.2.2 FaNCED在草莓果實(shí)成熟過程中的表達(dá)模式37-38
• 2.2.3 FaBG1在草莓果實(shí)成熟過程中的表達(dá)模式38-39
• 2.2.4 FaCYP707A1在草莓果實(shí)成熟過程中的表達(dá)模式39-40
• 2.2.5 FaCHLH在草莓果實(shí)成熟過程中的表達(dá)量分析40-41
• 3 討論41-46
• 3.1 FaNCED、FaCYP707A1和FaBG1在草莓果實(shí)成熟過程中的表達(dá)模式41-44
• 3.2 FaCHLH在草莓果實(shí)成熟過程中的表達(dá)模式44-45
• 3.3 ABA合成代謝相關(guān)基因的表達(dá)與果實(shí)產(chǎn)物積累45-46
• 4 結(jié)論46-48
• 第四章 需進(jìn)一步研究的內(nèi)容48-49
• 參考文獻(xiàn)49-59
• 附錄59-61
• 1. 主要試劑配制59-60
• 2. 主要使用儀器60-61

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1 孫瑞W，

本文編號(hào)：431469