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溫郁金細(xì)菌性枯萎病菌的鑒定及其生防菌的篩選與應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2023-10-17 19:19
  由茄科勞爾氏菌(Ralstonia solanaceraum)引起的溫郁金細(xì)菌性枯萎病對(duì)溫郁金種植可造成毀滅性危害。本研究將實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)保存的解淀粉芽孢桿菌Bacillus amyloliquefaciens ZJU-C612-4和加米那類芽孢桿菌Paenibacillus jamilae ZJUC612-3按比例混合研制出抗溫郁金細(xì)菌性枯萎病的生物有機(jī)肥。通過溫室和田間試驗(yàn)研究了該生物有機(jī)肥對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病的防病效果,并初步探討了兩者的機(jī)制,主要結(jié)果如下:1.利用選擇性培養(yǎng)基M-SMSA從溫郁金發(fā)病塊莖中分離得到4株強(qiáng)致病力茄科勞爾氏菌菌株,根據(jù)形態(tài)特征、flic基因、egl基因系統(tǒng)發(fā)育分析及組培苗回接試驗(yàn)等方法,將菌株TSC7,TSC8,TSC9和TSC10鑒定為茄科勞爾氏菌R.solanacearum種系型Ⅰ;通過菌株對(duì)3種己醇和3種二糖氧化產(chǎn)酸能力的分析,將菌株TSC7,TSC8,TSC9鑒定為生化型4,將菌株TSC10鑒定為生化型3。2.從實(shí)驗(yàn)室保存的37株菌株中有8株對(duì)茄科勞爾氏菌TSC7有抑制作用,其中菌株ZJU-C612-3和ZJU-C612-4對(duì)茄科勞爾氏菌TSC7...

【文章頁(yè)數(shù)】:83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
致謝
摘要
Abstract
縮略詞及專有詞匯檢索表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 引言
    2 溫郁金藥用價(jià)值及病害研究進(jìn)展
        2.1 溫郁金產(chǎn)區(qū)及產(chǎn)品功效
        2.2 溫郁金的病害研究進(jìn)展
        2.3 茄科勞爾氏菌的致病機(jī)理及種內(nèi)分型研究
            2.3.1 茄科勞爾氏菌的致病機(jī)理
            2.3.2 茄科勞爾氏菌的種內(nèi)分型
    3 茄科勞爾氏菌引起的病害生物防治研究進(jìn)展
        3.1 利用細(xì)菌防治茄科勞爾氏菌引起的病害
            3.1.1 利用無(wú)(弱)致病力茄科勞爾氏菌防治
            3.1.2 利用芽孢桿菌防治
            3.1.3 利用假單胞菌防治
            3.1.4 其他細(xì)菌防治
        3.2 利用真菌防治
        3.3 利用鏈霉菌防治
        3.4 利用噬菌體防治
    4 本篇論文研究概況
        4.1 研究?jī)?nèi)容
        4.2 技術(shù)路線
第二章 溫郁金枯萎病調(diào)查與病原菌的鑒定
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 調(diào)查區(qū)域基本情況
            2.1.1 調(diào)查區(qū)域的基本情況
            2.1.2 溫郁金生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程
        2.2 樣品采集與病原菌分離純化
        2.3 病原菌菌株分子生物學(xué)鑒定
            2.3.1 DNA提取
            2.3.2 16SrRNA基因序列擴(kuò)增
            2.3.3 茄科勞爾氏菌種系型測(cè)定
            2.3.4 特異基因序列擴(kuò)增
        2.4 茄科勞爾氏菌生物型測(cè)定
        2.5 茄科勞爾氏菌致病性驗(yàn)證
    3 結(jié)果
        3.1 溫郁金細(xì)菌性枯萎病田間發(fā)病規(guī)律
        3.2 溫郁金塊莖中致病菌的檢測(cè)
        3.3 茄科勞爾氏菌菌株鑒定
            3.3.1 菌株16SrRNA基因測(cè)序
            3.3.2 菌株種系型測(cè)定
        3.4 茄科勞爾氏菌菌株生物型測(cè)定
        3.5 茄科勞爾氏菌菌株致病性驗(yàn)證
    4 小結(jié)與討論
        4.1 小結(jié)
        4.2 討論
第三章 溫郁金細(xì)菌性枯萎病拮抗細(xì)菌的鑒定及特性研究
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 室內(nèi)篩選拮抗細(xì)菌
        2.2 生防菌對(duì)植物病原真菌的抑菌能力
        2.3 生防菌的鑒定
            2.3.1 形態(tài)特征
            2.3.2 分子生物學(xué)鑒定
            2.3.3 生理生化實(shí)驗(yàn)
        2.4 生防菌產(chǎn)酶和代謝產(chǎn)物活性測(cè)定
            2.4.1 蛋白酶活性測(cè)定
            2.4.2 幾丁質(zhì)酶活性測(cè)定
            2.4.3 β-1,3-葡聚糖酶活性檢測(cè)
            2.4.4 纖維素酶活性檢測(cè)
            2.4.5 產(chǎn)嗜鐵素活性檢測(cè)
        2.5 生防菌MALDI-TOF-MS檢測(cè)脂肽類化合物
    3 結(jié)果
        3.1 生防菌對(duì)茄科勞爾氏菌的抑制作用
        3.2 生防菌對(duì)植物病原真菌的抑制作用
        3.3 生防菌株ZJU-C612-3鑒定
            3.3.1 形態(tài)特征
            3.3.2 16SrRNA鑒定
            3.3.3 生理生化實(shí)驗(yàn)
        3.4 生防菌產(chǎn)酶及代謝物活性測(cè)定
        3.5 生防菌脂肽類化合物檢測(cè)
    4 小結(jié)與討論
        4.1 小結(jié)
        4.2 討論
第四章 生物有機(jī)肥對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病的防效研究
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 制備生物有機(jī)肥
        2.2 溫室防病試驗(yàn)
        2.3 田間防病試驗(yàn)
        2.4 統(tǒng)計(jì)與分析
    3 結(jié)果
        3.1 BOF溫室防病效果
        3.2 BOF田間防病效果
    4 小結(jié)與討論
        4.1 小結(jié)
        4.2 討論
第五章 全文總結(jié)
    1 全文結(jié)論
    2 創(chuàng)新點(diǎn)
    3 相關(guān)展望
參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄一 本論文使用培養(yǎng)基
    附錄二 分離到的菌株形態(tài)
    附錄三 R.solanacearum TSC7和P.jamilae ZJU-C612-3序列信息
    附錄四 構(gòu)建egl基因系統(tǒng)進(jìn)化樹采用菌株序列信息
    附錄五 脂肽檢測(cè)圖譜



本文編號(hào):3854855

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