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四種海膽棘的顯微結(jié)構(gòu)和基于線粒體基因組全序列的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)研究

發(fā)布時間:2017-06-07 15:22

  本文關(guān)鍵詞:四種海膽棘的顯微結(jié)構(gòu)和基于線粒體基因組全序列的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:本文以雜色角孔海膽(Salmacis sphaeroides variegata)、疏棘角孔海膽(Salmacis bicolor rarispina)、哈氏刻肋海膽(Temnopleurns hardwickii)和細(xì)雕刻肋海膽(Temnopleurus toreumaticus)為研究對象,利用傳統(tǒng)方法結(jié)合電鏡技術(shù)進(jìn)行形態(tài)學(xué)分類研究,重點(diǎn)是棘和叉棘。線粒體基因組全序測定方面,以long-PCR結(jié)合常規(guī)PCR方法,測定了2種角孔海膽的線粒體基因組全序列,并采用線粒體基因組全序?qū)@兩種海膽進(jìn)行分析比較,同時結(jié)合其他11種拱齒目海膽線粒體基因組全序進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系和遺傳分化研究。本研究成果為海膽的分類學(xué)和線粒體基因組數(shù)據(jù)庫提供了基礎(chǔ)資料和分子依據(jù)。角孔海膽和刻肋海膽的大棘和中棘形態(tài)差異顯著,小棘形態(tài)差別不大。叉棘方面4種海膽分化明顯,尤其是球形叉棘和三叉叉棘。角孔海膽的蛇首叉棘每瓣兩側(cè)上方4個齒、下方3個等大的齒,只在上方具有鋸齒結(jié)構(gòu);刻肋海膽上方具有4-6個齒、下方中間明顯突出的3個齒,從邊緣到內(nèi)部隆起脊上都有鋸齒。雜色角孔海膽的三叉叉棘每瓣上方缺刻不明顯,兩側(cè)略有起伏,邊緣有2到3列鋸齒密集排列,疏棘角孔海膽每瓣較寬,瓣上方兩側(cè)具有明顯的4個齒,邊緣密集排列2列乳突狀鋸齒。疏棘角孔的球形叉棘上方分叉,伸出部位孔狀結(jié)構(gòu),下方兩側(cè)突出平緩;2種刻肋海膽分叉愈合成深凹槽,伸出部內(nèi)側(cè)具凹陷,兩側(cè)各有一個側(cè)齒,哈氏刻肋海膽側(cè)齒不明顯,細(xì)雕刻肋海膽側(cè)齒細(xì)長尖銳,兩種下方突出明顯,兩側(cè)形成大的凹陷。角孔海膽三葉叉棘寬窄分界明顯,邊緣有鋸齒,下方有2個齒,疏棘角孔的形似“芭蕉扇”葉;刻肋海膽較為寬短,邊緣有鋸齒,變窄區(qū)域很小或者不明顯,兩側(cè)各有2個突出的齒,下方和內(nèi)部隆起脊上具尖銳的鋸齒,細(xì)雕刻肋瓣近似長方形,邊緣十分平直。實(shí)驗(yàn)測得雜色角孔海膽線粒體基因組長度為15762bp,疏棘角孔海膽為15767bp,包括22個tRNA.2個核糖體RNA、13個蛋白質(zhì)編碼基因以及非編碼區(qū)。核糖體RNA具有較高的保守性。兩種角孔海膽堿基含量均具有明顯的AT偏移,除控制區(qū)外AT含量差異較小,一般在60%到65%,16S rRNA為AT富集區(qū)。蛋白質(zhì)編碼基因堿基含量總體上AT含量H鏈低于L鏈,密碼子上從第一位點(diǎn)到第三位點(diǎn)逐漸遞增,22個tRNA,總的堿基含量也存在明顯的AT偏移,H鏈和L鏈差別不大。兩種角孔海膽同源蛋白質(zhì)基因的長度和順序相同,共含有3819個密碼子(不包括終止密碼子),多數(shù)基因用ATG作為起始密碼子,少數(shù)使用GTG、ATC或ATA,全部使用完全終止密碼子,TAG或TAA。兩種角孔海膽都包含22個tRNA,長度范圍均為68bp-74bp,都分別包括兩種亮氨酸和絲氨酸的tRNA,其中的21個tRNA均可以折疊成三葉草結(jié)構(gòu),tRNASer(AGN)不能生成二級結(jié)構(gòu);13種拱齒目海膽線粒體基因組全序構(gòu)建的貝葉斯系統(tǒng)樹與基于蛋白質(zhì)編碼基因構(gòu)建的ML樹結(jié)果完全一致,基于核糖體RNA構(gòu)建的ML樹差異不大,而基于22個tRNA構(gòu)建的ML樹差異顯著。本次實(shí)驗(yàn)中得到的2種角孔海膽的親緣關(guān)系彼此最近,2種角孔海膽屬海膽又與2種刻肋海膽屬海膽關(guān)系較近,與形態(tài)學(xué)分類結(jié)果相一致,4種刻肋海膽與其他11種海膽的遺傳距離相對都較遠(yuǎn)。
【關(guān)鍵詞】:疏棘角孔海膽 雜色角孔海膽 叉棘 線粒體基因組 系統(tǒng)發(fā)育 拱齒目
【學(xué)位授予單位】:中國海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:S917.4
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • Abstract7-12
  • 第一章 前言12-22
  • 1.1 系統(tǒng)發(fā)育學(xué)及其研究進(jìn)展12-14
  • 1.1.1 系統(tǒng)發(fā)育學(xué)概述12-14
  • 1.1.2 系統(tǒng)發(fā)育學(xué)研究方法14
  • 1.2 生物信息學(xué)14-16
  • 1.3 海膽的研究現(xiàn)狀16-22
  • 1.3.1 海膽目前形態(tài)學(xué)研究概況16-18
  • 1.3.2 線粒體及其基因組18-20
  • 1.3.3 海膽綱線粒體基因組研究現(xiàn)狀20
  • 1.3.4 本次研究的目的及意義20-22
  • 第二章 兩種角孔海膽和兩種刻肋海膽的形態(tài)學(xué)研究22-47
  • 2.1 材料與方法23-25
  • 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料23
  • 2.1.2 樣品處理23-24
  • 2.1.3 掃描電子顯微鏡24-25
  • 2.2 兩種角孔海膽的形態(tài)學(xué)研究25-37
  • 2.2.1 雜色角孔海膽Salmacis sphaeroides variegata Mortensen,194226-31
  • 2.2.2 疏棘角孔海膽Salmacis bicolor rarispina L.Agassiz,184631-37
  • 2.3 兩種刻肋海膽的形態(tài)學(xué)研究37-45
  • 2.3.1 哈氏刻肋海膽Temnopleurus hardwickii(Gray,1855)37-42
  • 2.3.2 細(xì)雕刻肋海膽Temnopleurus toreumaticus(Leske,1778)42-45
  • 2.4 討論45-47
  • 第三章 雜色角孔海膽的線粒體基因組全序測定及組成分析47-57
  • 3.1 實(shí)驗(yàn)材料47
  • 3.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟47-49
  • 3.2.1 DNA的提取47-48
  • 3.2.2 引物設(shè)計(jì)48
  • 3.2.3 PCR擴(kuò)增、產(chǎn)物檢測與純化48-49
  • 3.3 數(shù)據(jù)分析49-50
  • 3.4 結(jié)果與討論50-57
  • 3.4.1 雜色角孔海膽的線粒體基因組組成50-51
  • 3.4.2 堿基組成及結(jié)構(gòu)分析51-54
  • 3.4.3 蛋白質(zhì)編碼基因54-56
  • 3.4.4 rRNA基因和tRNA基因56
  • 3.4.5 非編碼區(qū)56-57
  • 第四章 疏棘角孔海膽的線粒體基因組全序測定及組成分析57-65
  • 4.1 實(shí)驗(yàn)材料57
  • 4.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟57
  • 4.2.1 DNA的提取57
  • 4.2.2 引物設(shè)計(jì)57
  • 4.2.3 PCR擴(kuò)增、產(chǎn)物檢測與純化57
  • 4.3 數(shù)據(jù)分析57-58
  • 4.4 結(jié)果與討論58-65
  • 4.4.1 疏棘角孔海膽的線粒體基因組組成58-59
  • 4.4.2 堿基組成及結(jié)構(gòu)分析59-62
  • 4.4.3 蛋白質(zhì)編碼基因62-64
  • 4.4.4 rRNA基因和tRNA基因64
  • 4.4.5 非編碼區(qū)64-65
  • 第五章 基于海膽線粒體基因組全序列及各基因片段的系統(tǒng)發(fā)育分析65-73
  • 5.1 實(shí)驗(yàn)材料65
  • 5.2 數(shù)據(jù)處理65-66
  • 5.2.1 線粒體基因序列多態(tài)分析65
  • 5.2.2 系統(tǒng)發(fā)育分析65-66
  • 5.3 結(jié)果分析66-73
  • 5.3.1 2種角孔海膽的線粒體基囚序列多態(tài)分析66-67
  • 5.3.2 基于13種海膽線粒體基因全序的系統(tǒng)發(fā)育分析67-68
  • 5.3.3 基于蛋白質(zhì)編碼基因的系統(tǒng)發(fā)育分析68-70
  • 5.3.4 基于核糖體RNA的系統(tǒng)發(fā)育分析70-71
  • 5.3.5 基于22個tRNA的系統(tǒng)發(fā)育分析71-73
  • 第六章 總結(jié)73-76
  • 6.1 形態(tài)學(xué)研究73-74
  • 6.2 基于線粒體基因組全序的系統(tǒng)發(fā)育分析74-76
  • 參考文獻(xiàn)76-83
  • 致謝83-84
  • 個人簡歷及發(fā)表的學(xué)術(shù)論文84

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5 張尚宏;動物與植物線粒體基因組結(jié)構(gòu)的差異──兩種進(jìn)化途徑[J];動物學(xué)研究;1995年02期

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本文編號:429511


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