發(fā)布時(shí)間：2021-02-04 12:59

　　本文研究了脂聯(lián)素對(duì)雞原代肝細(xì)胞、成肌細(xì)胞和脂肪細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響及機(jī)制。通過外源添加重組脂聯(lián)素蛋白和腺病毒過表達(dá)的方法,探究了脂聯(lián)素對(duì)雞脂質(zhì)代謝的調(diào)控作用,旨在深入了解家禽的脂肪代謝調(diào)控機(jī)制,為改善家禽生產(chǎn)性能,提高飼料轉(zhuǎn)化率和治療肥胖等代謝疾病提供新的思路。試驗(yàn)一研究重組脂聯(lián)素對(duì)雞原代肝細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響及機(jī)制。首先,用棕櫚酸（飽和脂肪酸）和油酸（不飽和脂肪酸）預(yù)處理,探究重組脂聯(lián)素梯度添加后對(duì)雞原代肝細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響,研究結(jié)果表明重組脂聯(lián)素能夠降低（P<0.05）細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量,5μg/mL重組脂聯(lián)素降脂作用更為顯著;相比油酸條件下,棕櫚酸條件下重組脂聯(lián)素降脂作用更加明顯。接下來,選取棕櫚酸和5μg/mL重組脂聯(lián)素研究其對(duì)脂質(zhì)代謝的具體作用機(jī)制。研究結(jié)果表明重組脂聯(lián)素能夠降低細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量,增加（P<0.05）肝細(xì)胞上清液中甘油三酯（TG）和極低密度脂蛋白（VLDL）的含量。棕櫚酸預(yù)處理后,重組脂聯(lián)素顯著（P<0.01）增加了脂合成基因（FAS、ACC、PPARγ和SREBP1）的mRNA表達(dá),同時(shí)有增加脂肪酸合酶（FAS）（P=0.07）和蘋果酸酶（ME）（P... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：89 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

脂聯(lián)素的構(gòu)成（Goldsteinetal.,2009）

脂聯(lián)素對(duì)雞原代肝細(xì)胞、成肌細(xì)胞和脂肪細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響及機(jī)制263結(jié)果與分析3.1重組脂聯(lián)素對(duì)雞原代肝細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響及機(jī)制（試驗(yàn)一）3.1.1不同濃度重組脂聯(lián)素對(duì)雞原代肝細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響3.1.1.1棕櫚酸條件下，重組脂聯(lián)素對(duì)細(xì)胞活力、胞內(nèi)脂質(zhì)含量的影響PA預(yù)處理24h并沒有影響（P＞0.1）肝細(xì)胞的細(xì)胞活力，但會(huì)顯著（P＜0.05）增加肝細(xì)胞中甘油三酯含量；當(dāng)額外添加不同濃度重組脂聯(lián)素處理24h后，與PA組相比，肝細(xì)胞活力顯著（P＜0.01）增加，但甘油三酯含量顯著（P＜0.05）降低并呈現(xiàn)一定劑量依賴性（圖3-1A-B）。通過油紅O染色進(jìn)一步驗(yàn)證，結(jié)果顯示，PA預(yù)處理24h使得肝細(xì)胞中脂滴（紅色）明顯增多，但PA預(yù)處理后額外添加不同濃度重組脂聯(lián)素處理使脂滴明顯減少，藍(lán)色代表細(xì)胞核（圖3-1C）。050100150200CellViability%********A.Con1Con212.55(μg/mL)ADPNPA-0.000.050.100.150.200.25*****mmol/gprot**B.TGCon1Con212.55(μg/mL)ADPNPA-圖3-1棕櫚酸條件下，重組脂聯(lián)素對(duì)細(xì)胞活力、胞內(nèi)脂質(zhì)含量的影響。（A）細(xì)胞活力，（B）細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量，（C）油紅O染色結(jié)果（10×40）。*P<0.05，**P<0.01，數(shù)據(jù)表示為Mean±SD（n=6）。

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文293.1.1.3油酸條件下，重組脂聯(lián)素對(duì)細(xì)胞活力、胞內(nèi)脂質(zhì)含量的影響OA預(yù)處理24h并沒有影響（P＞0.1）肝細(xì)胞的細(xì)胞活力，但會(huì)顯著（P＜0.001）增加肝細(xì)胞中甘油三酯含量；當(dāng)額外添加不同濃度重組脂聯(lián)素處理24h后，與OA組相比，肝細(xì)胞的細(xì)胞活力顯著（P＜0.01）增加，但只有5μg/mL重組脂聯(lián)素顯著（P＜0.05）降低了肝細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量（圖3-3A-B）。通過油紅O染色進(jìn)一步驗(yàn)證，OA預(yù)處理24h后肝細(xì)胞內(nèi)脂滴（紅色）明顯增多，當(dāng)OA預(yù)處理24h后，只有添加5μg/mL重組脂聯(lián)素明顯減少了脂滴，藍(lán)色代表細(xì)胞核（圖3-3C）。050100150200CellViability%**************A.Con1Con212.55(μg/mL)ADPNOA-0.000.050.100.150.200.25*************TGB.mmol/gprotCon1Con212.55(μg/mL)ADPNOA-圖3-3油酸條件下，重組脂聯(lián)素對(duì)細(xì)胞活力、胞內(nèi)脂質(zhì)含量的影響。（A）細(xì)胞活力，（B）細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量，（C）油紅O染色結(jié)果（10×40）。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，數(shù)據(jù)表示為Mean±SD（n=6）。Fig.3-3Effectofrecombinantadiponectinoncellviabilityandintracellularlipidcontentofhepatocytesunderoleicacidcondition.(A)Cellviability,(B)Thecontentoftriglyceridesinthecells,(C)OilredOstaining(10×40).*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001,dataisexpressedasMean±SD(n=6).

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3018349