植物激素脫落酸（ABA）對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育至關(guān)重要,它可以調(diào)控植物的多種生理過程。一方面,ABA作為植物生長(zhǎng)發(fā)育過程中的逆向調(diào)控因子,使植物生長(zhǎng)受阻,加快葉片的衰老和死亡,促進(jìn)落花落果,抑制種子萌發(fā),促進(jìn)種子休眠,調(diào)控根系發(fā)育等;另一方面,ABA能夠加強(qiáng)植物對(duì)生物和非生物脅迫的抗性,使植物免受外界環(huán)境的侵害。在高等植物中,由PYR/PYL/RCAR蛋白復(fù)合體介導(dǎo)的ABA信號(hào)途徑參與對(duì)非生物脅迫的調(diào)控,ABA受體PYR/PYL/RCA能夠感知ABA信號(hào),激活下游基因的表達(dá),提高植物抵抗不良環(huán)境的能力。植物體內(nèi)ABA的含量由ABA的合成和降解速率共同控制,ABA合成途徑中的酶和相關(guān)調(diào)控因子已經(jīng)有了相對(duì)較多的研究,而ABA分解代謝過程中的酶還有待進(jìn)一步闡明。有研究表明,在高等植物體內(nèi),ABA氧化失活是ABA降解的主要方式,在這個(gè)過程中,ABA 8′位甲基羥基化途徑占主導(dǎo)作用。CYP707A家族成員編碼8′-羥化酶,它是ABA分解代謝中的關(guān)鍵酶,屬于細(xì)胞色素P450單加氧酶,其活性受ABA所誘導(dǎo),且受多種環(huán)境脅迫的調(diào)控。本研究主要從ABA調(diào)控種子休眠和逆境脅迫的角度出發(fā),根據(jù)擬南芥中AtCYP7... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

蘋果MdCYP707A與擬南芥、水稻CYP707A家族基因蛋白的進(jìn)化樹分析

蘋果ABA降解基因MdCYP707A1的克隆和功能鑒定24軟件InterPro（http://www.ebi.ac.uk/interpro）和ExPASy（https//prosite.expasy.org）顯示該結(jié)構(gòu)域的保守氨基酸序列為FGXGXHXCPG（圖3-2）。圖3-2蘋果MdCYP707A家族基因蛋白保守結(jié)構(gòu)分析Fig.3-2AnalysisoftheconserveddomainsoftheappleMdCYP707Afamily3.2MdCYP707A家族基因的組織表達(dá)分析為了進(jìn)一步分析MdCYP707A家族成員的表達(dá)模式，分別以取自‘皇家嘎拉’蘋果同一株樹的新生根、當(dāng)年生新梢及梢部葉片、盛花期花序、盛花后60d的果皮為模板，檢測(cè)了根、莖、葉、花、果皮等不同組織中MdCYP707A家族基因的表達(dá)，結(jié)果表明，四個(gè)MdCYP707A家族基因在根、莖、葉、花、果皮等組織中均有表達(dá)，且MdCYP707A1、MdCYP707A3、MdCYP707A4三個(gè)基因在果中的表達(dá)量最高；而MdCYP707A2在葉中的表達(dá)量最高（圖3-3）。

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文25圖3-3熒光定量PCR檢測(cè)‘皇家嘎拉’蘋果MdCYP707A在根、莖、葉、花和果皮中的表達(dá)不同字母表示處理間差異顯著，P<0.05。下同。Fig.3-3ExpressionanalysisofMdCYP707Agenesinroot，shoot，leaf，flowerandfruitof‘RoyalGala’applewithfluorescencequantitativePCRThesameletterswerenotsignificantlydifferent，P<0.05.Thesamebelow.3.3MdCYP707A家族基因調(diào)控種子休眠鑒于擬南芥中AtCYP707A主要參與種子休眠，因此檢測(cè)了蘋果種子不同發(fā)育時(shí)期MdCYP707A家族基因的表達(dá)。結(jié)果表明，MdCYP707A1主要在花后60d表達(dá)，為花后30d的74倍，隨著果實(shí)發(fā)育逐漸成熟，其表達(dá)量逐漸下降；MdCYP707A2、MdCYP707A3、MdCYP707A4主要在花后30d表達(dá)，其中，隨著果實(shí)的成熟，MdCYP707A2的表達(dá)量在花后90d有小幅度的上升，而MdCYP707A3、MdCYP707A4則隨著果實(shí)的成熟，表達(dá)量逐漸下降（圖3-4）。以上結(jié)果表明，MdCYP707A家族成員可能參與種子成熟的調(diào)控過程。為了進(jìn)一步研究MdCYP707A家族成員是否調(diào)控種子休眠，分別檢測(cè)了成熟蘋果種子在吸水膨脹和低溫層積解除休眠過程中MdCYP707A家族基因的表達(dá)。結(jié)果表明，在種子吸水膨脹過程中，MdCYP707A2的響應(yīng)最明顯，在吸水膨脹12h后MdCYP707A2的表達(dá)量是對(duì)照的150倍；MdCYP707A1、MdCYP707A3則在48h的表達(dá)量最高；而MdCYP707A4的表達(dá)量變化無明顯規(guī)律（圖3-5，A）。而在種子低溫層積解除休眠過程中，MdCYP707A家族的四個(gè)基因均有響應(yīng)，呈現(xiàn)出先上升再下降然后再回升的趨勢(shì)，

【參考文獻(xiàn)】：
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