近年來(lái)生防菌株在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用備受關(guān)注。植物根際土壤是一個(gè)微生物種群極其豐富的環(huán)境,利用合適的篩選方法從中獲得有良好拮抗活性的細(xì)菌有較高的研究?jī)r(jià)值。本論文首先從山西省晉中市榆次區(qū)某農(nóng)田土壤采樣,利用稀釋涂布法分離得到53株細(xì)菌,使用改良牛津杯法進(jìn)行拮抗細(xì)菌的篩選,得到3株拮抗細(xì)菌。經(jīng)過(guò)濾膜法復(fù)篩發(fā)現(xiàn)菌體可以表現(xiàn)出拮抗活性,說(shuō)明這些拮抗細(xì)菌的抑菌作用不需要微生物細(xì)胞之間的直接接觸,而傳統(tǒng)牛津杯法復(fù)篩發(fā)現(xiàn)拮抗細(xì)菌的無(wú)細(xì)胞發(fā)酵液沒(méi)有表現(xiàn)出拮抗活性,可能因?yàn)檗卓辜?xì)菌的無(wú)細(xì)胞發(fā)酵液中有效成分含量太低。同時(shí),這些結(jié)果也說(shuō)明,與傳統(tǒng)牛津杯法和濾膜法相比,改良牛津杯法操作簡(jiǎn)單,效果更好。液體混合培養(yǎng)法復(fù)篩也驗(yàn)證了上述結(jié)果。對(duì)分離得到的拮抗細(xì)菌CK09進(jìn)行生理生化特征鑒定和16S rRNA序列分析,結(jié)果表明,該細(xì)菌為辣椒溶桿菌（Lysobactercapsici）�；诟牧寂＝虮ǖ牧己眯Ч�,我們對(duì)這種方法進(jìn)行了進(jìn)一步的優(yōu)化。采用單因素實(shí)驗(yàn)對(duì)改良牛津杯方法中培養(yǎng)基瓊脂濃度、拮抗細(xì)菌和指示細(xì)菌的活菌數(shù)等參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化,最終發(fā)現(xiàn),最佳瓊脂濃度為10 g/L,最佳拮抗菌濃度為10⁸ CFU... 

【文章來(lái)源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 綜述
    1.1 前言
    1.2 生防菌株的概述
        1.2.1 定義
        1.2.2 生防菌株的分類
        1.2.3 生防菌株研究目前面臨的問(wèn)題
    1.3 植物根際土壤拮抗細(xì)菌的研究進(jìn)展
        1.3.1 研究現(xiàn)狀
        1.3.2 拮抗細(xì)菌的拮抗機(jī)制簡(jiǎn)述
    1.4 溶桿菌屬細(xì)菌概述
        1.4.1 溶桿菌屬細(xì)菌的基本特征
        1.4.2 溶桿菌屬細(xì)菌抑菌活性物質(zhì)的研究進(jìn)展
    1.5 篩選方法概述
        1.5.1 目前研究常用的篩選方法
        1.5.2 常用篩選方法的不足之處
    1.6 本研究的內(nèi)容及選題目的、意義
第二章 土壤中拮抗細(xì)菌的分離和篩選
    2.1 材料和儀器
        2.1.1 土壤樣本來(lái)源
        2.1.2 主要試劑材料和培養(yǎng)基
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 土壤樣品的前期處理
        2.2.2 土壤樣品中細(xì)菌的分離、純化
        2.2.3 土壤拮抗細(xì)菌的初篩
        2.2.4 土壤拮抗細(xì)菌的復(fù)篩
        2.2.5 各菌株的分類學(xué)地位鑒定
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 土壤樣品中細(xì)菌的分離純化
        2.3.2 拮抗細(xì)菌的初篩
        2.3.3 傳統(tǒng)牛津杯法和濾膜法復(fù)篩
        2.3.4 液體混合培養(yǎng)法復(fù)篩
        2.3.5 各菌株的分類學(xué)地位的鑒定
    2.4 討論
第三章 篩選方法的優(yōu)化和辣椒溶桿菌CK09 的抑菌譜
    3.1 材料和儀器
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)所用菌株
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)材料和培養(yǎng)基
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 初篩方法的優(yōu)化
        3.2.2 辣椒溶桿菌CK09 的抑菌廣譜性研究
        3.2.3 數(shù)據(jù)處理
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 初篩方法的優(yōu)化
        3.3.2 辣椒溶桿菌CK09 的抑菌廣譜性
    3.4 討論
第四章 辣椒溶桿菌CK09 的拮抗活性
    4.1 材料和儀器
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)所用菌株
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)材料試劑和培養(yǎng)基
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 辣椒溶桿菌CK09 發(fā)酵液對(duì)指示菌的作用類型
        4.2.2 溫度對(duì)辣椒溶桿菌CK09 發(fā)酵液的拮抗活性的影響
        4.2.3 pH對(duì)辣椒溶桿菌CK09 發(fā)酵液的拮抗活性的影響
        4.2.4 辣椒溶桿菌CK09 的培養(yǎng)時(shí)間對(duì)其發(fā)酵液拮抗活性的影響
        4.2.5 辣椒溶桿菌CK09 產(chǎn)生水解酶和鐵載體的能力
        4.2.6 數(shù)據(jù)處理
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 辣椒溶桿菌CK09 發(fā)酵液對(duì)指示菌的作用類型
        4.3.2 溫度對(duì)辣椒溶桿菌CK09 發(fā)酵液的拮抗活性的影響
        4.3.3 pH對(duì)辣椒溶桿菌CK09 發(fā)酵液拮抗活性的影響
        4.3.4 辣椒溶桿菌CK09 培養(yǎng)時(shí)間對(duì)其發(fā)酵液拮抗活性的影響
        4.3.5 辣椒溶桿菌CK09 產(chǎn)生水解酶和鐵載體的能力
    4.4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)況及聯(lián)系方式



本文編號(hào)：3153304