芒果過敏原分子鑒定的初步研究
發(fā)布時間:2021-04-24 20:39
新時代人們不斷追求更高品質(zhì)的生活,水果作為健康必需食品的消費量也逐年遞增,但水果也是食物過敏的主要過敏來源之一。芒果(Mangifera indica L.)是世界第二大熱帶特產(chǎn)水果,但同時在水果過敏的病例中位居第一。芒果過敏成為影響農(nóng)產(chǎn)品安全和人們生活質(zhì)量的新問題。目前芒果的過敏原組分還不很明確,本研究以我國最常見的過敏水果芒果為研究對象,對芒果過敏原蛋白分子做了初步鑒定,為芒果過敏診斷、脫敏治療和品種選育提供一定參考。主要結(jié)果如下:1.對芒果過敏進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查,收集芒果過敏病例80例,發(fā)現(xiàn)中國患者芒果過敏發(fā)生途徑主要為食用(80%),其次為接觸(36%)。同時,根據(jù)過敏反應(yīng)出現(xiàn)的時間不同,芒果過敏分為具有口腔過敏綜合征(OAS,口咽麻癢、唇舌腫脹)、皮疹、腹痛腹瀉等癥狀的速發(fā)型過敏(80%)和具有丘疹、水皰等皮膚癥狀的遲發(fā)型過敏(20%)。2.應(yīng)用不同酸堿性的Coca’s提取液提取芒果蛋白,確定堿性環(huán)境提取效果更佳。提取‘臺農(nóng)一號’、‘紅象牙’、‘貴妃芒’和‘凱特芒’四個品種芒果果皮與果肉總蛋白,發(fā)現(xiàn)各品種間蛋白質(zhì)含量差異明顯,“臺農(nóng)一號”芒果果肉蛋白含量最高為4.84mg/g,...
【文章來源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
致謝
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 水果過敏反應(yīng)概述
1.1.1 過敏反應(yīng)機理
1.1.2 水果過敏流行情況
1.1.3 過敏原鑒定方法
1.2 熱帶水果過敏的流行病學(xué)調(diào)查和過敏癥狀
1.2.1 熱帶水果的流行病學(xué)調(diào)查
1.2.2 熱帶水果過敏癥狀
1.2.3 芒果過敏癥狀分型
1.3 熱帶水果過敏原研究進(jìn)展
1.4 芒果過敏的交叉反應(yīng)現(xiàn)象
1.5 芒果基因組、轉(zhuǎn)錄組、蛋白組研究現(xiàn)狀
1.6 芒果過敏原分子研究現(xiàn)狀
1.7 研究意義
1.8 研究內(nèi)容和技術(shù)路線
2 芒果過敏病例收集與分析
2.1 過敏病例收集方法
2.2 芒果過敏病例分析
2.3 芒果過敏患者特異性抗體檢測
3 芒果過敏原免疫學(xué)鑒定和分離純化
3.1 材料與方法
3.1.1 試驗材料
3.1.2 試驗儀器與試劑配制
3.1.3 不同酸堿性提取液對芒果蛋白提取的影響
3.1.4 不同芒果品種果肉、果皮蛋白粗提液制備
3.1.5 離子交換層析柱分離芒果過敏蛋白
3.1.6 去果膠超濾管純化芒果過敏蛋白
3.1.7 芒果果實蛋白免疫小鼠,單克隆抗體制備
3.1.8 酶聯(lián)免疫吸附法測定芒果過敏患者IgE
3.1.9 芒果蛋白提取物免疫印跡鑒定
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 不同酸堿性提取液對芒果蛋白提取的影響
3.2.2 不同芒果品種果肉蛋白、果皮蛋白粗提液制備
3.2.3 離子交換層析柱分離芒果過敏蛋白
3.2.4 去果膠超濾管純化芒果過敏蛋白
3.2.5 芒果果實蛋白免疫小鼠,單克隆抗體制備
3.2.6 酶聯(lián)免疫吸附法測定芒果過敏患者IgE
3.2.7 芒果蛋白提取物免疫印跡鑒定
3.3 25-35kDa蛋白質(zhì)譜鑒定
3.3.1 鑒定方法
3.3.2 鑒定結(jié)果
3.3.3 蛋白篩選
4 芒果過敏原的重組表達(dá)(大腸桿菌系統(tǒng))
4.1 芒果主要過敏原Mani1的克隆與表達(dá)載體構(gòu)建
4.2 芒果Mani1的表達(dá)純化
4.3 重組Mani1的檢測
4.4 討論
5 小結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]2329例兒童過敏性疾病變應(yīng)原檢測結(jié)果分析[J]. 殷皓,俞蕾,張曉峰,崔玉寶. 醫(yī)學(xué)綜述. 2019(13)
[2]芒果過敏原幾丁質(zhì)酶的序列和B細(xì)胞抗原表位的分析[J]. 張帥,劉澤標(biāo),吳宗敏,閆慧清. 貴州師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2018(04)
[3]?谑袃和儜(yīng)原流行病學(xué)調(diào)查研究[J]. 王靈,陳實,廖鋒,曾霞,吳少皎,謝躍琦,林濤,林霞,陳冰. 海南醫(yī)學(xué). 2016(04)
[4]Anaphylaxis and generalized urticaria from eating Chinese bayberry fruit[J]. Hui-ying WANG 1,Zhong-shan GAO 2,Zhao-wei YANG 2,Jing-xin SHAO 1,Xiu-zhen ZHAO 1,Yu DAI 3,Ronald VAN REE 4(1 Department of Allergy and Clinical Immunology,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310013,China)(2 Allergy Research Center,Department of Horticulture,College of Agriculture and Biotechnology,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China)(3 Department of Clinic Laboratory,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310013,China)(4 Department of Experimental Immunology and Department of Otorhinolaryngology,Academic Medical Center,University of Amsterdam,Meibergdreef 9,1105 AZ,Amsterdam,the Netherlands). Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2012(10)
[5]20萬項次過敏原特異性IgE檢測結(jié)果[J]. 王瑞琦,張宏譽. 中華臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志. 2012(01)
[6]芒果皮炎39例臨床分析[J]. 陳燕,于春水,張浩,陳星,鄧?yán)? 川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2011(04)
[7]一項調(diào)查“刷新”過敏食物排行榜 中原居民易對南方水果過敏[J]. 楊力勇,魏妍平,楊振嶺. 家庭中醫(yī)藥. 2006(09)
[8]某些食物的過敏性問題[J]. 白清云. 中國食物與營養(yǎng). 2005(07)
[9]食荔枝致過敏性紫癜一例[J]. 徐紅波,郭霞信,劉瑛. 華北國防醫(yī)藥. 2005(02)
[10]荔枝過敏1例[J]. 王彤,李明霞. 臨床軍醫(yī)雜志. 2004(03)
碩士論文
[1]昆明地區(qū)芒果果實變應(yīng)原致敏性的調(diào)查分析及實驗研究[D]. 蔣鵬.昆明醫(yī)學(xué)院 2008
本文編號:3158041
【文章來源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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致謝
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Abstract
1 緒論
1.1 水果過敏反應(yīng)概述
1.1.1 過敏反應(yīng)機理
1.1.2 水果過敏流行情況
1.1.3 過敏原鑒定方法
1.2 熱帶水果過敏的流行病學(xué)調(diào)查和過敏癥狀
1.2.1 熱帶水果的流行病學(xué)調(diào)查
1.2.2 熱帶水果過敏癥狀
1.2.3 芒果過敏癥狀分型
1.3 熱帶水果過敏原研究進(jìn)展
1.4 芒果過敏的交叉反應(yīng)現(xiàn)象
1.5 芒果基因組、轉(zhuǎn)錄組、蛋白組研究現(xiàn)狀
1.6 芒果過敏原分子研究現(xiàn)狀
1.7 研究意義
1.8 研究內(nèi)容和技術(shù)路線
2 芒果過敏病例收集與分析
2.1 過敏病例收集方法
2.2 芒果過敏病例分析
2.3 芒果過敏患者特異性抗體檢測
3 芒果過敏原免疫學(xué)鑒定和分離純化
3.1 材料與方法
3.1.1 試驗材料
3.1.2 試驗儀器與試劑配制
3.1.3 不同酸堿性提取液對芒果蛋白提取的影響
3.1.4 不同芒果品種果肉、果皮蛋白粗提液制備
3.1.5 離子交換層析柱分離芒果過敏蛋白
3.1.6 去果膠超濾管純化芒果過敏蛋白
3.1.7 芒果果實蛋白免疫小鼠,單克隆抗體制備
3.1.8 酶聯(lián)免疫吸附法測定芒果過敏患者IgE
3.1.9 芒果蛋白提取物免疫印跡鑒定
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 不同酸堿性提取液對芒果蛋白提取的影響
3.2.2 不同芒果品種果肉蛋白、果皮蛋白粗提液制備
3.2.3 離子交換層析柱分離芒果過敏蛋白
3.2.4 去果膠超濾管純化芒果過敏蛋白
3.2.5 芒果果實蛋白免疫小鼠,單克隆抗體制備
3.2.6 酶聯(lián)免疫吸附法測定芒果過敏患者IgE
3.2.7 芒果蛋白提取物免疫印跡鑒定
3.3 25-35kDa蛋白質(zhì)譜鑒定
3.3.1 鑒定方法
3.3.2 鑒定結(jié)果
3.3.3 蛋白篩選
4 芒果過敏原的重組表達(dá)(大腸桿菌系統(tǒng))
4.1 芒果主要過敏原Mani1的克隆與表達(dá)載體構(gòu)建
4.2 芒果Mani1的表達(dá)純化
4.3 重組Mani1的檢測
4.4 討論
5 小結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]2329例兒童過敏性疾病變應(yīng)原檢測結(jié)果分析[J]. 殷皓,俞蕾,張曉峰,崔玉寶. 醫(yī)學(xué)綜述. 2019(13)
[2]芒果過敏原幾丁質(zhì)酶的序列和B細(xì)胞抗原表位的分析[J]. 張帥,劉澤標(biāo),吳宗敏,閆慧清. 貴州師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2018(04)
[3]?谑袃和儜(yīng)原流行病學(xué)調(diào)查研究[J]. 王靈,陳實,廖鋒,曾霞,吳少皎,謝躍琦,林濤,林霞,陳冰. 海南醫(yī)學(xué). 2016(04)
[4]Anaphylaxis and generalized urticaria from eating Chinese bayberry fruit[J]. Hui-ying WANG 1,Zhong-shan GAO 2,Zhao-wei YANG 2,Jing-xin SHAO 1,Xiu-zhen ZHAO 1,Yu DAI 3,Ronald VAN REE 4(1 Department of Allergy and Clinical Immunology,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310013,China)(2 Allergy Research Center,Department of Horticulture,College of Agriculture and Biotechnology,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China)(3 Department of Clinic Laboratory,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310013,China)(4 Department of Experimental Immunology and Department of Otorhinolaryngology,Academic Medical Center,University of Amsterdam,Meibergdreef 9,1105 AZ,Amsterdam,the Netherlands). Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2012(10)
[5]20萬項次過敏原特異性IgE檢測結(jié)果[J]. 王瑞琦,張宏譽. 中華臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志. 2012(01)
[6]芒果皮炎39例臨床分析[J]. 陳燕,于春水,張浩,陳星,鄧?yán)? 川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2011(04)
[7]一項調(diào)查“刷新”過敏食物排行榜 中原居民易對南方水果過敏[J]. 楊力勇,魏妍平,楊振嶺. 家庭中醫(yī)藥. 2006(09)
[8]某些食物的過敏性問題[J]. 白清云. 中國食物與營養(yǎng). 2005(07)
[9]食荔枝致過敏性紫癜一例[J]. 徐紅波,郭霞信,劉瑛. 華北國防醫(yī)藥. 2005(02)
[10]荔枝過敏1例[J]. 王彤,李明霞. 臨床軍醫(yī)雜志. 2004(03)
碩士論文
[1]昆明地區(qū)芒果果實變應(yīng)原致敏性的調(diào)查分析及實驗研究[D]. 蔣鵬.昆明醫(yī)學(xué)院 2008
本文編號:3158041
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