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海桿菌耐鹽基因betA和Na + /H + antiporter的克隆及功能驗(yàn)證

發(fā)布時間:2021-06-02 21:28
  鹽堿土壤是我國土地資源的一部分,尤其在中國的東北部,荒地資源中鹽堿土壤占有很大比例。土壤中多量的可溶性鹽溶液會造成植物細(xì)胞壁兩側(cè)體液滲透壓的不同,使細(xì)胞內(nèi)部不同程度的脫水,從而影響植物生長甚至死亡。從我國內(nèi)蒙古吉蘭泰鹽堿湖土壤樣品中分離得到一株中度嗜鹽細(xì)菌菌株,經(jīng)生物學(xué)特征和16S rDNA序列鑒定,是海桿菌屬的一個新種。海桿菌是中度嗜鹽菌的一類,海桿菌的生長環(huán)境一般在鹽濃度比較高的地區(qū),例如鹽湖等。10%12%為海桿菌的最適生長鹽濃度。這個菌株跟海桿菌其他的種屬的差別比較大,同源性較低,因此我們決定測定這株海桿菌的新種的全基因組并得到了完整序列。我們希望從這株海竿菌中分離和鑒定一些耐鹽基因。我做了兩部分實(shí)驗(yàn):首先查找大腸桿菌E.coli包含的兩個耐鹽相關(guān)基因——膽堿脫氫酶基因(betA)和Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(Nha),通過基因克隆方法得到了海桿菌(Marinobacter sp.)中betA和Na+/H+antiporter的CDS區(qū)序列,其次,構(gòu)建了耐鹽基因的過表... 

【文章來源】:東北師范大學(xué)吉林省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:40 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

海桿菌耐鹽基因betA和Na + /H + antiporter的克隆及功能驗(yàn)證


擬南芥中質(zhì)膜Na+/H+antiporter和液泡膜Na+/H+antiporter基因[24]

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植物過表達(dá)載體pTF101.1-35S表11:酶切反應(yīng)體系:

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M.sp.基因組DNA電泳圖

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)小麥幼胚遺傳轉(zhuǎn)化的影響因素[J]. 王翠亭,衛(wèi)志明.  植物生理與分子生物學(xué)學(xué)報. 2003(06)



本文編號:3210783

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