高鹽嚴(yán)重影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育,導(dǎo)致農(nóng)作物減產(chǎn)。加強(qiáng)植物耐鹽機(jī)制的研究對(duì)提高植物的耐鹽性以及農(nóng)作物的產(chǎn)量具有重要意義。U-box型E3泛素連接酶是泛素系統(tǒng)的關(guān)鍵酶,參與調(diào)控許多生物學(xué)過(guò)程。已有研究發(fā)現(xiàn)多種U-box蛋白在植物的非生物脅迫過(guò)程中起著重要作用。我們從小麥中克隆到了一個(gè)編碼U-box蛋白的基因TaPUB26。接著對(duì)該基因進(jìn)行序列比對(duì)及進(jìn)化分析,并檢測(cè)了該基因的表達(dá)模式。為了研究該基因在植物耐鹽性中的功能,將該基因異源轉(zhuǎn)化單子葉模式植物二穗短柄草并獲得了過(guò)表達(dá)TaPUB26的轉(zhuǎn)基因植株。利用轉(zhuǎn)基因二穗短柄草研究了TaPUB26在植物耐鹽性中的功能機(jī)制。主要結(jié)果如下:(1)通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析,發(fā)現(xiàn)了一個(gè)鹽脅迫下高度上調(diào)的U-box基因TaPUB26(AK334574.1)。該基因cDNA全長(zhǎng)1703bp,開放閱讀框1341bp,編碼446個(gè)氨基酸。其編碼的蛋白質(zhì)N端含有一個(gè)U-box結(jié)構(gòu)域,C端含有ARM重復(fù)序列。研究發(fā)現(xiàn),TaPUB26蛋白定位于細(xì)胞核中。通過(guò)體外泛素化實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)TaPUB26具有E3泛素連接酶活性,但是這種活性依賴于E1和E2。(2)檢測(cè)了TaPUB26在小麥...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1泛素/26S蛋白酶體降解途徑模式圖（Sadanandometal.,2012）

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文72014;Gehanetal.,2015）。研究表明，較為耐鹽的小麥品種在受到鹽脅迫時(shí)體內(nèi)bZIP基因表達(dá)下調(diào)，相反鹽脅迫較敏感的小麥品種在受到鹽脅迫時(shí)體內(nèi)bZIP基因表達(dá)上調(diào)（Johnsonetal.,2002）。有研究發(fā)現(xiàn)，擬南芥中的WRKY8和WR....

圖1-2植物中E3泛素連接酶的分類（Sadanandometal.,2012）

小麥U-box蛋白基因TaPUB26在二穗短柄草耐鹽性中的功能分析8泛素化過(guò)程如圖1-1所示。泛素激活酶E1在ATP的作用下將泛素分子激活并轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶E2上，最后泛素連接酶E3將泛素分子共價(jià)結(jié)合到特異的靶蛋白上。被泛素標(biāo)記過(guò)的底物靶蛋白，隨后被26S蛋白酶體識(shí)別并降解成小肽....

圖3-1TaPUB26的生物信息學(xué)分析和亞細(xì)胞定位（a）TaPUB26蛋白結(jié)構(gòu)示意圖；（b）TaPUB26與其他植物中U-box蛋白序列的系統(tǒng)進(jìn)化樹

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文33性，但是在不同器官中表達(dá)水平有一定程度的差異。圖3-1TaPUB26的生物信息學(xué)分析和亞細(xì)胞定位（a）TaPUB26蛋白結(jié)構(gòu)示意圖；（b）TaPUB26與其他植物中U-box蛋白序列的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析；（c）TaPUB26與不同物種中同源蛋白的氨基酸序列....

圖3-2TaPUB26基因在小麥不同器官和不同脅迫條件下的表達(dá)模式

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文353.3.2不同非生物脅迫處理?xiàng)l件下TaPUB26基因的表達(dá)模式圖3-2TaPUB26基因在小麥不同器官和不同脅迫條件下的表達(dá)模式（a）TaPUB26基因在小麥根、莖和葉中的表達(dá)模式；TaPUB26基因在不同逆境條件下的表達(dá)模式：（b）以水為對(duì)照；（c）....

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