玉米（Zea mays L.）是世界上重要的農(nóng)物之一,種植面積廣泛。隨著需求量的不斷增長,急需提高玉米的產(chǎn)量。玉米分子育種的快速發(fā)展,使得這種需求成為現(xiàn)實,尤其遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)的應(yīng)用,將許多功能基因轉(zhuǎn)入玉米改良目標性狀。所以不斷尋找優(yōu)良遺傳轉(zhuǎn)化受體、研究其發(fā)生的遺傳學(xué)規(guī)律,利用優(yōu)良受體進行功能基因的遺傳轉(zhuǎn)化具有重要的理論和現(xiàn)實意義。本實驗室前期選育出玉米抗冷自交系W9816,從中克隆了冷響應(yīng)基因ZmSec14p（accession no.KT932998）,并證明了其抗冷功能。玉米自交系Y423是本實驗室選育的高體細胞胚胎誘導(dǎo)材料。在此基礎(chǔ)上,本研究優(yōu)化Y423體細胞胚胎誘導(dǎo)體系、遺傳轉(zhuǎn)化體系,進行了ZmSec14p基因的遺傳轉(zhuǎn)化、并對Y423體細胞胚胎發(fā)生進行了遺傳分析。具體研究結(jié)果如下:1.優(yōu)化了Y423體細胞胚胎發(fā)生體系。當繼代培養(yǎng)天數(shù)為16天,繼代培養(yǎng)次數(shù)為T3代時體細胞胚胎的發(fā)生率最高。當繼代培養(yǎng)基中甘露醇濃度達到7.5g/L時,可將Ⅲ型愈傷組織轉(zhuǎn)化成Ⅱ型胚性愈傷組織。在Y423成熟種子中成功誘導(dǎo)出胚性愈傷組織并分化成苗。2.優(yōu)化了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的Y423遺傳轉(zhuǎn)化體系并進行了ZmSe... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

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Y423玉米愈傷組織的三種類型Figure2.1ThreetypesofY423maizecallus

第二章玉米Y423體細胞胚胎發(fā)生及優(yōu)化13在愈傷組織繼代培養(yǎng)過程中，這三類愈傷組織可以向其他類型愈傷組織狀態(tài)轉(zhuǎn)變，但是只有Ⅱ型愈傷組織可以最終形成體細胞胚胎并誘導(dǎo)出再生苗。研究表明繼代培養(yǎng)次數(shù)對Ⅱ型愈傷組織誘導(dǎo)率有直接影響。本實驗選取了三個繼代梯度，分別是T3代、T4代、T5代。每隔16天對愈傷組織進行一次繼代培養(yǎng)并對愈傷組織的類型進行統(tǒng)計。所得數(shù)據(jù)如下：T3代愈傷組織共獲得3405塊，Ⅱ型愈傷組織所占比例64.52％；獲得T4代愈傷組織10115塊，Ⅱ型愈傷組織所占比例61.20％；T5代愈傷組織31675塊，Ⅱ型愈傷組織所占比例57.36％，如圖2.2。繼代培養(yǎng)3次時，Ⅱ型愈傷組織誘導(dǎo)率最高，且繼代培養(yǎng)次數(shù)越多，誘導(dǎo)率呈下降趨勢，Ⅲ型愈傷組織誘導(dǎo)率增加。在玉米愈傷組織繼代培養(yǎng)過程中，繼代培養(yǎng)次數(shù)的增加，愈傷組織數(shù)量會大幅度增加，為控制單一變量避免環(huán)境誤差，每一代的繼代時間應(yīng)為3-4天，因此本實驗繼代次數(shù)不宜超過T5代，如圖2.3。圖2.2Ⅱ型愈傷組織誘導(dǎo)率Figure2.2InductionrateofTypeⅡcallus

部分Y423T5代愈傷組織


本文編號：3357002