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干旱對棉花微根系與地上部形態(tài)生理的影響及細(xì)根差異蛋白質(zhì)組學(xué)分析

發(fā)布時(shí)間:2021-12-17 13:26
  干旱是嚴(yán)重限制作物生長發(fā)育與產(chǎn)量品質(zhì)的最主要的非生物脅迫之一。棉花作為世界性重要的經(jīng)濟(jì)作物,對于非生物脅迫表現(xiàn)出較高的耐受性,但是干旱仍然會(huì)對棉花生產(chǎn)造成巨大威脅。根系是與土壤直接接觸的器官,最先感受到土壤的水分虧缺。微根系(細(xì)根、根毛)是根系中較為敏感與活躍的部分,是植物獲取水分的重要器官。但是,目前關(guān)于大田作物微根系在干旱脅迫下的形態(tài)響應(yīng)卻鮮有報(bào)道。本研究在人工氣候室內(nèi)開展兩類盆栽試驗(yàn)(自制原位根系觀察裝置培養(yǎng)法和傳統(tǒng)盆栽培養(yǎng)法),以陸地棉(Gossypium hirsutum L.)品種“國欣棉9號”為試驗(yàn)材料,通過控制土壤相對含水量(RSWC)的方法設(shè)計(jì)正常灌溉(CK,70±5%RSWC)和干旱脅迫(DS,40±5%RSWC)處理。通過調(diào)查棉花微根系的形態(tài)與生理特征,結(jié)合差異蛋白質(zhì)組學(xué)分析手段,以期探明干旱脅迫對棉花地上部發(fā)育的影響和微根系形態(tài)變化特征及可能的調(diào)控機(jī)理,分析微根系干旱響應(yīng)蛋白的分類及功能。研究主要結(jié)果如下:1.自制的“植物培養(yǎng)與根系原位觀測”一體化裝置可滿足棉花正常生長發(fā)育和根系原位無損觀測的需求,能夠清晰觀察到細(xì)根和根毛的形態(tài)變化特征。2.干旱脅迫抑制棉株地上... 

【文章來源】:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】:183 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

干旱對棉花微根系與地上部形態(tài)生理的影響及細(xì)根差異蛋白質(zhì)組學(xué)分析


圖1-1干旱脅迫對棉花的影響及其響應(yīng)??Fig.?1-1?Effects?of?drought?stress?on?cotton?and?their?responses??

蛋白質(zhì)組學(xué),策略,蛋白質(zhì)


TOF)、四極桿(Quadrupole)和傅立葉變換離子回旋??共振(Fouriertransformioncyclotron)分析儀。它們在設(shè)計(jì)和性能上截然不同,各有千秋,可以??單獨(dú)使用,為了充分利用每種分析儀的優(yōu)勢,在一些情況下可以串聯(lián)使用【147]。??在過去的十幾年中,用于分析蛋白質(zhì)的質(zhì)譜儀在分辨率、質(zhì)量準(zhǔn)確性、靈敏度和掃描速度等??方面均有了極大的進(jìn)步;冢停拥牡鞍踪|(zhì)定量分析主要分為“Top-down”、“Bottom-up”和??“Middle-down”分析三種策略(圖1-3),?“Top-down”方法被用來描述完整的蛋白質(zhì),這種方法保??留了大量蛋白質(zhì)序列、蛋白異構(gòu)體及其翻譯后修飾等信息,但是由于蛋白質(zhì)和肽段在理化特性上??的差異,不適用于液相色譜分析,因此難以達(dá)到高通量分離的要求“Bottom-up”方法是通過??分析蛋白質(zhì)水解過程中釋放的肽來表征蛋白質(zhì)的,當(dāng)bottom-up對一種混合蛋白進(jìn)行分析時(shí),它被??稱為鳥槍蛋白質(zhì)組學(xué)(Shotgunproteomics)?|M91,在MS上樣前使用液相色譜進(jìn)行肽段分離,所需??樣本量少,且具有較高的靈敏度,因此鳥槍蛋白質(zhì)組學(xué)現(xiàn)己成為一種被廣泛應(yīng)用的方法,并且在??生物標(biāo)志物的研宄中仍然是首選平臺。在鳥槍蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)中,兩種主要的電離方法分別是納??米電噴霧(Nanoelectrospray,?nESl)和基質(zhì)輔助激光解吸/電離(Matrix-assisted?丨aser?desorption/??ionization,?MALD1?)。nESI通常與反相液相色譜(Reversed-phase?liquid?chromatography)分離相結(jié)??合,MAL

工作流程圖,工作流程,蛋白質(zhì)組學(xué),蛋白質(zhì)


C-MS)分析,以獲得蛋白質(zhì)的信息和相對定量。??1?23456?789?10??rn^rnm??|?Protein?denaturation,?reduction,?alkylation?and?digestion??rn^rnm??|?Labeling?with?TMT??m^rnm??|?Combining?to?one?sample??S?—.?Fractionation?__^?HPLC-MS?—>?Data?Analysis??m?and?Cleaning?up??圖1-5使用丨0-plexTMT進(jìn)行相對3化的工作流程??Fig.?1?-5?Workflow?for?relative?quantification?using?10-plex?TMT??1.4.3?棉花響應(yīng)干旱脅迫蛋白質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展??植物會(huì)積累特定的應(yīng)激相關(guān)蛋白來保證在不利環(huán)境下的生存。高通量蛋白質(zhì)組學(xué)己被證明是??一個(gè)強(qiáng)大的工具,可以評價(jià)、鑒定干旱脅迫下發(fā)生改變的蛋白質(zhì)。目前,植物響應(yīng)干旱逆境的蛋??白質(zhì)組學(xué)研宄己涉及大量植物種類,包括粟(Se/ar/a/:a?ca)?水稻1|63〗、甜??菜(5e/avw/gar/>s)丨|64】、向日葵【丨65丨、煙草(Mco"a?a7b6acMffj)丨|66】和棉花??(Gcwi^/ww/i/r^w/ww)?I1671等。并且己從25種植物的葉子中鑒定出2200種干旱響應(yīng)蛋白,這些??干旱響應(yīng)蛋白根據(jù)其蛋白質(zhì)序列同源性和功能域相似性被定義為440種特異蛋白質(zhì)涉及信??號傳導(dǎo)(Signaling)、轉(zhuǎn)錄(Transcription)、應(yīng)激和防御(Stress?and?defense)、蛋白質(zhì)合成,折疊


本文編號:3540216

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