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山丹丹原生質(zhì)體分離初探

發(fā)布時(shí)間:2023-05-31 22:27
  山丹丹(Lilium pumilum DC.)是集觀賞、食用和藥用功能于一體的百合科百合屬植物,因耐寒旱、耐鹽堿能力強(qiáng)成為百合屬植物育種的優(yōu)良資源來源,但百合屬植物有性雜交育種時(shí)存在不親和性,嚴(yán)重降低山丹丹基因資源的利用效率。原生質(zhì)體是缺失細(xì)胞壁、具有植物全套的遺傳基因的活性細(xì)胞團(tuán),原生質(zhì)體融合為植物育種提供新的途徑,原生質(zhì)體則為開展植物細(xì)胞水平、分子水平上的基礎(chǔ)研究提供良好的實(shí)驗(yàn)平臺(tái),因此開展山丹丹原生質(zhì)體的研究對(duì)于百合屬植物優(yōu)化育種、山丹丹種質(zhì)資源理論研究均有重要的意義。為獲得滿足一定數(shù)量和活性要求的山丹丹原生質(zhì)體。本研究以山丹丹鱗片誘導(dǎo)的愈傷組織為試驗(yàn)材料,設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)探究纖維素酶、果膠酶和甘露醇對(duì)山丹丹原生質(zhì)體產(chǎn)量和活性的影響,設(shè)計(jì)單因素試驗(yàn)探究酶解時(shí)間、純化方式、預(yù)處理方式和培養(yǎng)條件對(duì)山丹丹原生質(zhì)體分離和培養(yǎng)的影響,優(yōu)化了山丹丹原生質(zhì)體分離條件,進(jìn)而建立了高效高產(chǎn)的山丹丹原生質(zhì)體分離體系,為山丹丹的種質(zhì)資源高效利用和理論研究提供支持和參考,具體工作如下:1.山丹丹原生質(zhì)體分離最佳酶解時(shí)間為6 h,原生質(zhì)體產(chǎn)量3.46×105個(gè)/mL,活性為39.17%。...

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 前言
    1.1 百合屬簡(jiǎn)介
    1.2 百合屬研究現(xiàn)狀
    1.3 百合屬原生質(zhì)體研究現(xiàn)狀
        1.3.1 百合屬原生質(zhì)體研究意義
        1.3.2 百合屬原生質(zhì)體研究進(jìn)展
    1.4 百合屬原生質(zhì)體分離與培養(yǎng)研究現(xiàn)狀
        1.4.1 原生質(zhì)體分離方法
        1.4.2 影響原生質(zhì)體分離的因素
        1.4.3 原生質(zhì)體培養(yǎng)方法
        1.4.4 影響原生質(zhì)體培養(yǎng)的因素
    1.5 本研究的目的和意義
第二章 研究?jī)?nèi)容與方法
    2.1 研究?jī)?nèi)容
        2.1.1 原生質(zhì)體分離條件的優(yōu)化
        2.1.2 原生質(zhì)體純化條件的優(yōu)化
        2.1.3 原生質(zhì)體初步培養(yǎng)的探索
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 供試材料培養(yǎng)
        2.2.2 原生質(zhì)體分離方法
        2.2.3 原生質(zhì)體純化方法
        2.2.4 原生質(zhì)體培養(yǎng)方法
    2.3 測(cè)定指標(biāo)及方法
        2.3.1 原生質(zhì)體數(shù)目測(cè)定
        2.3.2 原生質(zhì)體活力測(cè)定
        2.3.3 原生質(zhì)體分裂頻率測(cè)定
    2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 材料培養(yǎng)結(jié)果
    3.2 原生質(zhì)體分離條件的優(yōu)化
        3.2.1 酶解時(shí)間對(duì)山丹丹原生質(zhì)體產(chǎn)量和活性的影響
        3.2.2 最佳組合酶液組合的確定
        3.2.3 酶組合對(duì)山丹丹原生質(zhì)體產(chǎn)量和活性的影響
        3.2.4 滲透壓濃度對(duì)山丹丹原生質(zhì)體產(chǎn)量和活性的影響
        3.2.5 預(yù)處理方式對(duì)山丹丹原生質(zhì)體產(chǎn)量和活性的影響
    3.3 原生質(zhì)體純化條件的優(yōu)化
    3.4 原生質(zhì)體初步培養(yǎng)條件的探索
第四章 討論
    4.1 酶液組合對(duì)原生質(zhì)體產(chǎn)量和活性的影響
    4.2 酶解時(shí)間對(duì)原生質(zhì)體產(chǎn)量和活性的影響
    4.3 滲透壓對(duì)原生質(zhì)體產(chǎn)量和活性的影響
    4.4 預(yù)處理方式對(duì)原生質(zhì)體產(chǎn)量和活性的影響
    4.5 離心轉(zhuǎn)速和離心時(shí)間對(duì)原生質(zhì)體分離的影響
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間的研究成果



本文編號(hào):3826121

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