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無血清規(guī)模化培養(yǎng)MDCK細(xì)胞的關(guān)鍵控制點(diǎn)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-11-24 08:35
  我國目前流感病毒疫苗都是利用雞胚基質(zhì)生產(chǎn)的。然而,由于雞胚數(shù)量的限制和雞胚工藝擴(kuò)大生產(chǎn)的可及性差,一旦大流感來臨時(shí),用雞胚基質(zhì)生產(chǎn)的流感疫苗將遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能夠滿足人們需求。而以細(xì)胞基質(zhì)生產(chǎn)流感疫苗則不受雞胚數(shù)量的限制、質(zhì)量可控、易于擴(kuò)大規(guī)模,且能適用于對雞蛋蛋白過敏的人群。MDCK細(xì)胞是當(dāng)前最受關(guān)注的流感疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞基質(zhì)之一。細(xì)胞基質(zhì)病毒性疫苗的培養(yǎng)常常可分為兩個階段,即細(xì)胞生長期和產(chǎn)毒期。為了更加高效和經(jīng)濟(jì)的研發(fā)可靠的疫苗生產(chǎn)工藝,首先設(shè)計(jì)在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模利用搖床和搖瓶摸索了基本工藝并優(yōu)化工藝參數(shù)。確定細(xì)胞傳代的參數(shù),按梯度密度(2×106、1.5×106、1×106、7×105和5×105cells/mL)接種細(xì)胞于細(xì)胞搖瓶,然后對比不同細(xì)胞接種密度的細(xì)胞生長曲線,同時(shí),監(jiān)測各實(shí)驗(yàn)組間的細(xì)胞活率、細(xì)胞代謝和細(xì)胞周期情況,結(jié)果表明在48h時(shí),各梯度密度接種都處于細(xì)胞生長分裂的對數(shù)生長期,細(xì)胞增長最高達(dá)到了8.3×106 cells/mL;各梯度密度的細(xì)胞接種幾乎... 

【文章來源】:武漢生物制品研究所湖北省

【文章頁數(shù)】:79 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
縮略詞表
摘要
Abstract
前言
技術(shù)路線
第一章 基于MDCK細(xì)胞培養(yǎng)的基本工藝參數(shù)摸索
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1.4 小結(jié)與討論
第二章 懸浮MDCK細(xì)胞培養(yǎng)工藝的優(yōu)化研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.4 小結(jié)與討論
第三章 懸浮MDCK細(xì)胞培養(yǎng)的規(guī);糯笱芯
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 小結(jié)與討論
第四章 總結(jié)和展望
    4.1 總結(jié)
    4.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    4.3 展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
在讀期間論文發(fā)表情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]TPCK胰酶和普通胰酶對各亞型流感病毒在MDCK細(xì)胞分離培養(yǎng)中的影響[J]. 馬萍,李欣玥.  中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2017(18)
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[10]動物細(xì)胞培養(yǎng)用生物反應(yīng)器及其力學(xué)環(huán)境[J]. 何輝,樊瑜波.  生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2004(03)

博士論文
[1]基于MDCK細(xì)胞高密度培養(yǎng)的甲型流感病毒疫苗生產(chǎn)工藝開發(fā)與優(yōu)化[D]. 黃錠.華東理工大學(xué) 2016

碩士論文
[1]動物細(xì)胞培養(yǎng)用生物反應(yīng)器內(nèi)流體混合及氣液傳質(zhì)特性研究[D]. 鄭兵兵.華東理工大學(xué) 2013



本文編號:3515611

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