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干旱對棉花微根系與地上部形態(tài)生理的影響及細根差異蛋白質組學分析

發(fā)布時間:2021-12-17 13:26
  干旱是嚴重限制作物生長發(fā)育與產量品質的最主要的非生物脅迫之一。棉花作為世界性重要的經濟作物,對于非生物脅迫表現(xiàn)出較高的耐受性,但是干旱仍然會對棉花生產造成巨大威脅。根系是與土壤直接接觸的器官,最先感受到土壤的水分虧缺。微根系(細根、根毛)是根系中較為敏感與活躍的部分,是植物獲取水分的重要器官。但是,目前關于大田作物微根系在干旱脅迫下的形態(tài)響應卻鮮有報道。本研究在人工氣候室內開展兩類盆栽試驗(自制原位根系觀察裝置培養(yǎng)法和傳統(tǒng)盆栽培養(yǎng)法),以陸地棉(Gossypium hirsutum L.)品種“國欣棉9號”為試驗材料,通過控制土壤相對含水量(RSWC)的方法設計正常灌溉(CK,70±5%RSWC)和干旱脅迫(DS,40±5%RSWC)處理。通過調查棉花微根系的形態(tài)與生理特征,結合差異蛋白質組學分析手段,以期探明干旱脅迫對棉花地上部發(fā)育的影響和微根系形態(tài)變化特征及可能的調控機理,分析微根系干旱響應蛋白的分類及功能。研究主要結果如下:1.自制的“植物培養(yǎng)與根系原位觀測”一體化裝置可滿足棉花正常生長發(fā)育和根系原位無損觀測的需求,能夠清晰觀察到細根和根毛的形態(tài)變化特征。2.干旱脅迫抑制棉株地上... 

【文章來源】:河北農業(yè)大學河北省

【文章頁數(shù)】:183 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

干旱對棉花微根系與地上部形態(tài)生理的影響及細根差異蛋白質組學分析


圖1-1干旱脅迫對棉花的影響及其響應??Fig.?1-1?Effects?of?drought?stress?on?cotton?and?their?responses??

蛋白質組學,策略,蛋白質


TOF)、四極桿(Quadrupole)和傅立葉變換離子回旋??共振(Fouriertransformioncyclotron)分析儀。它們在設計和性能上截然不同,各有千秋,可以??單獨使用,為了充分利用每種分析儀的優(yōu)勢,在一些情況下可以串聯(lián)使用【147]。??在過去的十幾年中,用于分析蛋白質的質譜儀在分辨率、質量準確性、靈敏度和掃描速度等??方面均有了極大的進步。基于MS的蛋白質定量分析主要分為“Top-down”、“Bottom-up”和??“Middle-down”分析三種策略(圖1-3),?“Top-down”方法被用來描述完整的蛋白質,這種方法保??留了大量蛋白質序列、蛋白異構體及其翻譯后修飾等信息,但是由于蛋白質和肽段在理化特性上??的差異,不適用于液相色譜分析,因此難以達到高通量分離的要求“Bottom-up”方法是通過??分析蛋白質水解過程中釋放的肽來表征蛋白質的,當bottom-up對一種混合蛋白進行分析時,它被??稱為鳥槍蛋白質組學(Shotgunproteomics)?|M91,在MS上樣前使用液相色譜進行肽段分離,所需??樣本量少,且具有較高的靈敏度,因此鳥槍蛋白質組學現(xiàn)己成為一種被廣泛應用的方法,并且在??生物標志物的研宄中仍然是首選平臺。在鳥槍蛋白質組學實驗中,兩種主要的電離方法分別是納??米電噴霧(Nanoelectrospray,?nESl)和基質輔助激光解吸/電離(Matrix-assisted?丨aser?desorption/??ionization,?MALD1?)。nESI通常與反相液相色譜(Reversed-phase?liquid?chromatography)分離相結??合,MAL

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C-MS)分析,以獲得蛋白質的信息和相對定量。??1?23456?789?10??rn^rnm??|?Protein?denaturation,?reduction,?alkylation?and?digestion??rn^rnm??|?Labeling?with?TMT??m^rnm??|?Combining?to?one?sample??S?—.?Fractionation?__^?HPLC-MS?—>?Data?Analysis??m?and?Cleaning?up??圖1-5使用丨0-plexTMT進行相對3化的工作流程??Fig.?1?-5?Workflow?for?relative?quantification?using?10-plex?TMT??1.4.3?棉花響應干旱脅迫蛋白質組學研究進展??植物會積累特定的應激相關蛋白來保證在不利環(huán)境下的生存。高通量蛋白質組學己被證明是??一個強大的工具,可以評價、鑒定干旱脅迫下發(fā)生改變的蛋白質。目前,植物響應干旱逆境的蛋??白質組學研宄己涉及大量植物種類,包括粟(Se/ar/a/:a?ca)?水稻1|63〗、甜??菜(5e/avw/gar/>s)丨|64】、向日葵【丨65丨、煙草(Mco"a?a7b6acMffj)丨|66】和棉花??(Gcwi^/ww/i/r^w/ww)?I1671等。并且己從25種植物的葉子中鑒定出2200種干旱響應蛋白,這些??干旱響應蛋白根據(jù)其蛋白質序列同源性和功能域相似性被定義為440種特異蛋白質涉及信??號傳導(Signaling)、轉錄(Transcription)、應激和防御(Stress?and?defense)、蛋白質合成,折疊


本文編號:3540216

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