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烏頭內(nèi)生菌的分離鑒定及其次生代謝產(chǎn)物研究

發(fā)布時間:2023-02-26 09:20
  烏頭為毛茛科,多年生草本植物,可入藥,具殺蟲殺菌活性,其所含烏頭堿為主要活性成分,常采用植物提取法獲得,但其來源有限,且產(chǎn)量有限。有研究表明,存在于健康植物組織內(nèi)部的內(nèi)生菌會產(chǎn)生與宿主植物相同或相似的化學(xué)成分。為探索烏頭堿的微生物來源,本文以從烏頭植株中分離純化出的內(nèi)生菌為研究對象,對其進行了較系統(tǒng)的研究,主要的研究內(nèi)容如下:采用組織分離法分別從北烏頭的健康根、莖、葉、種子以及川烏、草烏的種子中分離內(nèi)生菌,試驗共分離純化出形態(tài)特征差異的內(nèi)生真菌12株以及內(nèi)生細菌11株,并根據(jù)其來源進行命名。通過HPLC分析,確定烏頭堿出峰時間為20.022 min,SNCWT-003菌株、SNWT-010菌株、SNWT-011菌株、SNWT-013菌株和SNWT-014菌株在20.022 min附近有吸收峰,說明上述菌株的次生代謝產(chǎn)物中可能含有烏頭堿。最后經(jīng)HPLC-MS法分析,確定SNGWT-002菌株產(chǎn)烏頭堿,菌絲體中含量為5.213×10-2mg·mL-1,SNCWT-003菌株產(chǎn)烏頭堿,含量為5.64×10-33 mg·mL

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 文獻綜述
    1.1 烏頭屬植物殺蟲抑菌活性研究現(xiàn)狀
        1.1.1 烏頭屬植物殺蟲活性研究進展
        1.1.2 烏頭屬植物抑菌活性研究進展
    1.2 烏頭屬植物內(nèi)生菌的研究現(xiàn)狀
    1.3 烏頭堿的藥用作用機理研究進展
        1.3.1 烏頭堿的藥理作用
        1.3.2 烏頭堿的毒理作用
    1.4 烏頭堿獲取方法研究進展
        1.4.1 植物提取法
        1.4.2 化學(xué)合成法
        1.4.3 微生物發(fā)酵法
    1.5 論文立題依據(jù)和研究內(nèi)容
第二章 烏頭內(nèi)生菌的分離與純化
    2.1 試驗材料
    2.2 試驗方法
        2.2.1 烏頭種子內(nèi)生菌的分離與純化
        2.2.2 烏頭根部內(nèi)生菌的分離與純化
        2.2.3 烏頭莖葉內(nèi)生菌的分離與純化
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 烏頭內(nèi)生真菌的分離與純化
        2.3.2 烏頭內(nèi)生細菌的分離與純化
    2.4 本章小結(jié)
第三章 內(nèi)生菌中烏頭堿的含量分析
    3.1 試驗材料
    3.2 試驗方法
        3.2.1 烏頭內(nèi)生菌次生代謝產(chǎn)物 HPLC 分析
        3.2.2 烏頭內(nèi)生菌次生代謝產(chǎn)物的 HPLC-MS 測定
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 烏頭內(nèi)生菌次生代謝產(chǎn)物HPLC分析
        3.3.2 烏頭內(nèi)生菌次生代謝產(chǎn)物HPLC-MS/MS分析
    3.4 本章小結(jié)
第四章 產(chǎn)烏頭堿烏頭內(nèi)生真菌的鑒定
    4.1 試驗材料
    4.2 試驗方法
        4.2.1 產(chǎn)烏頭堿內(nèi)生真菌的形態(tài)學(xué)觀察
        4.2.2 產(chǎn)烏頭堿內(nèi)生真菌分子生物學(xué)鑒定
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 產(chǎn)烏頭堿內(nèi)生真菌的形態(tài)學(xué)觀察
        4.3.2 產(chǎn)烏頭堿內(nèi)生真菌的分子生物學(xué)鑒定
    4.4 本章小結(jié)
第五章 烏頭內(nèi)生菌的抑菌活性研究
    5.1 試驗材料
    5.2 試驗方法
        5.2.1 烏頭內(nèi)生真菌對植物病原真菌抑菌活性的測定
        5.2.2 烏頭內(nèi)生細菌對植物病原真菌抑菌活性的測定
        5.2.3 數(shù)據(jù)處理
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 烏頭內(nèi)生真菌對植物病原真菌抑菌活性的測定
        5.3.2 烏頭內(nèi)生細菌對植物病原真菌抑菌活性的測定
    5.4 本章小結(jié)
第六章 結(jié)論與討論
    6.1 結(jié)論
        6.1.1 烏頭內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物分析
        6.1.2 烏頭內(nèi)生菌抑菌活性研究
    6.2 討論
        6.2.1 烏頭內(nèi)生菌生物活性研究現(xiàn)狀
        6.2.2 植物內(nèi)生菌可作為天然產(chǎn)物廣闊的微生物來源
參考文獻
附圖
致謝



本文編號:3750264

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