隨著我國(guó)近年來(lái)農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整和種植技術(shù)的提高,設(shè)施蔬菜種植產(chǎn)業(yè)蓬勃發(fā)展,設(shè)施栽培面積不斷擴(kuò)大。然而,設(shè)施栽培往往面臨著多種病蟲害的威脅,其中丁香假單胞菌番茄變種(Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000)引起的細(xì)菌性斑點(diǎn)病在全國(guó)多省市均有發(fā)生,造成的損失嚴(yán)重可達(dá)50%以上。當(dāng)前生產(chǎn)上,病害防治高度依賴化學(xué)殺菌劑,這給食品安全和生態(tài)環(huán)境造成嚴(yán)重的隱患。因此,迫切需要深入研究植物天然免疫的分子機(jī)理。富亮氨酸重復(fù)類受體蛋白激酶(Leucine rich-repeat receptor-like kinase,LRR-RLK)是植物中已知最大的一類跨膜類受體激酶(Receptor-like kinase,RLK),研究顯示,其可以作為模式識(shí)別受體(Pattern recognition receptor,PRR)感知病原菌侵染并激發(fā)植物的天然免疫反應(yīng),本文以番茄作為研究對(duì)象,研究富亮氨酸重復(fù)類受體蛋白激酶SlDALR1(Defence-associated LRR-RLK1)在參與番茄防御細(xì)菌性斑點(diǎn)病過程中的作用及機(jī)制,所得研究成果如下:1.研究了番茄LRR...

【文章頁(yè)數(shù)】：91 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
縮略詞表
1 引言
    1.1 植物病害與設(shè)施生產(chǎn)
    1.2 植物先天免疫反應(yīng)
        1.2.1 抗病基因介導(dǎo)的免疫反應(yīng)
        1.2.2 模式識(shí)別受體介導(dǎo)的免疫反應(yīng)
    1.3 植物L(fēng)RR-RLK及其在植物抗病性中的研究進(jìn)展
        1.3.1 植物L(fēng)RR-RLK家族及結(jié)構(gòu)特征
        1.3.2 植物L(fēng)RR-RLK在植物抗病性中的研究進(jìn)展
    1.4 本文的研究目的及意義
2 番茄LRR-RLK IV家族分析及其對(duì)Pst DC3000 侵染的響應(yīng)
    2.1 材料與方法
        2.1.1 植物材料培養(yǎng)與處理
        2.1.2 番茄LRR-RLK IV基因家族成員的核苷酸及蛋白序列信息獲取
        2.1.3 系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建
        2.1.4 總RNA提取和基因熒光定量分析
        2.1.5 亞細(xì)胞定位
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 番茄LRR-RLK IV家族成員對(duì)Pst DC3000 的響應(yīng)
        2.2.2 Sl DALR1 的亞細(xì)胞定位
        2.2.3 Sl DALR1 的系統(tǒng)發(fā)育分析
    2.3 討論
3 SlDALR1 在番茄防御Pst DC3000 中的作用鑒定
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗(yàn)材料與處理
        3.1.2 VIGS載體構(gòu)建
        3.1.3 病毒誘導(dǎo)基因沉默
        3.1.4 PstDC3000接種處理
        3.1.5 總RNA提取和熒光定量分析
        3.1.6 PstDC3000抗性檢測(cè)
        3.1.7 激素含量測(cè)定
        3.1.8 ROS爆發(fā)測(cè)定
        3.1.9 MAPK活性檢測(cè)
        3.1.10 蛋白提取與免疫印跡
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 SlDALR1 基因沉默對(duì)Pst DC3000 抗性的影響
        3.2.2 SlDALR1 基因沉默對(duì)早期PTI免疫反應(yīng)的影響
        3.2.3 激素對(duì)SlDALR1 沉默對(duì)Pst DC3000 抗性的影響
    3.3 討論
4 番茄SlDALR1 的互作蛋白篩選
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗(yàn)材料與試劑
        4.1.2 載體構(gòu)建
        4.1.3 酵母雙雜交篩庫(kù)
        4.1.4 生物信息學(xué)分析
        4.1.5 雙分子熒光互補(bǔ)
        4.1.6 植物材料培養(yǎng)與處理
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 自激活和毒性檢測(cè)
        4.2.2 互作蛋白的篩選結(jié)果及其序列分析
        4.2.3 候選蛋白互作的確認(rèn)
        4.2.4 候選蛋白在番茄對(duì)PstDC3000抗性中的作用初探
    4.3 討論
5 總結(jié)及展望
參考文獻(xiàn)
附表



本文編號(hào)：3871830