喹乙醇(Olaquindox)又名喹酰胺醇,具有廣譜抗菌作用,能提高飼料蛋白轉(zhuǎn)化率等作用,常被用于飼料添加物,后經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)其具有蓄積毒性和致畸等危害,2018年我國農(nóng)業(yè)部發(fā)布2638號公告,決定停止喹乙醇等三種獸藥在動物食品中使用,因此開發(fā)快速、高效、準(zhǔn)確的檢測方法尤為重要。本文以喹乙醇抗原和單克隆抗體為基礎(chǔ),研究了化學(xué)發(fā)光體系規(guī)律,開發(fā)了基于魯米洛化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫技術(shù)及時間分辨免疫層析技術(shù),并與常規(guī)免疫吸附試驗和儀器分析方法進(jìn)行對比和驗證,主要研究內(nèi)容如下:1.喹乙醇單克隆抗體擴(kuò)大生產(chǎn)與鑒定采用快速融化法對實驗室現(xiàn)有3株單克隆雜交瘤細(xì)胞復(fù)蘇,采用體內(nèi)誘生法大量制備腹水,辛酸-硫酸銨法純化腹水,得到1#細(xì)胞株抗體效價最大為1:3200,并經(jīng)鑒定單克隆抗體的類型及亞型為IgG1,其IC₅₀為22.013 ng/mL,與其他常用抗生素的交叉反應(yīng)率均低于0.01%,本部分得到高靈敏性、高特異性的喹乙醇單克隆抗體,為后續(xù)免疫分析方法奠定了基礎(chǔ)。2.化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)本部分建立了luminol-HRP-H₂O₂-Enhance化...

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

圖2.1ELISA測定1#抗體靈敏度Fig.2.1Determinethesensitivityof1#antibodybyELISA

圖3.1魯米洛增敏發(fā)光系統(tǒng)

圖3.2早期化學(xué)發(fā)光劑結(jié)構(gòu)式

圖3.3不同增強(qiáng)劑對發(fā)光體系的增強(qiáng)效果

本文編號：3888800