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蘋果ABA降解基因MdCYP707A1的克隆和功能鑒定

發(fā)布時間:2021-11-28 05:44
  植物激素脫落酸(ABA)對植物的生長發(fā)育至關重要,它可以調控植物的多種生理過程。一方面,ABA作為植物生長發(fā)育過程中的逆向調控因子,使植物生長受阻,加快葉片的衰老和死亡,促進落花落果,抑制種子萌發(fā),促進種子休眠,調控根系發(fā)育等;另一方面,ABA能夠加強植物對生物和非生物脅迫的抗性,使植物免受外界環(huán)境的侵害。在高等植物中,由PYR/PYL/RCAR蛋白復合體介導的ABA信號途徑參與對非生物脅迫的調控,ABA受體PYR/PYL/RCA能夠感知ABA信號,激活下游基因的表達,提高植物抵抗不良環(huán)境的能力。植物體內ABA的含量由ABA的合成和降解速率共同控制,ABA合成途徑中的酶和相關調控因子已經(jīng)有了相對較多的研究,而ABA分解代謝過程中的酶還有待進一步闡明。有研究表明,在高等植物體內,ABA氧化失活是ABA降解的主要方式,在這個過程中,ABA 8′位甲基羥基化途徑占主導作用。CYP707A家族成員編碼8′-羥化酶,它是ABA分解代謝中的關鍵酶,屬于細胞色素P450單加氧酶,其活性受ABA所誘導,且受多種環(huán)境脅迫的調控。本研究主要從ABA調控種子休眠和逆境脅迫的角度出發(fā),根據(jù)擬南芥中AtCYP7... 

【文章來源】:山東農業(yè)大學山東省

【文章頁數(shù)】:66 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

蘋果ABA降解基因MdCYP707A1的克隆和功能鑒定


蘋果MdCYP707A與擬南芥、水稻CYP707A家族基因蛋白的進化樹分析

氨基酸序列,家族,蘋果,基因


蘋果ABA降解基因MdCYP707A1的克隆和功能鑒定24軟件InterPro(http://www.ebi.ac.uk/interpro)和ExPASy(https//prosite.expasy.org)顯示該結構域的保守氨基酸序列為FGXGXHXCPG(圖3-2)。圖3-2蘋果MdCYP707A家族基因蛋白保守結構分析Fig.3-2AnalysisoftheconserveddomainsoftheappleMdCYP707Afamily3.2MdCYP707A家族基因的組織表達分析為了進一步分析MdCYP707A家族成員的表達模式,分別以取自‘皇家嘎拉’蘋果同一株樹的新生根、當年生新梢及梢部葉片、盛花期花序、盛花后60d的果皮為模板,檢測了根、莖、葉、花、果皮等不同組織中MdCYP707A家族基因的表達,結果表明,四個MdCYP707A家族基因在根、莖、葉、花、果皮等組織中均有表達,且MdCYP707A1、MdCYP707A3、MdCYP707A4三個基因在果中的表達量最高;而MdCYP707A2在葉中的表達量最高(圖3-3)。

字母表,熒光定量PCR,蘋果,果皮


山東農業(yè)大學碩士學位論文25圖3-3熒光定量PCR檢測‘皇家嘎拉’蘋果MdCYP707A在根、莖、葉、花和果皮中的表達不同字母表示處理間差異顯著,P<0.05。下同。Fig.3-3ExpressionanalysisofMdCYP707Agenesinroot,shoot,leaf,flowerandfruitof‘RoyalGala’applewithfluorescencequantitativePCRThesameletterswerenotsignificantlydifferent,P<0.05.Thesamebelow.3.3MdCYP707A家族基因調控種子休眠鑒于擬南芥中AtCYP707A主要參與種子休眠,因此檢測了蘋果種子不同發(fā)育時期MdCYP707A家族基因的表達。結果表明,MdCYP707A1主要在花后60d表達,為花后30d的74倍,隨著果實發(fā)育逐漸成熟,其表達量逐漸下降;MdCYP707A2、MdCYP707A3、MdCYP707A4主要在花后30d表達,其中,隨著果實的成熟,MdCYP707A2的表達量在花后90d有小幅度的上升,而MdCYP707A3、MdCYP707A4則隨著果實的成熟,表達量逐漸下降(圖3-4)。以上結果表明,MdCYP707A家族成員可能參與種子成熟的調控過程。為了進一步研究MdCYP707A家族成員是否調控種子休眠,分別檢測了成熟蘋果種子在吸水膨脹和低溫層積解除休眠過程中MdCYP707A家族基因的表達。結果表明,在種子吸水膨脹過程中,MdCYP707A2的響應最明顯,在吸水膨脹12h后MdCYP707A2的表達量是對照的150倍;MdCYP707A1、MdCYP707A3則在48h的表達量最高;而MdCYP707A4的表達量變化無明顯規(guī)律(圖3-5,A)。而在種子低溫層積解除休眠過程中,MdCYP707A家族的四個基因均有響應,呈現(xiàn)出先上升再下降然后再回升的趨勢,

【參考文獻】:
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本文編號:3523824

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