本文關(guān)鍵詞：植物激素脫落酸在草莓果實成熟著色上的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：脫落酸(Abscisic acid, ABA)是植物體的一種重要內(nèi)源激素,在植物胚的形成、調(diào)控氣孔的開閉以及干旱、高鹽、低溫、機械損傷等一系列逆境條件下的生理響應(yīng)有著重要作用。近幾年有研究指出脫落酸對非呼吸越變型果實的成熟也有至關(guān)重要的影響,調(diào)控著果實的成熟著色過程。草莓是典型的非呼吸越變型果實,口感酸甜適宜,營養(yǎng)成分豐富,深受廣大消費者的喜愛。本實驗以‘紅顏’草莓為材料,從坐果開始通過不同濃度NDGA (nordihydroguaiaretic acid,去甲二氫愈創(chuàng)木酸)抑制果實中ABA的合成,以ABA處理為正對照,清水處理為CK,研究草莓果實成熟著色過程中ABA的作用。通過酶聯(lián)免疫法測定不同處理下果實中ABA的含量；高效液相色譜法測定不同處理下草莓果實中主要花色苷天竺葵素葡萄糖苷的含量、蒽酮比色法測定糖的含量、酸堿滴定法測定酸的含量；同時結(jié)合熒光定量PCR研究了控制ABA合成代謝的相關(guān)酶基因FaNCED, FaCYP707A1、FaBG1 以及FaCHLH在草莓果實成熟發(fā)育過程中的表達(dá)模式,分析它們與ABA的關(guān)系。研究結(jié)果表明：1. NDGA抑制了草莓果實中ABA的合成,處理濃度越大抑制作用越明顯；外源ABA處理促進了果實中ABA含量的升高。草莓果實中的ABA含量與糖、天竺葵素葡萄糖苷等密切相關(guān),與酸含量的并沒有直接關(guān)系。草莓果實中高濃度的ABA有利于糖和天竺葵素葡萄糖苷的形成。2.草莓果實中的ABA含量變化呈‘N’字型趨勢。從坐果開始到完全褪綠階段ABA含量升高花后21d達(dá)到第一個峰值,略微調(diào)整下降后,隨著果實的著色又恢復(fù)上升趨勢,到果實全紅時期含量最高。糖含量和天竺葵素葡萄糖苷總體均呈現(xiàn)升高的趨勢,酸含量總體呈下降趨勢,并且這兩種趨勢變化在果實著色期間表現(xiàn)更加明顯。3.通過改良的CTAB法提取草莓果實總RNA,反轉(zhuǎn)錄為cDNA,并設(shè)計FaNCED、FaCYP707A1、FaBG1、FaCHLH四個ABA合成代謝關(guān)鍵基因的定量PCR引物。以反轉(zhuǎn)錄的cDNA為模板,研究上述四個基因在草莓花后7d、14d、21d、28d、32d的表達(dá)模式。結(jié)果表明：FaNCED表達(dá)量總體呈上升趨勢,在花后7d-14d表達(dá)量不高,在花后21d迅速上升,28d有所降低,32d又快速升至最高水平；FaBG1和FaCYP707A1隨草莓果實的成熟表達(dá)量逐漸降低,在著色期以前果實的褪綠階段FaBG1和FaCYP707A1均高水平表達(dá),著色期以后FaBG1一直處于極低的表達(dá)水平；FaCYP707A1隨著果實的著色,表達(dá)量略微升高,在果實全紅時期又迅速降至最低；FaCHLH在果實發(fā)育的整個階段,不管是褪綠還是著色過程都有穩(wěn)定表達(dá),較于褪綠階段其著色時期的表達(dá)量相對較低,在花后21d表達(dá)量最低。綜合以上結(jié)果可以得出：FaBG1主要與坐果和果實的褪綠有關(guān),參與草莓果實早期發(fā)育階段ABA的積累；著色期以后果實ABA的積累主要與FaNCED有關(guān)；FaCHLH與果實中ABA信號的傳導(dǎo)有關(guān)促進了糖和花色苷的積累。
【關(guān)鍵詞】：草莓果實 脫落酸 合成 代謝 受體 基因表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S668.4
【目錄】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 第一章 文獻綜述10-18
• 1 引言10-11
• 2 國內(nèi)外關(guān)于該課題的研究現(xiàn)狀及趨勢11-17
• 2.1 草莓果實成熟過程中主要品質(zhì)特征變化11-14
• 2.1.1 果實中的可溶性糖11
• 2.1.2 果實中的有機酸11-12
• 2.1.3 果實中的花色素和花色苷12-14
• 2.2 ABA功能的研究進展14-17
• 2.2.1 ABA的合成、代謝及受體蛋白15-17
• 2.2.2 ABA合成代謝相關(guān)酶基因在草莓果實成熟過程中的研究進展17
• 3 立題依據(jù)及技術(shù)路線17-18
• 3.1 課題的目的與意義17-18
• 3.2 技術(shù)路線18
• 第二章 脫落酸在草莓成熟著色上的生理作用18-31
• 1 材料與方法19-22
• 1.1 試驗材料及處理19-20
• 1.2 方法20-22
• 1.2.1 樣品ABA的提取和測定20
• 1.2.2 可溶性糖含量測定20-21
• 1.2.3 有機酸含量測定21
• 1.2.4 花色苷定性定量分析21-22
• 1.2.5 數(shù)據(jù)分析22
• 2 結(jié)果與分析22-27
• 2.1 不同濃度NDGA對樣品ABA含量的影響22-24
• 2.2 樣品可溶性糖、有機酸含量的變化及與ABA的相關(guān)性分析24-26
• 2.3 樣品天竺葵素葡萄糖苷含量的變化及與ABA的相關(guān)性分析26-27
• 3 討論與結(jié)論27-31
• 3.1 NDGA對ABA含量的影響27-28
• 3.2 草莓果實著色前后糖、酸、花色苷和ABA的變化28-29
• 3.3 ABA對草莓果實著色和果實品質(zhì)的影響29-31
• 第三章 草莓ABA關(guān)鍵調(diào)控基因的表達(dá)模式31-48
• 1 材料與方法31-36
• 1.1 實驗材料及處理31-32
• 1.2 實驗方法32-35
• 1.2.1 總RNA提取32-33
• 1.2.2 RNA完整性及質(zhì)量檢測33
• 1.2.3 cDNA第一鏈合成33-34
• 1.2.4 引物的設(shè)計與合成34-35
• 1.2.5 實時定量PCR體系及程序35
• 1.3 數(shù)據(jù)處理35-36
• 2 結(jié)果與分析36-41
• 2.1 RNA完整性與純度分析36
• 2.2 基因表達(dá)模式分析36-41
• 2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的構(gòu)建36-37
• 2.2.2 FaNCED在草莓果實成熟過程中的表達(dá)模式37-38
• 2.2.3 FaBG1在草莓果實成熟過程中的表達(dá)模式38-39
• 2.2.4 FaCYP707A1在草莓果實成熟過程中的表達(dá)模式39-40
• 2.2.5 FaCHLH在草莓果實成熟過程中的表達(dá)量分析40-41
• 3 討論41-46
• 3.1 FaNCED、FaCYP707A1和FaBG1在草莓果實成熟過程中的表達(dá)模式41-44
• 3.2 FaCHLH在草莓果實成熟過程中的表達(dá)模式44-45
• 3.3 ABA合成代謝相關(guān)基因的表達(dá)與果實產(chǎn)物積累45-46
• 4 結(jié)論46-48
• 第四章 需進一步研究的內(nèi)容48-49
• 參考文獻49-59
• 附錄59-61
• 1. 主要試劑配制59-60
• 2. 主要使用儀器60-61

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1 孫瑞W，

本文編號：431469