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北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-05-02 03:07

  本文關(guān)鍵詞:北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:通過北冬蟲夏草多糖對(duì)四氯化碳誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷的肝臟結(jié)構(gòu)和功能影響的研究,探討北冬蟲夏草多糖的作用機(jī)理,為進(jìn)一步研究北冬蟲夏草多糖對(duì)動(dòng)物的保健,尤其在保肝方面的應(yīng)用與推廣提供科學(xué)資料和理論依據(jù)。本試驗(yàn)采用水提醇沉法的工藝改良提取北冬蟲夏草多糖。通過設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)L9(34)優(yōu)化北冬蟲夏草多糖提取條件,以苯酚-硫酸法測(cè)定多糖含量,得出最佳提取工藝的條件及提取率為:提取時(shí)間3h,料液溫度80℃,料液比1:30,提取率為17.14%。試驗(yàn)的設(shè)計(jì)與實(shí)施。將120只雄性昆明種小鼠實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)性喂養(yǎng)1W后,隨機(jī)分為試驗(yàn)A組、試驗(yàn)B組。A組、B組均設(shè)空白對(duì)照組,CCl4模型組,北冬蟲夏草多糖低劑量組70mg-(kg.d)-1、中劑量組140 mg·(kg.d)-1、高劑量組280 mg·(kg.d)-1,聯(lián)苯雙酯陽性對(duì)照組140mg·(kg.d)-1,每組小鼠10只。除空白組、模型組以外,其它各組都以相應(yīng)藥物(按0.2mL·20g-1)灌胃。在喂藥的第8 d、第11 d和第14 d,除空白對(duì)照外,各試驗(yàn)小鼠均以(0.2mL·20g-1)的0.2%CCl4花生油灌胃。A組在第14d CCl4花生油灌胃16h后,所有參試小鼠眼球放血并脫頸致死,分別剖檢與取材。B組繼續(xù)灌藥2W后眼球放血和脫頸致死,分別剖檢與取材。參試小鼠的血清檢測(cè)指標(biāo)有:AST、ALT、ALP、總膽紅素以及N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase);肝均漿測(cè)定的有:SOD、GSH、MDA;肝臟組織顯微結(jié)構(gòu)的觀察和肝組織細(xì)胞凋亡的檢測(cè),較為系統(tǒng)研究了北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl4所致小鼠急性肝損傷在結(jié)構(gòu)和功能的影響,為北冬蟲夏草多糖的保肝、保健以及在獸醫(yī)臨床與動(dòng)物養(yǎng)殖上的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。研究的結(jié)果如下:(1)北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl4致小鼠急性肝損傷的血清ALT、AST、ALP和血清總膽紅素及NAGase的影響。灌服北冬蟲夏草多糖2W后,與模型組比較,北冬蟲夏草多糖劑量組能使各試驗(yàn)組小鼠的血清ALT、AST、ALP活性和血清總膽紅素含量降低,NAGase舌性下降,高劑量組與聯(lián)苯雙酯組差異極顯著(P0.01)。灌服北冬蟲夏草多糖4W后,北冬蟲夏草多糖高劑量組小鼠的血清ALT、AST、ALP、NAGase活性與空白對(duì)照組比較差異不顯著(P0.05),血清總膽紅素含量差異顯著(P0.05)。(2)北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl4致小鼠急性肝損傷的肝均漿SOD、GSH、MDA的影響。灌服北冬蟲夏草多糖多糖2 W后,與模型組比較,北冬蟲夏草多糖各試驗(yàn)組小鼠的肝均漿中SOD活性升高、GSH的含量增加,肝臟組織MDA的含量降低,北冬蟲夏草多糖低劑量組效果差異顯著(P0.05),高劑量組差異極顯著(P0.01)。灌服北冬蟲夏草多糖4 W,與空白對(duì)照組相比,北冬蟲夏草多糖各劑量組效果明顯,其中高劑量組效果最佳,SOD活性明顯升高,GSH、MDA含量與空白組比較差異不顯著(P0.05)。(3)光學(xué)顯微鏡觀察(HE染色)。模型組肝臟結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞,中央靜脈周圍的肝細(xì)胞凝固性壞死,肝臟細(xì)胞呈現(xiàn)廣泛的中、重度水泡變性或空泡變性和脂肪變性,大片肝細(xì)胞成無結(jié)構(gòu)的紅染和細(xì)胞碎片,少量殘存的肝細(xì)胞不同程度細(xì)胞變性。灌服北冬蟲夏草多糖2W后,北冬蟲夏草多糖各試驗(yàn)組均表現(xiàn)出一定的抗損傷和修復(fù)作用。高劑量組肝細(xì)胞排列比較整齊,部分肝細(xì)胞輕度腫脹,細(xì)胞壞死明顯減少,雙核細(xì)胞增多,呈現(xiàn)較為明顯的肝臟損傷后的修復(fù)過程。灌服北冬蟲夏草多糖4W后,可見各試驗(yàn)組小鼠肝組織空泡變性和脂肪變性明顯減少甚至消失,僅有少量的壞死,且北冬蟲夏草多糖高劑量組與聯(lián)苯雙酯組肝細(xì)胞雙核細(xì)胞增多。(4)北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl4致小鼠急性肝損傷細(xì)胞凋亡的影響。灌服北冬蟲夏草多糖2W,光鏡觀察,模型組可見肝細(xì)胞凋亡數(shù)量較多,單個(gè)或成群分布;北冬蟲夏草多糖組凋亡細(xì)胞數(shù)量較少,散在分布。灌服北冬蟲夏草多糖4 W,模型組凋亡細(xì)胞數(shù)目明顯減少,北冬蟲夏草多糖組肝細(xì)胞凋亡數(shù)目明顯減少,其中高劑量組效果最明顯,表明北冬蟲夏草多糖對(duì)急性肝損傷小鼠的肝臟的修復(fù)作用。研究的創(chuàng)新點(diǎn)如下:(1)對(duì)北冬蟲夏草多糖對(duì)小鼠急性化學(xué)性肝損傷的結(jié)構(gòu)和功能影響作了較為系統(tǒng)的研究。(2)對(duì)北冬蟲夏草多糖對(duì)小鼠急性化學(xué)性肝損傷的肝細(xì)胞凋亡情況作了較為詳細(xì)的研究。(3)探討了北冬蟲夏草多糖與CCl4致小鼠急性肝損傷血清NAGase之間的相關(guān)性,為NAGase在獸醫(yī)臨床應(yīng)用提供了參考依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】:北冬蟲夏草多糖 急性肝損傷 血清酶學(xué) N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 肝勻漿抗氧化指標(biāo) 肝細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】:福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S853.7
【目錄】:
  • 摘要9-11
  • Abstract11-14
  • 引言14-22
  • 1 動(dòng)物肝臟結(jié)構(gòu)及生理作用14-15
  • 1.1 肝臟的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)14
  • 1.2 肝臟的生理作用14-15
  • 2 中草藥對(duì)肝臟功能的影響15-17
  • 2.1 保護(hù)肝細(xì)胞膜的完整性15
  • 2.2 抗脂質(zhì)過氧化和抗自由基損傷15-16
  • 2.3 改善肝功能16
  • 2.4 促進(jìn)肝細(xì)胞再生16
  • 2.5 提高免疫調(diào)節(jié)功能16-17
  • 3 北冬蟲夏草多糖的研究現(xiàn)狀17-21
  • 3.1 北冬蟲夏草多糖的提取工藝17-18
  • 3.2 北冬蟲夏草多糖的藥理作用18-20
  • 3.3 北冬蟲夏草多糖的研究存在的問題20-21
  • 4 本研究的目的和意義21-22
  • 第一章 北冬蟲夏草多糖的提取工藝改良的研究22-27
  • 1 材料與方法22-23
  • 1.1 材料22
  • 1.2 方法22-23
  • 2 結(jié)果23-25
  • 2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線23-24
  • 2.2 水提法提取北冬蟲夏草多糖正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析24-25
  • 3 討論25-27
  • 第二章 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷血清轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶及總膽紅素的影響27-33
  • 1 材料與方法27-28
  • 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物27
  • 1.2 材料與主要試劑27
  • 1.3 試驗(yàn)儀器27
  • 1.4 試驗(yàn)方法27-28
  • 1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理28
  • 2 結(jié)果與分析28-30
  • 2.1 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷血清ALT、AST與ALP活性的變化和總膽紅素的含量的影響(2W)28-29
  • 2.2 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷血清ALT、AST與ALP活性的變化和總膽紅素的含量的影響(4W)29-30
  • 3 討論30-33
  • 3.1 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷血清ALT、AST與ALP活性的影響31
  • 3.2 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷血清總膽紅素(TBiL)的影響31-33
  • 第三章 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷血清NAGase活性的影響33-36
  • 1 材料與方法33
  • 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物33
  • 1.2 材料與主要試劑33
  • 1.3 試驗(yàn)儀器33
  • 1.4 試驗(yàn)方法33
  • 1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理33
  • 2 結(jié)果與分析33-35
  • 2.1 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷血清NAGase活性的影響(2W)33-34
  • 2.2 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷血清NAGase活性的影響(4 W)34-35
  • 3 討論35-36
  • 第四章 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷抗氧化功能的影響36-40
  • 1 材料與方法36-37
  • 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物36
  • 1.2 材料與主要試劑36
  • 1.3 試驗(yàn)儀器36
  • 1.4 試驗(yàn)方法36
  • 1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理36-37
  • 2 結(jié)果與分析37-38
  • 2.1 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷肝組織SOD活性和GSH、MDA含量的影響(2W)37
  • 2.2 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷肝組織SOD活性和GSH、MDA含量的影響(4W)37-38
  • 3 討論38-40
  • 3.1 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷肝組織超氧化物歧化酶(SOD)的影響38-39
  • 3.2 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷肝組織谷胱甘肽(GSH)含量的影響39
  • 3.3 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷肝組織丙二醛(MDA)含量的影響39-40
  • 第五章 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷顯微結(jié)構(gòu)的影響40-50
  • 1 材料與方法40
  • 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物40
  • 1.2 材料與主要試劑40
  • 1.3 試驗(yàn)儀器40
  • 1.4 試驗(yàn)方法40
  • 1.5 顯微觀察40
  • 2 結(jié)果與分析40-46
  • 2.1 臨床表現(xiàn)及眼觀病變40-41
  • 2.2 A組試驗(yàn)小鼠肝臟組織顯微結(jié)構(gòu)比較41-44
  • 2.3 B組試驗(yàn)小鼠肝臟組織顯微結(jié)構(gòu)比較44-46
  • 3 討論46-50
  • 3.1 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷肝細(xì)胞水泡變性的影響47-48
  • 3.2 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷肝細(xì)胞脂肪變性的影響48
  • 3.3 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷肝細(xì)胞壞死的影響48-50
  • 第六章 北冬蟲夏草多糖對(duì)CCl_4致小鼠急性肝損傷細(xì)胞凋亡的影響50-56
  • 1 材料與方法50-51
  • 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物50
  • 1.2 材料與主要試劑50
  • 1.3 試驗(yàn)儀器50
  • 1.4 試驗(yàn)方法50-51
  • 2 結(jié)果與分析51-54
  • 2.1 試驗(yàn)小鼠肝細(xì)胞凋亡TUNEL法檢測(cè)結(jié)果比較51-53
  • 2.2 北冬蟲夏草多糖對(duì)小鼠肝細(xì)胞凋亡數(shù)目的影響53-54
  • 3 討論54-56
  • 結(jié)論56-57
  • 創(chuàng)新點(diǎn)57-58
  • 對(duì)進(jìn)一步研究的一些思考58-59
  • 參考文獻(xiàn)59-66
  • 致謝66

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本文編號(hào):340151

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