PRRSV再感染誘導豬IL-4表達及相關免疫反應的研究
發(fā)布時間：2021-11-07 21:38
豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV）引起的一種危害全球養(yǎng)豬業(yè)的急性傳染病。該病在臨床上主要引起母豬繁殖障礙、育肥豬和仔豬的呼吸道疾病、免疫抑制及持續(xù)性感染等。同經(jīng)典PRRSV相比,HP-PRRSV的分子特征是Nsp2基因的第482位和533561位共30個氨基酸發(fā)生缺失。眾所周知,不同毒力PRRSV病毒株之間的致病性存在差異,一些研究結果表明不同毒力毒株會產生很微妙的影響,甚至是除了肺泡巨噬細胞的感染外更多地分散復制或誘導凋亡現(xiàn)象且HP-PRRSV較經(jīng)典毒株具有更高的細胞噬性,尤其導致外周免疫器官的損傷。Th1-Th2免疫應答模型為機體被感染性病原體感染后的免疫應答提供了系統(tǒng)的研究框架。白細胞介素-4（Interleukin-4,IL-4）是由活化的T淋巴細胞、嗜堿性粒細胞及肥大細胞等分泌的一種高效細胞因子,其在此免疫應答模型中扮演重要角...
【文章來源】：山東農業(yè)大學山東省
【文章頁數(shù)】：73 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
細胞因子網(wǎng)絡（Zhangetal.,2007）
山東農業(yè)大學碩士學位論文29圖2外周免疫器官中IL-4mRNA水平Figure2IL-4mRNAlevelsinperipheralimmuneorgans3.1.2外周免疫器官中IL-4的定位利用免疫組織化學染色及免疫熒光染色對初次感染后7d及再次感染后7d（7d、35d）安樂死的仔豬進行頜下淋巴結、脾臟中IL-4的定位，結果如圖3（A-J）、圖4（A-F）。3.1.2.1頜下淋巴結IL-4的定位利用免疫組織化學染色及免疫熒光染色對初次感染后7d及再次感染后7d（7d、35d）安樂死的仔豬進行頜下淋巴結中IL-4的定位，結果如圖3（A-E）棕褐色陽性反應產物、圖4（A-F）紅色熒光所示。由圖3、4可以看出，與陰性對照相比（圖A），初次感染后7d（圖3B、圖4B）的豬顯示了相似的IL-4分布規(guī)律及表達水平，頜下淋巴結的淋巴小結周圍、副皮質區(qū)及淋巴小結內均顯現(xiàn)極少量散在的IL-4。再次感染后7d，第2組（圖3C、圖4C）仍然維持類似于陰性對照水平的IL-4數(shù)量，且位置不變；第
PRRSV再感染誘導豬IL-4表達與相關免疫反應的研究303組（圖3D、圖4D）、第4組（圖3E、圖4E）則出現(xiàn)大量的IL-4，集中分布在淋巴小結內，少量分布在淋巴小結周圍及副皮質區(qū)。值得注意的是，再感染PRRSV后IL-4的位置發(fā)生明顯變化，即散在于淋巴小結周圍、副皮質區(qū)及淋巴小結中的IL-4向淋巴小結內聚集，且IL-4信號數(shù)量顯著高于初次感染。更有意思的是，IL-4由散在的稀疏狀態(tài)向淋巴小結中的B淋巴細胞靠近，甚至熒光信號“重疊”（如圖4F箭頭所示，黃色熒光信號為CD19+B淋巴細胞）。3.1.2.2脾臟IL-4的定位利用免疫組織化學染色對初次感染后7d及再次感染后7d（7d、35d）安樂死的仔豬進行脾臟中IL-4的定位，結果如圖3（F-J）所示。由圖中可以看出，與陰性對照相比(圖F)，初次感染后7d（圖G），動脈周圍淋巴鞘及邊緣區(qū)出現(xiàn)少量的棕褐色陽性反應產物；再次感染后7d，第2組（圖H）動脈周圍淋巴鞘及邊緣區(qū)仍存在極少量散在的棕褐色陽性反應產物；第3組（圖I）、第4組（圖J）的棕褐色陽性反應產物主要集中在邊緣區(qū)、動脈周圍淋巴鞘，有些淋巴小結中出現(xiàn)棕褐色陽性反應產物，紅髓中出現(xiàn)散在的棕褐色陽性反應產物。圖3仔豬外周免疫器官中IL-4表達（100×）頜下淋巴結：A：陰性對照組；B：初次感染后7d，實驗組；C：再次感染后7d，第2組；D：再次感染后7d，第3組；E：再次感染后7d，第4組脾臟：F：陰性對照組；G：初次感染后7d，實驗組；H：再次感染后7d，第2組；I：再次感染后7d，第3組；J：
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Nsp2 and GP5-M of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Contribute to Targets for Neutralizing Antibodies[J]. Jia Su,Lei Zhou,Bicheng He,Xinhui Zhang,Xinna Ge,Jun Han,Xin Guo,Hanchun Yang. Virologica Sinica. 2019(06)
[2]PRRSV非結構蛋白抑制宿主先天性免疫的分子機制[J]. 徐善之,田質高,陳飛. 中國豬業(yè). 2018(02)
[3]脾多肽輔助治療嬰幼兒遷延性慢性腹瀉療效及對T淋巴細胞亞群變化影響[J]. 高源,劉迎春. 藥物流行病學雜志. 2017(06)
[4]輔助性T細胞及其細胞因子與HBV的關系[J]. 楊國強,牟蘭,麻瑞娟,郭慶紅,周永寧. 醫(yī)學綜述. 2015(07)
[5]肺癌患者外周血淋巴細胞亞群與性別、年齡及臨床分期的關系[J]. 齊紅,劉玉俠,任林廣,徐廣偉,段北野,趙珍誼. 中國實驗診斷學. 2012(11)
[6]高致病性藍耳病的研究進展[J]. 楊曉花,張其艷,艾軍,劉巧燕. 今日畜牧獸醫(yī). 2010(07)
[7]雞白細胞介素4基因的克隆及其原核表達[J]. 戴華,鄭佳玉,陳俊華,孫林,潘志明,焦新安. 中國預防獸醫(yī)學報. 2008(06)
[8]豬白細胞介素-4基因的克隆與表達[J]. 陳國華,景志忠,孫世鐸,羅啟慧,竇永喜,蒙學蓮. 中國預防獸醫(yī)學報. 2005(06)
[9]細胞免疫與PRRSV感染[J]. 孫慶申,蔡雪暉,童光志. 中國預防獸醫(yī)學報. 2002(03)
[10]IL-4研究進展[J]. 李睿,白惠卿. 菏澤醫(yī)專學報. 1999(04)
博士論文
[1]高致病性PRRSV誘導仔豬胸腺的損傷機制及PRRSV抗獨特型抗體的免疫調控[D]. 于穎.西北農林科技大學 2015
[2]PRRSV強弱毒感染后對PBMCs細胞嗜性和細胞因子產生情況的差異研究及HP-PRRSV T細胞表位的鑒定[D]. 王亞欣.中國農業(yè)科學院 2012
[3]高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒HuN4株感染所致的免疫損傷及免疫調控機理[D]. 王剛.山東農業(yè)大學 2011
[4]內蒙地區(qū)HP-PRRS流行情況與比較病理學研究[D]. 李瑞剛.內蒙古農業(yè)大學 2010
[5]高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病理學研究及其病毒的序列分析[D]. 劉永宏.內蒙古農業(yè)大學 2010
[6]PRRSV對豬肺泡巨噬細胞天然免疫功能影響的分子機制[D]. 蒲靜.中國農業(yè)大學 2005
碩士論文
[1]歐洲型PRRSV重組腺病毒疫苗生產工藝及動物模型替代方法建立[D]. 解長占.吉林農業(yè)大學 2017
[2]豬繁殖與呼吸綜合征弱毒疫苗免疫劑量和免疫時間對豬免疫應答的影響[D]. 張鶴.河北農業(yè)大學 2015
[3]規(guī)�；i場豬繁殖與呼吸綜合征綜合防制措施研究[D]. 游一.河南農業(yè)大學 2010
[4]純化后海藻硫酸多糖蛋白復合物抗腫瘤作用研究[D]. 嵇蓉.中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院 2008
本文編號：3482446
【文章來源】：山東農業(yè)大學山東省
【文章頁數(shù)】：73 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
細胞因子網(wǎng)絡（Zhangetal.,2007）
山東農業(yè)大學碩士學位論文29圖2外周免疫器官中IL-4mRNA水平Figure2IL-4mRNAlevelsinperipheralimmuneorgans3.1.2外周免疫器官中IL-4的定位利用免疫組織化學染色及免疫熒光染色對初次感染后7d及再次感染后7d（7d、35d）安樂死的仔豬進行頜下淋巴結、脾臟中IL-4的定位，結果如圖3（A-J）、圖4（A-F）。3.1.2.1頜下淋巴結IL-4的定位利用免疫組織化學染色及免疫熒光染色對初次感染后7d及再次感染后7d（7d、35d）安樂死的仔豬進行頜下淋巴結中IL-4的定位，結果如圖3（A-E）棕褐色陽性反應產物、圖4（A-F）紅色熒光所示。由圖3、4可以看出，與陰性對照相比（圖A），初次感染后7d（圖3B、圖4B）的豬顯示了相似的IL-4分布規(guī)律及表達水平，頜下淋巴結的淋巴小結周圍、副皮質區(qū)及淋巴小結內均顯現(xiàn)極少量散在的IL-4。再次感染后7d，第2組（圖3C、圖4C）仍然維持類似于陰性對照水平的IL-4數(shù)量，且位置不變；第
PRRSV再感染誘導豬IL-4表達與相關免疫反應的研究303組（圖3D、圖4D）、第4組（圖3E、圖4E）則出現(xiàn)大量的IL-4，集中分布在淋巴小結內，少量分布在淋巴小結周圍及副皮質區(qū)。值得注意的是，再感染PRRSV后IL-4的位置發(fā)生明顯變化，即散在于淋巴小結周圍、副皮質區(qū)及淋巴小結中的IL-4向淋巴小結內聚集，且IL-4信號數(shù)量顯著高于初次感染。更有意思的是，IL-4由散在的稀疏狀態(tài)向淋巴小結中的B淋巴細胞靠近，甚至熒光信號“重疊”（如圖4F箭頭所示，黃色熒光信號為CD19+B淋巴細胞）。3.1.2.2脾臟IL-4的定位利用免疫組織化學染色對初次感染后7d及再次感染后7d（7d、35d）安樂死的仔豬進行脾臟中IL-4的定位，結果如圖3（F-J）所示。由圖中可以看出，與陰性對照相比(圖F)，初次感染后7d（圖G），動脈周圍淋巴鞘及邊緣區(qū)出現(xiàn)少量的棕褐色陽性反應產物；再次感染后7d，第2組（圖H）動脈周圍淋巴鞘及邊緣區(qū)仍存在極少量散在的棕褐色陽性反應產物；第3組（圖I）、第4組（圖J）的棕褐色陽性反應產物主要集中在邊緣區(qū)、動脈周圍淋巴鞘，有些淋巴小結中出現(xiàn)棕褐色陽性反應產物，紅髓中出現(xiàn)散在的棕褐色陽性反應產物。圖3仔豬外周免疫器官中IL-4表達（100×）頜下淋巴結：A：陰性對照組；B：初次感染后7d，實驗組；C：再次感染后7d，第2組；D：再次感染后7d，第3組；E：再次感染后7d，第4組脾臟：F：陰性對照組；G：初次感染后7d，實驗組；H：再次感染后7d，第2組；I：再次感染后7d，第3組；J：
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Nsp2 and GP5-M of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Contribute to Targets for Neutralizing Antibodies[J]. Jia Su,Lei Zhou,Bicheng He,Xinhui Zhang,Xinna Ge,Jun Han,Xin Guo,Hanchun Yang. Virologica Sinica. 2019(06)
[2]PRRSV非結構蛋白抑制宿主先天性免疫的分子機制[J]. 徐善之,田質高,陳飛. 中國豬業(yè). 2018(02)
[3]脾多肽輔助治療嬰幼兒遷延性慢性腹瀉療效及對T淋巴細胞亞群變化影響[J]. 高源,劉迎春. 藥物流行病學雜志. 2017(06)
[4]輔助性T細胞及其細胞因子與HBV的關系[J]. 楊國強,牟蘭,麻瑞娟,郭慶紅,周永寧. 醫(yī)學綜述. 2015(07)
[5]肺癌患者外周血淋巴細胞亞群與性別、年齡及臨床分期的關系[J]. 齊紅,劉玉俠,任林廣,徐廣偉,段北野,趙珍誼. 中國實驗診斷學. 2012(11)
[6]高致病性藍耳病的研究進展[J]. 楊曉花,張其艷,艾軍,劉巧燕. 今日畜牧獸醫(yī). 2010(07)
[7]雞白細胞介素4基因的克隆及其原核表達[J]. 戴華,鄭佳玉,陳俊華,孫林,潘志明,焦新安. 中國預防獸醫(yī)學報. 2008(06)
[8]豬白細胞介素-4基因的克隆與表達[J]. 陳國華,景志忠,孫世鐸,羅啟慧,竇永喜,蒙學蓮. 中國預防獸醫(yī)學報. 2005(06)
[9]細胞免疫與PRRSV感染[J]. 孫慶申,蔡雪暉,童光志. 中國預防獸醫(yī)學報. 2002(03)
[10]IL-4研究進展[J]. 李睿,白惠卿. 菏澤醫(yī)專學報. 1999(04)
博士論文
[1]高致病性PRRSV誘導仔豬胸腺的損傷機制及PRRSV抗獨特型抗體的免疫調控[D]. 于穎.西北農林科技大學 2015
[2]PRRSV強弱毒感染后對PBMCs細胞嗜性和細胞因子產生情況的差異研究及HP-PRRSV T細胞表位的鑒定[D]. 王亞欣.中國農業(yè)科學院 2012
[3]高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒HuN4株感染所致的免疫損傷及免疫調控機理[D]. 王剛.山東農業(yè)大學 2011
[4]內蒙地區(qū)HP-PRRS流行情況與比較病理學研究[D]. 李瑞剛.內蒙古農業(yè)大學 2010
[5]高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病理學研究及其病毒的序列分析[D]. 劉永宏.內蒙古農業(yè)大學 2010
[6]PRRSV對豬肺泡巨噬細胞天然免疫功能影響的分子機制[D]. 蒲靜.中國農業(yè)大學 2005
碩士論文
[1]歐洲型PRRSV重組腺病毒疫苗生產工藝及動物模型替代方法建立[D]. 解長占.吉林農業(yè)大學 2017
[2]豬繁殖與呼吸綜合征弱毒疫苗免疫劑量和免疫時間對豬免疫應答的影響[D]. 張鶴.河北農業(yè)大學 2015
[3]規(guī)�；i場豬繁殖與呼吸綜合征綜合防制措施研究[D]. 游一.河南農業(yè)大學 2010
[4]純化后海藻硫酸多糖蛋白復合物抗腫瘤作用研究[D]. 嵇蓉.中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院 2008
本文編號：3482446
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