本文關(guān)鍵詞：萎縮芽孢桿菌SF1拮抗蛋白質(zhì)的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：胡麻枯萎病是由尖孢鐮刀菌胡麻�；鸵鸬囊环N嚴(yán)重的真菌性病害。本實(shí)驗(yàn)室篩選獲得一株萎縮芽孢桿菌SF1,能抑制尖孢鐮刀菌胡麻�；途甑纳L(zhǎng)。前期試驗(yàn)采用非接觸平板培養(yǎng)法測(cè)定胞外揮發(fā)性物質(zhì)具有抑菌作用；采用蛋白酶處理發(fā)酵證明胞外蛋白具有較好的抑菌活性。本論文將在此基礎(chǔ)上對(duì)菌株SF1的有效拮抗蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步研究。首先,采用體外平板實(shí)驗(yàn),觀察確定菌株SF1分泌的胞外物質(zhì)可以抑制病原菌菌落的生長(zhǎng),抑菌率為48.18%,并且能有效抑制病原菌菌絲的生長(zhǎng)和孢子萌發(fā),導(dǎo)致病原菌菌絲及孢子形態(tài)畸形。其次,運(yùn)用蛋白質(zhì)雙向電泳技術(shù)對(duì)生防菌SF 1和標(biāo)準(zhǔn)菌株萎縮芽孢桿菌CGMCC1.3383的胞外蛋白質(zhì)進(jìn)行了蛋白質(zhì)組學(xué)水平的差異比較分析,共找到154個(gè)差異點(diǎn),對(duì)其中33個(gè)差異極顯著的上調(diào)蛋白進(jìn)行質(zhì)譜鑒定,成功鑒定出14種蛋白質(zhì)：Thioredoxin-like protein ykuU(類硫氧還蛋白ykuU)、2,3-bisphosphoglycerate-independent phosphoglycerate mutase (2,3-二磷酸甘油酸非依賴型磷酸甘油酸變位酶)、Dihydrolipoyl dehydrogenase (二氫硫辛酸脫氫酶)、Inosine-5'-monophosphate dehydrogenase(次黃嘌呤單核苷酸脫氫酶)、(3R)-hydroxymyristoyl-[acyl-carrier-protein] dehydratase (β-羥脂酰ACP脫水酶)、Bifunctional protein GlmU (雙功能蛋白GlmU)、Putative aminopeptidase ytoP (推定的氨基肽酶ytoP)、Probable4-aminobutyrate aminotransferase(可能的4-氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶)、Putative aminopeptidase yhfE(推定的氨基肽酶yhfE)、Pyrrolidone -carboxylate peptidase(吡咯烷磷酸肽酶)、Beta-glucanase(β-葡聚糖酶)、Minor extracellular protease vpr(小胞外蛋白酶vpr)、Glycerophosphoryl diester phosphodiesterase(甘油磷酸二酯磷酸二酯酶),這14個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)具有潛在的抗菌生防活性,有待于進(jìn)一步研究分析。
【關(guān)鍵詞】：萎縮芽孢桿菌 胡麻枯萎病 拮抗蛋白質(zhì) 雙向電泳
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S476.1;S435.659
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 1 引言10-17
• 1.1 胡麻與胡麻枯萎病10-11
• 1.1.1 胡麻10
• 1.1.2 胡麻枯萎病10-11
• 1.1.3 胡麻枯萎病的發(fā)病條件及防治措施11
• 1.2 芽孢桿菌在生物防治中的研究11-13
• 1.2.1 生物防治概述11-12
• 1.2.2 芽孢桿菌作為生防菌的研究進(jìn)展12-13
• 1.3 蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)13-16
• 1.3.1 蛋白質(zhì)組學(xué)概述13-14
• 1.3.2 雙向聚丙稀酰胺凝膠電泳14-15
• 1.3.3 質(zhì)譜技術(shù)15-16
• 1.4 本研究意義和內(nèi)容16-17
• 1.4.1 本研究意義16
• 1.4.2 本研究的主要內(nèi)容16-17
• 2. 材料與方法17-29
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料17-20
• 2.1.1 菌種17
• 2.1.2 常用培養(yǎng)基和溶液17-18
• 2.1.3 主要試劑、試劑盒18-19
• 2.1.4 主要儀器設(shè)備19-20
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法20-29
• 2.2.1 生防菌SF1的培養(yǎng)方法20
• 2.2.2 尖孢鐮刀菌胡麻專化型菌株4a的培養(yǎng)方法20-21
• 2.2.3 生防菌SF1胞外物質(zhì)體外抑菌作用21-22
• 2.2.4 胞外蛋白樣品的制備22-24
• 2.2.5 雙向電泳體系的建立24-27
• 2.2.6 差異蛋白的質(zhì)譜檢測(cè)27-29
• 3. 結(jié)果與討論29-44
• 3.1 生防菌SF1胞外物質(zhì)外抑菌作用29-31
• 3.1.1 生防菌SF1胞外物質(zhì)對(duì)病原菌菌落生長(zhǎng)的抑制29
• 3.1.2 生防菌SF1胞外物質(zhì)對(duì)病原菌菌絲和孢子形態(tài)的影響29-30
• 3.1.3 生防菌SF1胞外物質(zhì)對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的抑制30-31
• 3.1.4 生防菌SF1胞外物質(zhì)對(duì)病原菌孢子萌發(fā)狀況的抑制31
• 3.2 蛋白質(zhì)含量的測(cè)定31-32
• 3.3 雙向電泳分析蛋白差異32-44
• 3.3.1 雙向電泳圖譜32-33
• 3.3.2 差異蛋白表達(dá)分析33-38
• 3.3.3 差異蛋白質(zhì)譜鑒定及數(shù)據(jù)庫檢索結(jié)果38-40
• 3.3.4 差異蛋白質(zhì)功能分析40-44
• 4. 結(jié)論與展望44-45
• 4.1 結(jié)論44
• 4.2 工作展望44-45
• 參考文獻(xiàn)45-50
• 碩士期間科研成果50-51
• 致謝51

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：380608