目的:1.篩選和優(yōu)化誘導(dǎo)白及愈傷組織的最優(yōu)培養(yǎng)基配方;2.觀察白及愈傷與內(nèi)生真菌共生培養(yǎng)的過程,分析內(nèi)生真菌對白及次生代謝物合成的影響;3.檢測白及愈傷組織在懸浮培養(yǎng)過程中不同階段的SNP。方法:1.正交試驗(yàn)方法優(yōu)化白及誘導(dǎo)培養(yǎng)基:利用2因素3水平正交試驗(yàn)共設(shè)計(jì)出培養(yǎng)基類型,將所得到的無菌白及種子轉(zhuǎn)入這9種培養(yǎng)基中,在培養(yǎng)50天之后計(jì)算愈傷組織的誘導(dǎo)率。Box-Benhnken響應(yīng)面法優(yōu)化白及愈傷的增殖培養(yǎng)基:根據(jù)BBD試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,確定BBD試驗(yàn)因子為不同濃度的6-BA、2,4-D和NAA,響應(yīng)值為愈傷組織增殖率,設(shè)計(jì)響應(yīng)面試驗(yàn)。并從誘導(dǎo)培養(yǎng)基中挑選出疏松、嫩黃的愈傷組織,接種在13種增殖培養(yǎng)基中,20天后計(jì)算愈傷增殖率。2.白及內(nèi)生真菌與愈傷組織共培養(yǎng)之后次生代謝產(chǎn)物的成分測定:一共挑選了8株在PDA培養(yǎng)基中生長狀態(tài)和顏色不一樣的內(nèi)生真菌,與白及愈傷一起共同接種到愈傷增殖的優(yōu)選培養(yǎng)基中進(jìn)行共培養(yǎng)。在培養(yǎng)生長的過程中,觀察內(nèi)生真菌的生長狀態(tài)和白及愈傷組織的褐化程度以及共培養(yǎng)狀態(tài)下白及愈傷組織與內(nèi)生真菌的接觸程度。而且分別在3dai、6dai、9dai從共培養(yǎng)的培養(yǎng)基中取出愈傷組織,用... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

白及種子兩種不同培養(yǎng)基中誘導(dǎo)的愈傷組織

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文上官艷妮18圖1-2愈傷組織增殖率的響應(yīng)面圖和等值線圖（a,b:6-BA和2,4-D的相互作用;b,d:6-BA和NAA的相互作用;e,f:NAA和2,4-D的相互作用）Fig.1-2Isolinesandresponsesurfacesofcallusmultiplicationrates.Interactionbetweenof6-BAand2,4-D(a,b);Interactionbetweenof6-BAandNAA(c,d);InteractionbetweenofNAAand2,4-D(e,f)

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文上官艷妮26圖2-1愈傷組織與內(nèi)生真菌的共培養(yǎng)Fig.2-1Co-cultureofcallusandendophyticfungi注：A：白及愈傷組織與編號為1-1的內(nèi)生真菌共培養(yǎng)B：白及愈傷組織與編號為1-2的內(nèi)生真菌共培養(yǎng)C：白及愈傷組織與編號為1-49的內(nèi)生真菌共培養(yǎng)D：白及愈傷組織與編號為1-56的內(nèi)生真菌共培養(yǎng)E：白及愈傷組織與編號為1-42的內(nèi)生真菌共培養(yǎng)F：白及愈傷組織與編號為1-47的內(nèi)生真菌共培養(yǎng)G：白及愈傷組織與編號為3-120的內(nèi)生真菌共培養(yǎng)H：白及愈傷組織與編號為3-4的內(nèi)生真菌共培養(yǎng)I：對照組1.5.2內(nèi)生真菌培養(yǎng)在圖2-2中，從A到H分別是把編號為1-1、1-2、1-49、1-56、1-42、1-47、3-120、3-4的白及內(nèi)生真菌打成菌餅接種到培養(yǎng)皿的內(nèi)切三角形三個(gè)角內(nèi)，作為接種有白及愈傷組織的對照組。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]珍稀藥材白及“兩段式”組培快繁技術(shù)研究[J]. 劉春雷,劉燕琴,陳艾萌,劉杰,陳玉涵,李娜,劉旭.  西南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2020(01)
[2]射干內(nèi)生真菌Fusarium proliferatum的ISSR和SRAP位點(diǎn)遺傳多樣性分析[J]. 羅琴,趙歡,彭正松,李佩華,楊玉霞,夏燕莉,鄧迪.  中草藥. 2019(23)
[3]內(nèi)生真菌對鐵皮石斛多糖和生物堿合成關(guān)鍵酶基因表達(dá)的影響[J]. 王進(jìn),李俊峰,張婷婷,孫騰飛,劉文洪.  中草藥. 2019(23)
[4]白及根部內(nèi)生真菌多樣性研究[J]. 鄧文祥,趙漫麗,李永梅,王自林,張坤,湛方棟.  菌物學(xué)報(bào). 2019(11)
[5]菌根真菌對白及種子萌發(fā)和幼苗生根的作用[J]. 徐玲玲,張焱,趙明陽,李肖肖,南夢月,孟凡菊.  菌物學(xué)報(bào). 2019(09)
[6]與內(nèi)生真菌共培養(yǎng)對葡萄果肉細(xì)胞生理生化影響的差異研究[J]. 禹滿,陳競超,瞿巾卓,劉芳,潘小霞,楊明摯.  生物技術(shù)通報(bào). 2019(08)
[7]植物內(nèi)生菌的研究進(jìn)展[J]. 王玉芬.  現(xiàn)代園藝. 2019(11)
[8]基于Box-Behnken響應(yīng)面法優(yōu)化半夏蒸制工藝[J]. 李林,范文翔,王利,莫雪林,祝磊,江云,吳純潔.  中藥材. 2018(10)
[9]白及內(nèi)生菌Penicillium oxalicum的化學(xué)成分[J]. 韓雪花,胡瀚文,羅禹,鄧赟.  應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào). 2019(02)
[10]響應(yīng)面法優(yōu)化火龍果莖甾醇的提取及純化工藝研究[J]. 歐岳姣,曹劍鋒,張美容,陳集雙,梁西琴,胡燦,羅朝琴,徐連巧.  生物資源. 2018(03)

博士論文
[1]中國貴州蘭科植物白及內(nèi)生真菌多樣性及生態(tài)分布研究[D]. 陶剛.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009

碩士論文
[1]白及內(nèi)生真菌誘導(dǎo)子對宿主生長和主要活性物質(zhì)的影響及調(diào)控[D]. 田佩雯.廣西大學(xué) 2019
[2]葡萄離體細(xì)胞對非接觸內(nèi)生真菌的生理生化響應(yīng)[D]. 敖秀錦.云南大學(xué) 2018
[3]內(nèi)生真菌與葡萄細(xì)胞離體共培養(yǎng)體系的構(gòu)建及其代謝互作[D]. 黃麗華.云南大學(xué) 2016
[4]白及內(nèi)生菌的分離與鑒定[D]. 蘇子敬.重慶師范大學(xué) 2015



本文編號：2944005