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黃姑魚經(jīng)殺香魚假單胞菌和Poly I:C刺激后的病理特征及免疫相關(guān)基因表達(dá)特征分析

發(fā)布時(shí)間:2023-01-15 07:29
  黃姑魚(Nibea albiflora)是我國重要的海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖魚類之一,在浙、閔沿海具有較大的養(yǎng)殖規(guī)模。網(wǎng)箱養(yǎng)殖過程中,黃姑魚容易受大黃魚等鄰網(wǎng)養(yǎng)殖魚類病原體的感染,給其養(yǎng)殖帶來巨大危害。本研究分析了黃姑魚分別感染殺香魚假單胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)和Poly I:C后的病理特征和免疫基因應(yīng)答反應(yīng)。研究結(jié)果如下:1.感染殺香魚假單胞菌的黃姑魚有明顯的鰭條表面出血、色素沉積、腸道紅腫和腸道內(nèi)黃色液體堆積等病理現(xiàn)象,組織切片顯示其肝有明顯細(xì)胞空泡化、脾有明顯的巨噬細(xì)胞浸潤。而Poly I:C刺激后黃姑魚的肝與脾組織切片觀察未發(fā)現(xiàn)明顯的病變。2.熒光定量分析結(jié)果表明,黃姑魚感染殺香魚假單胞菌或注射Poly I:C后,其肝、脾和鰓等組織中icCu/Zn-SOD、MnSOD、ecCu/Zn-SOD、HSP70和HSP90等基因的mRNA表達(dá)量顯著上調(diào)。與對(duì)照組相比,Poly I:C刺激后0-72 h內(nèi),肝臟、脾臟和鰓中的上述基因的表達(dá)量均上調(diào);感染殺香魚假單胞菌后0-48 h內(nèi),肝臟、脾臟和鰓中的上述基因的表達(dá)量均上調(diào),感染72 h上述基因在肝中表達(dá)量顯著下... 

【文章頁數(shù)】:86 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 魚類的病原體
    1.2 魚類的非特異性免疫
        1.2.1 魚類主要的免疫細(xì)胞、組織和免疫器官
        1.2.2 魚機(jī)體內(nèi)的活性氧(ROS)
        1.2.3 魚類的抗氧化系統(tǒng)
        1.2.4 Toll樣受體介導(dǎo)的級(jí)聯(lián)反應(yīng)
    1.3 魚類非特異性免疫研究進(jìn)展
        1.3.1 超氧化物歧化酶研究進(jìn)展
        1.3.2 熱休克蛋白的研究進(jìn)展
        1.3.3 模式識(shí)別受體(PRR)介導(dǎo)的非特異性免疫研究進(jìn)展
    1.4 黃姑魚及其病原體
        1.4.1 黃姑魚簡(jiǎn)介
        1.4.2 黃姑魚的病原體
    1.5 研究目的
第二章 黃姑魚病原體感染后的病理變化及抗氧化免疫功能的影響
    2.1 材料及方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
        2.1.3 注射用菌的制備
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.1.5 NaSOD1,NaSOD2,NaSOD3,NaHSP70和NaHSP90 在各組織表達(dá)差異的定量分析
        2.1.6 殺香魚假單胞菌感染和Poly(I:C)刺激后黃姑魚脾臟、肝臟和鰓中NaSOD1,NaSOD2,NaSOD3,NaHSP70和NaHSP90的mRNA的表達(dá)變化
        2.1.7 殺香魚假單胞菌感染和Poly(I:C)刺激后肝臟中總超氧化物歧化酶(T-SOD)的活性、NaHSP70和NaHSP90 蛋百含量的測(cè)定
        2.1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2.1 不同濃度的殺香魚假單胞菌對(duì)黃姑魚的毒理
        2.2.2 病理學(xué)分析
        2.2.3 NaSOD1,NaSOD2,NaSOD3,NaHSP70和NaHSP90 在各組織中的表達(dá)定量分析
        2.2.4 感染后肝臟,脾臟和鰓中NaSOD1,NaSOD2,NaSOD3,NaHSP70 和NaHSP90的定量分析
        2.2.5 刺激后肝臟中總SOD酶活性和HSP70,HSP90 蛋白含量的變化
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 黃姑魚TLR基因分子特征及其在病原體脅迫后的表達(dá)分析
    3.1 材料及方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        3.1.4 擴(kuò)增引物
        3.1.5 TLR3、TLR5s和 TLR14 序列分析
        3.1.6 RT-PCR和 qRT-PCR
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.1 黃姑魚TLR3、TLR5s和 TLR14的c DNA序列及其結(jié)構(gòu)
        3.2.2 TLR3、TLR5s和 TLR14 在黃姑魚各組織中差異性表達(dá)
        3.2.3 黃姑魚TLR3、TLR5s和 TLR14 的時(shí)間差異性表達(dá)
    3.3 討論
        3.3.1 TLR3、TLR5s和 TLR14 的結(jié)構(gòu)分析
        3.3.2 黃姑魚TLR3、TLR5s和 TLR14 組織差異性表達(dá)分析
        3.3.3 病原體感染后TLR3、TLR5s和 TLR14 差異性表達(dá)分析
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[8]大黃魚兩株病原弧菌拮抗菌的研究[D]. 郭國軍.集美大學(xué) 2007



本文編號(hào):3730805

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