Takeout(to)基因是一種節(jié)律調(diào)控輸出基因,廣泛存在于昆蟲的營養(yǎng)功能和化學(xué)感受等相關(guān)組織。to基因主要參與昆蟲的生長發(fā)育、行為調(diào)節(jié)及多種生理代謝過程。為探究to基因在蜜蜂中的表達(dá)規(guī)律和相關(guān)生物學(xué)功能,我們克隆了中華蜜蜂Apis cerana cerana和意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica的to基因,分析該基因在哺育蜂和采集蜂各組織的mRNA表達(dá)規(guī)律,并利用RNA干擾技術(shù)進(jìn)一步探討了其生物學(xué)功能。主要研究結(jié)果如下:通過反轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(RT-PCR)首次克隆獲得了中華蜜蜂和意大利蜜蜂to基因的cDNA序列分別為1058 bp和783 bp,依次命名為AcTO1和AmTO1,其開放閱讀框(ORF)長度均為738 bp,均編碼246個(gè)氨基酸,預(yù)測的蛋白質(zhì)分子質(zhì)量分別為27.09和27.07 kDa,等電點(diǎn)pI均為8.40。生物信息學(xué)分析結(jié)果表明,AcTO1和AmTO1蛋白在N端均有一段信號肽序列,無跨膜結(jié)構(gòu),均為分泌蛋白。此外,2種蛋白的氨基酸序列中都存在一個(gè)保幼激素結(jié)合蛋白(JHBP)超家族的保守結(jié)構(gòu)域。采用熒光定量PCR技術(shù)qRT-PCR對中華蜜蜂...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２?ＰＣＲ產(chǎn)物電泳分析??Ｆｉｇｕｒｅ?２－２．?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ??

３結(jié)果與分析??３．?１中華蜜蜂和意大利蜜蜂總ＲＮＡ質(zhì)量鑒定??部分樣本ＲＮＡ經(jīng)１．５％瓊脂糖凝膠電泳檢測（見圖２－〗），左邊兩個(gè)泳道為中華蜜蜂??樣品，右邊兩個(gè)泳道為意大利蜜蜂樣品，電泳圖可清晰地看到三條帶，從上到下依次為??２８Ｓ，１８Ｓ和５Ｓ�？傮w上來看，所提取的蜜蜂總ＲＮ....

圖２－４?ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ蛋白的信號肷預(yù)測結(jié)果??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４．?Ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｆｏｒ?ｓｉｎｇａｌ?ｐｅｐｔｉｄｅ?ｉｎ?ＡｃＴＯｌ?ａｎｄ?ＡｍＴＯｌ??

??圖２－５?ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ蛋白跨膜結(jié)構(gòu)的預(yù)測??Ｆｉｇｕｒｅ?２－５．?Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＡｃＴＯｌ?ａｎｄ?ＡｍＴＯｌ??２０??

圖２－６?ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ的保守結(jié)構(gòu)區(qū)域??Ｆｉｇｕｒｅ?２－６．?Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?Ｄｏｍａｉｎｓ?ｏｆ?ＡｃＴＯｌ?ａｎｄ?ＡｍＴＯｌ??

?３．３．４?保守結(jié)構(gòu)區(qū)域的分析??２個(gè)ＴＯ蛋白的保守結(jié)構(gòu)域預(yù)測采用ＮＣＢＩ?Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?Ｄｏｍａｉｎｓ對（圖２－６），??結(jié)果表明它們均具有ＪＨＢＰ?ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ家族的保守結(jié)構(gòu)域。ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ的??保守結(jié)構(gòu)區(qū)域都位于第７－２４４位氨基酸之間，Ｅ－ｖａ....

圖２－７?ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ的功能結(jié)構(gòu)域??－

?３．３．４?保守結(jié)構(gòu)區(qū)域的分析??２個(gè)ＴＯ蛋白的保守結(jié)構(gòu)域預(yù)測采用ＮＣＢＩ?Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?Ｄｏｍａｉｎｓ對（圖２－６），??結(jié)果表明它們均具有ＪＨＢＰ?ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ家族的保守結(jié)構(gòu)域。ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ的??保守結(jié)構(gòu)區(qū)域都位于第７－２４４位氨基酸之間，Ｅ－ｖａ....

本文編號：3949085