北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷的影響
本文關鍵詞:北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:通過北冬蟲夏草多糖對四氯化碳誘導的小鼠急性肝損傷的肝臟結構和功能影響的研究,探討北冬蟲夏草多糖的作用機理,為進一步研究北冬蟲夏草多糖對動物的保健,尤其在保肝方面的應用與推廣提供科學資料和理論依據(jù)。本試驗采用水提醇沉法的工藝改良提取北冬蟲夏草多糖。通過設計正交試驗L9(34)優(yōu)化北冬蟲夏草多糖提取條件,以苯酚-硫酸法測定多糖含量,得出最佳提取工藝的條件及提取率為:提取時間3h,料液溫度80℃,料液比1:30,提取率為17.14%。試驗的設計與實施。將120只雄性昆明種小鼠實驗室適應性喂養(yǎng)1W后,隨機分為試驗A組、試驗B組。A組、B組均設空白對照組,CCl4模型組,北冬蟲夏草多糖低劑量組70mg-(kg.d)-1、中劑量組140 mg·(kg.d)-1、高劑量組280 mg·(kg.d)-1,聯(lián)苯雙酯陽性對照組140mg·(kg.d)-1,每組小鼠10只。除空白組、模型組以外,其它各組都以相應藥物(按0.2mL·20g-1)灌胃。在喂藥的第8 d、第11 d和第14 d,除空白對照外,各試驗小鼠均以(0.2mL·20g-1)的0.2%CCl4花生油灌胃。A組在第14d CCl4花生油灌胃16h后,所有參試小鼠眼球放血并脫頸致死,分別剖檢與取材。B組繼續(xù)灌藥2W后眼球放血和脫頸致死,分別剖檢與取材。參試小鼠的血清檢測指標有:AST、ALT、ALP、總膽紅素以及N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase);肝均漿測定的有:SOD、GSH、MDA;肝臟組織顯微結構的觀察和肝組織細胞凋亡的檢測,較為系統(tǒng)研究了北冬蟲夏草多糖對CCl4所致小鼠急性肝損傷在結構和功能的影響,為北冬蟲夏草多糖的保肝、保健以及在獸醫(yī)臨床與動物養(yǎng)殖上的應用提供科學依據(jù)。研究的結果如下:(1)北冬蟲夏草多糖對CCl4致小鼠急性肝損傷的血清ALT、AST、ALP和血清總膽紅素及NAGase的影響。灌服北冬蟲夏草多糖2W后,與模型組比較,北冬蟲夏草多糖劑量組能使各試驗組小鼠的血清ALT、AST、ALP活性和血清總膽紅素含量降低,NAGase舌性下降,高劑量組與聯(lián)苯雙酯組差異極顯著(P0.01)。灌服北冬蟲夏草多糖4W后,北冬蟲夏草多糖高劑量組小鼠的血清ALT、AST、ALP、NAGase活性與空白對照組比較差異不顯著(P0.05),血清總膽紅素含量差異顯著(P0.05)。(2)北冬蟲夏草多糖對CCl4致小鼠急性肝損傷的肝均漿SOD、GSH、MDA的影響。灌服北冬蟲夏草多糖多糖2 W后,與模型組比較,北冬蟲夏草多糖各試驗組小鼠的肝均漿中SOD活性升高、GSH的含量增加,肝臟組織MDA的含量降低,北冬蟲夏草多糖低劑量組效果差異顯著(P0.05),高劑量組差異極顯著(P0.01)。灌服北冬蟲夏草多糖4 W,與空白對照組相比,北冬蟲夏草多糖各劑量組效果明顯,其中高劑量組效果最佳,SOD活性明顯升高,GSH、MDA含量與空白組比較差異不顯著(P0.05)。(3)光學顯微鏡觀察(HE染色)。模型組肝臟結構嚴重破壞,中央靜脈周圍的肝細胞凝固性壞死,肝臟細胞呈現(xiàn)廣泛的中、重度水泡變性或空泡變性和脂肪變性,大片肝細胞成無結構的紅染和細胞碎片,少量殘存的肝細胞不同程度細胞變性。灌服北冬蟲夏草多糖2W后,北冬蟲夏草多糖各試驗組均表現(xiàn)出一定的抗損傷和修復作用。高劑量組肝細胞排列比較整齊,部分肝細胞輕度腫脹,細胞壞死明顯減少,雙核細胞增多,呈現(xiàn)較為明顯的肝臟損傷后的修復過程。灌服北冬蟲夏草多糖4W后,可見各試驗組小鼠肝組織空泡變性和脂肪變性明顯減少甚至消失,僅有少量的壞死,且北冬蟲夏草多糖高劑量組與聯(lián)苯雙酯組肝細胞雙核細胞增多。(4)北冬蟲夏草多糖對CCl4致小鼠急性肝損傷細胞凋亡的影響。灌服北冬蟲夏草多糖2W,光鏡觀察,模型組可見肝細胞凋亡數(shù)量較多,單個或成群分布;北冬蟲夏草多糖組凋亡細胞數(shù)量較少,散在分布。灌服北冬蟲夏草多糖4 W,模型組凋亡細胞數(shù)目明顯減少,北冬蟲夏草多糖組肝細胞凋亡數(shù)目明顯減少,其中高劑量組效果最明顯,表明北冬蟲夏草多糖對急性肝損傷小鼠的肝臟的修復作用。研究的創(chuàng)新點如下:(1)對北冬蟲夏草多糖對小鼠急性化學性肝損傷的結構和功能影響作了較為系統(tǒng)的研究。(2)對北冬蟲夏草多糖對小鼠急性化學性肝損傷的肝細胞凋亡情況作了較為詳細的研究。(3)探討了北冬蟲夏草多糖與CCl4致小鼠急性肝損傷血清NAGase之間的相關性,為NAGase在獸醫(yī)臨床應用提供了參考依據(jù)。
【關鍵詞】:北冬蟲夏草多糖 急性肝損傷 血清酶學 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 肝勻漿抗氧化指標 肝細胞凋亡
【學位授予單位】:福建農(nóng)林大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:S853.7
【目錄】:
- 摘要9-11
- Abstract11-14
- 引言14-22
- 1 動物肝臟結構及生理作用14-15
- 1.1 肝臟的結構特點14
- 1.2 肝臟的生理作用14-15
- 2 中草藥對肝臟功能的影響15-17
- 2.1 保護肝細胞膜的完整性15
- 2.2 抗脂質(zhì)過氧化和抗自由基損傷15-16
- 2.3 改善肝功能16
- 2.4 促進肝細胞再生16
- 2.5 提高免疫調(diào)節(jié)功能16-17
- 3 北冬蟲夏草多糖的研究現(xiàn)狀17-21
- 3.1 北冬蟲夏草多糖的提取工藝17-18
- 3.2 北冬蟲夏草多糖的藥理作用18-20
- 3.3 北冬蟲夏草多糖的研究存在的問題20-21
- 4 本研究的目的和意義21-22
- 第一章 北冬蟲夏草多糖的提取工藝改良的研究22-27
- 1 材料與方法22-23
- 1.1 材料22
- 1.2 方法22-23
- 2 結果23-25
- 2.1 葡萄糖標準曲線23-24
- 2.2 水提法提取北冬蟲夏草多糖正交實驗結果及分析24-25
- 3 討論25-27
- 第二章 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷血清轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶及總膽紅素的影響27-33
- 1 材料與方法27-28
- 1.1 試驗動物27
- 1.2 材料與主要試劑27
- 1.3 試驗儀器27
- 1.4 試驗方法27-28
- 1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理28
- 2 結果與分析28-30
- 2.1 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷血清ALT、AST與ALP活性的變化和總膽紅素的含量的影響(2W)28-29
- 2.2 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷血清ALT、AST與ALP活性的變化和總膽紅素的含量的影響(4W)29-30
- 3 討論30-33
- 3.1 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷血清ALT、AST與ALP活性的影響31
- 3.2 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷血清總膽紅素(TBiL)的影響31-33
- 第三章 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷血清NAGase活性的影響33-36
- 1 材料與方法33
- 1.1 試驗動物33
- 1.2 材料與主要試劑33
- 1.3 試驗儀器33
- 1.4 試驗方法33
- 1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理33
- 2 結果與分析33-35
- 2.1 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷血清NAGase活性的影響(2W)33-34
- 2.2 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷血清NAGase活性的影響(4 W)34-35
- 3 討論35-36
- 第四章 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷抗氧化功能的影響36-40
- 1 材料與方法36-37
- 1.1 試驗動物36
- 1.2 材料與主要試劑36
- 1.3 試驗儀器36
- 1.4 試驗方法36
- 1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理36-37
- 2 結果與分析37-38
- 2.1 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷肝組織SOD活性和GSH、MDA含量的影響(2W)37
- 2.2 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷肝組織SOD活性和GSH、MDA含量的影響(4W)37-38
- 3 討論38-40
- 3.1 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷肝組織超氧化物歧化酶(SOD)的影響38-39
- 3.2 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷肝組織谷胱甘肽(GSH)含量的影響39
- 3.3 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷肝組織丙二醛(MDA)含量的影響39-40
- 第五章 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷顯微結構的影響40-50
- 1 材料與方法40
- 1.1 試驗動物40
- 1.2 材料與主要試劑40
- 1.3 試驗儀器40
- 1.4 試驗方法40
- 1.5 顯微觀察40
- 2 結果與分析40-46
- 2.1 臨床表現(xiàn)及眼觀病變40-41
- 2.2 A組試驗小鼠肝臟組織顯微結構比較41-44
- 2.3 B組試驗小鼠肝臟組織顯微結構比較44-46
- 3 討論46-50
- 3.1 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷肝細胞水泡變性的影響47-48
- 3.2 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷肝細胞脂肪變性的影響48
- 3.3 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷肝細胞壞死的影響48-50
- 第六章 北冬蟲夏草多糖對CCl_4致小鼠急性肝損傷細胞凋亡的影響50-56
- 1 材料與方法50-51
- 1.1 試驗動物50
- 1.2 材料與主要試劑50
- 1.3 試驗儀器50
- 1.4 試驗方法50-51
- 2 結果與分析51-54
- 2.1 試驗小鼠肝細胞凋亡TUNEL法檢測結果比較51-53
- 2.2 北冬蟲夏草多糖對小鼠肝細胞凋亡數(shù)目的影響53-54
- 3 討論54-56
- 結論56-57
- 創(chuàng)新點57-58
- 對進一步研究的一些思考58-59
- 參考文獻59-66
- 致謝66
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本文編號:340151
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