先天性免疫(Innate Immune)是生物體抵御和清除入侵病原體的第一道防線,主要起防御、監(jiān)視和維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的作用。免疫系統(tǒng)具有雙向調(diào)節(jié)作用,即能清除病原體的入侵,又能防止免疫系統(tǒng)紊亂時發(fā)生過度免疫反應(yīng),損傷自身細胞。IL1R1(Interleukin-1 receptor 1)是細胞表面重要的免疫基因,它是白細胞介素-1(IL-1)的高親和力受體,且在生物體炎癥反應(yīng)和免疫信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中起重要作用。基于該受體在免疫系統(tǒng)中所起的重要作用,通過調(diào)控IL1R1的表達來調(diào)節(jié)生物體免疫應(yīng)答的研究也就顯得尤為重要。近年研究發(fā)現(xiàn)了一種長22-24nt的短鏈非編碼microRNA,它可以通過特異性約4-8個堿基的序列與靶基因的3’UTR區(qū)特異序列互補配對,進而阻斷靶基因mRNA的翻譯,它還可以調(diào)節(jié)機體免疫系統(tǒng)。鮸魚作為重要的水產(chǎn)經(jīng)濟養(yǎng)殖物種,因其具有重要的食用和藥用價值而廣受歡迎。在本文中,我們研究了鮸魚miR-21對其靶基因鮸魚IL1R1的負調(diào)控作用:實驗方法:主要使用了質(zhì)粒構(gòu)建、雙熒光素酶報告基因?qū)嶒�、Western Blot等實驗方法研究兩者關(guān)系;最終得出結(jié)論:miR-21可以靶向負調(diào)控I...

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3-1不同物種pre-miR-21序列的比對(A)和系統(tǒng)發(fā)生樹構(gòu)建(B)

鮸魚microRNA-21對IL1R1的免疫調(diào)控機制研究22第三章實驗結(jié)果及討論3.1pre-miR-21系統(tǒng)發(fā)育樹分析我們對來自魚類中11個不同物種的pre-miR-21莖環(huán)序列進行了比對研究，我們發(fā)現(xiàn)這11個物種的pre-miR-21序列共享一個與成熟miR-21相對應(yīng)的高保....

圖3-2-1mmi-miR-21可以靶向調(diào)控的基因Fig.3-2-1Thepotentialgenesweretargetingbymmi-miR-21havebeenpredictedusingthesoftwareofmiRandaandTargetScan

23圖3-2-1mmi-miR-21可以靶向調(diào)控的基因Fig.3-2-1Thepotentialgenesweretargetingbymmi-miR-21havebeenpredictedusingthesoftwareofmiRandaandTargetScan為了驗證miR....

圖3-2-2IL1R1-3"UTR野生型和突變型pmri-GLO質(zhì)粒構(gòu)建Fig.3-2-2TheIL1R1-3’UTRsequencewasinsertedintothepmriGLOvectortoconstructthe

23圖3-2-1mmi-miR-21可以靶向調(diào)控的基因Fig.3-2-1Thepotentialgenesweretargetingbymmi-miR-21havebeenpredictedusingthesoftwareofmiRandaandTargetScan為了驗證miR....

圖3-3-1miR-21模擬體(A)和pre-miR-21質(zhì)粒(B)對IL1R1-3’UTR野生型和突變體的作用Fig.3-3-1IL1R1-3’UTR(WT-UTR)wasco-transfectedintoEPCcellswithmiR-21mimics,control

iR-21序列，并將其插入到pcDNA3.1載體中。然后，我們將pre-miR-21質(zhì)粒和IL1R1-3’UTR-WT共轉(zhuǎn)染至EPC細胞中，轉(zhuǎn)染后24h檢測細胞熒光素酶報告基因活性，同時我們將pre-miR-21質(zhì)粒和IL1R1-3’UTR-MT共轉(zhuǎn)染至EPC細胞中，轉(zhuǎn)染后24h....

本文編號：3959253