發(fā)布時間：2021-03-27 03:38

　　水稻（Oryzasativa L.）是全球最重要的經(jīng)濟作物和糧食作物之一,水稻的消費量在我國糧食作物中占主導地位,保證水稻產(chǎn)量的穩(wěn)定和高產(chǎn)對于保證我國糧食安全具有非常重要的戰(zhàn)略地位。同時,全球環(huán)境繼續(xù)變暖,極端氣候頻繁出現(xiàn),給作物帶來很多不可預知的風險。所以,在保證和增加水稻產(chǎn)量的基礎(chǔ)上,不斷提高水稻抵抗非生物脅迫物和生物脅迫的能力,值得深入研究和探討。水稻Xa21于1995年被克隆,屬于免疫系統(tǒng)相關(guān)的類受體激酶,對水稻白葉枯病菌（Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo）具有廣譜抗性。病程相關(guān)蛋白質(zhì)（Pathogenesis-related proteins,PR）是由植物受到外源病原物侵染或非生物脅迫刺激產(chǎn)生的一類低分子量蛋白質(zhì),水稻OsPR1家族屬于類絲氨酸羧肽酶（serine carboxypeptidase-like proteins,SCPLs）,在水稻、煙草、番茄等中都有發(fā)現(xiàn),其中OsPR1A是最早被鑒定和克隆的病程相關(guān)蛋白質(zhì)之一,可能參與了水稻Xa21介導抗白吐枯病菌信號途徑。本研究目的有,第一,研究OsPR1A對水稻農(nóng)藝性狀的影響并了解在非生物... 

【文章來源】：河北農(nóng)業(yè)大學河北省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
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英文摘要
1 引言
    1.1 非生物脅迫對水稻生長發(fā)育的影響
        1.1.1 冷脅迫對水稻生長發(fā)育的影響
        1.1.2 熱脅迫對水稻生長發(fā)育的影響
        1.1.3 旱脅迫對水稻生長發(fā)育的影響
        1.1.4 淹脅迫對水稻生長發(fā)育的影響
        1.1.5 鹽脅迫對水稻生長發(fā)育的影響
    1.2 水稻受到生物脅迫的影響
        1.2.1 水稻白葉枯病
        1.2.2 水稻稻瘟病
    1.3 水稻受體激酶XA21的研究進展
    1.4 水稻病程相關(guān)蛋白質(zhì)OsPR1A相關(guān)研究
    1.5 PCR和WB在轉(zhuǎn)基因植物的檢測和蛋白表達中的應(yīng)用
        1.5.1 PCR在轉(zhuǎn)基因植物的檢測中的應(yīng)用
        1.5.2 WB在轉(zhuǎn)基因植物的檢測、蛋白表達和菌細胞數(shù)統(tǒng)計中的應(yīng)用
    1.6 研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 生物材料
        2.1.2 試劑材料
        2.1.3 儀器
    2.2 方法和步驟
        2.2.1 水稻的種植
        2.2.2 水稻全蛋白質(zhì)的提取
        2.2.3 蛋白質(zhì)樣品的WB檢測
        2.2.4 水稻OsPR1a-RNAi和超表達載體的構(gòu)建、遺傳轉(zhuǎn)化及PCR鑒定
        2.2.5 OsPR1a-RNAi及OsPR1a-OX轉(zhuǎn)基因水稻的陽性鑒定
        2.2.6 OsPR1a-RNAi及OsPR1a-OX水稻農(nóng)藝性狀的統(tǒng)計
        2.2.7 水稻非生物脅迫的處理
        2.2.8 水稻白葉枯病菌Xoo的培養(yǎng)及接菌
        2.2.9 Xoo標準曲線的制作
        2.2.10 水稻OsPR1a基因的轉(zhuǎn)錄數(shù)據(jù)
3. 結(jié)果
    3.1 OsPR1a-RNAi及OsPR1a-OX轉(zhuǎn)化載體的構(gòu)建
        3.1.1 OsPR1a-RNAi轉(zhuǎn)化載體的構(gòu)建
        3.1.2 OsPR1a-OX轉(zhuǎn)化載體的構(gòu)建
    3.2 OsPR1a-RNAi及OsPR1a-OX陽性純合植株的鑒定
        3.2.1 OsPR1a-RNAi的陽性純合植株的鑒定
        3.2.2 OsPR1a-OX的陽性純合植株的鑒定
    3.3 OsPR1a-RNAi和OsPR1a-OX轉(zhuǎn)基因水稻的農(nóng)藝性狀
    3.4 OsPR1A蛋白質(zhì)對非生物脅迫的響應(yīng)
    3.5 OsPR1A蛋白質(zhì)在不同光照條件下的表達情況
        3.5.1 活體水稻幼苗OsPR1A蛋白質(zhì)在不同光照條件下的表達情況
        3.5.2 活體水稻幼苗OsPR1A蛋白質(zhì)在遮光條件下的表達情況
        3.5.3 水稻離體葉片中OsPR1A在不同光照環(huán)境下的表達情況
    3.6 Xoo細胞數(shù)和WB信號強度的對應(yīng)關(guān)系
    3.7 水稻接種Xoo后葉片內(nèi)Xoo的菌數(shù)及OsPR1A的表達情況
        3.7.1 分蘗期轉(zhuǎn)基因水稻接種Xoo后葉片病斑長度分析
        3.7.2 OsPR1a-RNAi苗期水稻接種Xoo后病斑長度及菌量分析
        3.7.3 OsPR1a-OX苗期水稻接種Xoo后病斑長度及菌量分析
        3.7.4 水稻不同抗感組合中OsPR1A蛋白質(zhì)表達的時間特異性
        3.7.5 接種Xoo OsPR1A在葉片中表達部位的特異性
        3.7.6 不同水稻材料在病斑處OsPR1A蛋白質(zhì)表達的時間特異性
        3.7.7 轉(zhuǎn)基因水稻苗期在不同溫度下對Xoo的抗性反應(yīng)
    3.8 水稻OsPR1a基因的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻
在讀期間發(fā)表的學術(shù)論文
作者簡歷
致謝



本文編號：3102810