先天性免疫(Innate Immune)是生物體抵御和清除入侵病原體的第一道防線,主要起防御、監(jiān)視和維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的作用。免疫系統(tǒng)具有雙向調(diào)節(jié)作用,即能清除病原體的入侵,又能防止免疫系統(tǒng)紊亂時(shí)發(fā)生過(guò)度免疫反應(yīng),損傷自身細(xì)胞。IL1R1(Interleukin-1 receptor 1)是細(xì)胞表面重要的免疫基因,它是白細(xì)胞介素-1(IL-1)的高親和力受體,且在生物體炎癥反應(yīng)和免疫信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中起重要作用�；谠撌荏w在免疫系統(tǒng)中所起的重要作用,通過(guò)調(diào)控IL1R1的表達(dá)來(lái)調(diào)節(jié)生物體免疫應(yīng)答的研究也就顯得尤為重要。近年研究發(fā)現(xiàn)了一種長(zhǎng)22-24nt的短鏈非編碼microRNA,它可以通過(guò)特異性約4-8個(gè)堿基的序列與靶基因的3’UTR區(qū)特異序列互補(bǔ)配對(duì),進(jìn)而阻斷靶基因mRNA的翻譯,它還可以調(diào)節(jié)機(jī)體免疫系統(tǒng)。鮸魚(yú)作為重要的水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖物種,因其具有重要的食用和藥用價(jià)值而廣受歡迎。在本文中,我們研究了鮸魚(yú)miR-21對(duì)其靶基因鮸魚(yú)IL1R1的負(fù)調(diào)控作用:實(shí)驗(yàn)方法:主要使用了質(zhì)粒構(gòu)建、雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)、Western Blot等實(shí)驗(yàn)方法研究?jī)烧哧P(guān)系;最終得出結(jié)論:miR-21可以靶向負(fù)調(diào)控I...

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3-1不同物種pre-miR-21序列的比對(duì)(A)和系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)構(gòu)建(B)

鮸魚(yú)microRNA-21對(duì)IL1R1的免疫調(diào)控機(jī)制研究22第三章實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論3.1pre-miR-21系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)分析我們對(duì)來(lái)自魚(yú)類中11個(gè)不同物種的pre-miR-21莖環(huán)序列進(jìn)行了比對(duì)研究，我們發(fā)現(xiàn)這11個(gè)物種的pre-miR-21序列共享一個(gè)與成熟miR-21相對(duì)應(yīng)的高保....

圖3-2-1mmi-miR-21可以靶向調(diào)控的基因Fig.3-2-1Thepotentialgenesweretargetingbymmi-miR-21havebeenpredictedusingthesoftwareofmiRandaandTargetScan

23圖3-2-1mmi-miR-21可以靶向調(diào)控的基因Fig.3-2-1Thepotentialgenesweretargetingbymmi-miR-21havebeenpredictedusingthesoftwareofmiRandaandTargetScan為了驗(yàn)證miR....

圖3-2-2IL1R1-3"UTR野生型和突變型pmri-GLO質(zhì)粒構(gòu)建Fig.3-2-2TheIL1R1-3’UTRsequencewasinsertedintothepmriGLOvectortoconstructthe

23圖3-2-1mmi-miR-21可以靶向調(diào)控的基因Fig.3-2-1Thepotentialgenesweretargetingbymmi-miR-21havebeenpredictedusingthesoftwareofmiRandaandTargetScan為了驗(yàn)證miR....

圖3-3-1miR-21模擬體(A)和pre-miR-21質(zhì)粒(B)對(duì)IL1R1-3’UTR野生型和突變體的作用Fig.3-3-1IL1R1-3’UTR(WT-UTR)wasco-transfectedintoEPCcellswithmiR-21mimics,control

iR-21序列，并將其插入到pcDNA3.1載體中。然后，我們將pre-miR-21質(zhì)粒和IL1R1-3’UTR-WT共轉(zhuǎn)染至EPC細(xì)胞中，轉(zhuǎn)染后24h檢測(cè)細(xì)胞熒光素酶報(bào)告基因活性，同時(shí)我們將pre-miR-21質(zhì)粒和IL1R1-3’UTR-MT共轉(zhuǎn)染至EPC細(xì)胞中，轉(zhuǎn)染后24h....

本文編號(hào)：3959253