大豆疫霉（Phytophthora sojae）是屬于卵菌綱、霜霉目、腐霉科的疫霉屬,和真菌的致病機(jī)理有很大的不同。大豆疫霉能夠侵染植物的整個(gè)生長發(fā)育期和不同組織,導(dǎo)致了大豆根腐病會頻繁發(fā)生,造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。在自然選擇和協(xié)同進(jìn)化的過程中,大豆疫霉與宿主能夠通過相互作用和競爭來維持各自的生理活動(dòng):一方面,大豆疫霉通過分泌效應(yīng)子能夠干擾或抑制植物體內(nèi)的免疫反應(yīng),使植物發(fā)生病害;另一方面,大豆通過防衛(wèi)相關(guān)的抗病蛋白與大豆疫霉效應(yīng)子相互作用從而激活植物體的免疫防御體系來抵御大豆疫霉的入侵。為了深入研究大豆疫霉效應(yīng)子如何抑制植物防御反應(yīng),本研究以大豆疫霉效應(yīng)子為研究對象,鑒定了一個(gè)具有毒性功能的效應(yīng)子,并對其生物學(xué)功能和宿主靶標(biāo)互作機(jī)制進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,獲得了以下主要結(jié)果:1、利用PVX病毒介導(dǎo)的植物病原毒性因子篩選體系,鑒定出一個(gè)RxLR類效應(yīng)子Avh113能夠增強(qiáng)病毒癥狀,導(dǎo)致本氏煙的生長發(fā)育缺陷。Northern blot分析發(fā)現(xiàn)Avh113的表達(dá)積累了更多的PVX病毒RNA,表明大豆疫霉效應(yīng)子Avh113是一個(gè)潛在的毒性因子。2、大豆疫霉在宿主中的接種實(shí)驗(yàn)結(jié)合實(shí)時(shí)熒光定量（qRT-... 

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表及其英漢對照
第1章 緒論
    1.1 引言
    1.2 大豆疫霉病的產(chǎn)生與防治研究
        1.2.1 大豆概述
        1.2.2 大豆疫霉概述
        1.2.3 大豆疫霉的繁殖器官的形態(tài)特征研究
        1.2.4 大豆疫霉的生活習(xí)性研究
        1.2.5 大豆疫霉病害流行循環(huán)規(guī)律的研究
        1.2.6 大豆疫霉的治理進(jìn)展與方法
        1.2.7 大豆疫霉的分類地位研究
    1.3 植物與病原菌互作研究
        1.3.1 病原菌與植物互作理論機(jī)制
        1.3.2 病原菌與植物免疫功能之間的互相調(diào)節(jié)
    1.4 卵菌效應(yīng)子的分析研究
        1.4.1 卵菌RxLR類效應(yīng)子
        1.4.2 其他類型卵菌效應(yīng)子
    1.5 類異染色質(zhì)蛋白1(LHP1)相關(guān)的生物學(xué)研究
        1.5.1 類異染色質(zhì)蛋白1(LHP1)
        1.5.2 類異染色質(zhì)蛋白1(LHP1)結(jié)構(gòu)功能研究
        1.5.3 類異染色質(zhì)蛋白1(LHP1)調(diào)控植物表觀的研究
    1.6 研究的目的和意義
第2章 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 供試植物
        2.1.2 供試菌株
        2.1.3 試驗(yàn)所需試劑
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 制備感受態(tài)
        2.2.2 煙草葉片的RNA的提取
        2.2.3 大豆c DNA的合成
        2.2.4 載體構(gòu)建
        2.2.5 所需載體
        2.2.6 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
        2.2.7 檢測單克隆農(nóng)桿菌
        2.2.8 煙草瞬時(shí)表達(dá)
        2.2.9 提取煙草總蛋白
        2.2.10 Western blot檢測
        2.2.11 酵母雙雜(Y2H)
        2.2.12 亞細(xì)胞定位
        2.2.13 雙分子熒光互補(bǔ)(BiFC)驗(yàn)證互作
        2.2.14 免疫共沉淀(Co-IP)驗(yàn)證互作
        2.2.15 辣椒疫霉孢子的釋放
        2.2.16 辣椒疫霉(LT263)的接種
        2.2.17 煙草葉片DNA的提取
        2.2.18 辣椒疫霉生物量分析
第3章 結(jié)果與討論
    3.1 結(jié)果
        3.1.1 大豆疫霉毒性因子的鑒定
        3.1.2 Avh113的蛋白序列分析
        3.1.3 在大豆疫霉侵染大豆不同階段的Avh113 轉(zhuǎn)錄特征的分析
        3.1.4 Avh113及其突變體的亞細(xì)胞定位
        3.1.5 Avh113在煙草中的表達(dá)提高了辣椒疫霉侵染能力
        3.1.6 Avh113宿主靶標(biāo)的鑒定
        3.1.7 酵母雙雜驗(yàn)證Avh113與GmLHP1互作
        3.1.8 BiFC驗(yàn)證Avh113和GmLHP1互作
        3.1.9 Co-IP驗(yàn)證Avh113和GmLHP1互作
        3.1.10 在煙草中表達(dá)GmLHP1對辣椒疫霉侵染的分析
    3.2 討論
第4章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]植物表達(dá)抗原蛋白及其免疫原性的研究進(jìn)展[J]. 張怡然,張占路,唐益雄,吳燕民.  草業(yè)科學(xué). 2015(06)
[2]Genome engineering using the CRISPR/Cas system[J]. Takuro Horii,Izuho Hatada.  World Journal of Medical Genetics. 2014(03)
[3]植物與病原菌互作理論研究進(jìn)展[J]. 韓長志.  河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(11)
[4]25%甲霜靈種衣劑防治大豆疫霉根腐病效果研究[J]. 劉惕若.  黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報(bào). 2004(03)
[5]嗜線蟲致病桿菌代謝物拮抗大豆疫霉[J]. 楊秀芬,楊懷文,簡恒.  大豆科學(xué). 2002(01)
[6]大豆疫霉和大豆疫病[J]. 彭金火,譚紅,趙改萍.  植物檢疫. 1998(03)

博士論文
[1]大豆疫霉RxLR效應(yīng)分子Avh262和Avh172的功能研究[D]. 景茂峰.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]寄生疫霉菌結(jié)構(gòu)獨(dú)特的質(zhì)膜氫離子通道蛋白基因PnPMA1功能的初步研究[D]. 張美祥.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[3]大豆疫霉效應(yīng)分子的功能研究[D]. 韓長志.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010

碩士論文
[1]發(fā)根農(nóng)桿菌誘導(dǎo)大豆毛狀根體系的建立與應(yīng)用[D]. 宗曉秋.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012



本文編號：3648976