流蘇（Chionanthus retusus）是木樨科（Oleaceae）流蘇樹(shù)屬（Chionanthus）植物,國(guó)家二級(jí)珍稀植物,落葉灌木或喬木,集食用、藥用、觀賞和經(jīng)濟(jì)價(jià)值于一身。其耐鹽、耐旱、耐寒,對(duì)復(fù)雜的南北方氣候具有較強(qiáng)的適應(yīng)能力。目前流蘇傳統(tǒng)繁殖方式主要以播種繁殖為主,生產(chǎn)周期較長(zhǎng),發(fā)芽率較低,為推進(jìn)流蘇無(wú)性系快速發(fā)展,進(jìn)行以下研究。本試驗(yàn)首先以流蘇幼胚為外植體,通過(guò)開(kāi)展流蘇體細(xì)胞胚發(fā)生的相關(guān)研究,篩選出了較為合適的培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件,培養(yǎng)出了流蘇體細(xì)胞胚再生植株;其次通過(guò)測(cè)定流蘇體細(xì)胞胚不同發(fā)育階段主要生理生化指標(biāo)進(jìn)一步揭示其生理機(jī)理;最后以莖段為外植體,確定了莖段快速繁殖技術(shù)的培養(yǎng)基及不同激素配比。研究結(jié)果如下:1、流蘇幼胚體細(xì)胞胚發(fā)生（1）流蘇幼胚體細(xì)胞胚誘導(dǎo)最適培養(yǎng)基:WPM+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D,體細(xì)胞胚誘導(dǎo)率可達(dá)12.36%。（2）最適誘導(dǎo)流蘇體細(xì)胞胚萌發(fā)成苗培養(yǎng)基:MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L GA₃,萌發(fā)率可達(dá)41.3%,成苗率為29.82%。（3）通過(guò)設(shè)置不同暗培養(yǎng)時(shí)間0 d,3... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)體細(xì)胞胚誘導(dǎo)的影響

流蘇體細(xì)胞胚發(fā)生及莖段再生體系的構(gòu)建183.1.4基本培養(yǎng)基對(duì)流蘇體細(xì)胞胚萌發(fā)成苗的影響由表10可以看出，流蘇體細(xì)胞胚萌發(fā)率及成苗率與基礎(chǔ)培養(yǎng)基類型具有顯著關(guān)系，萌發(fā)率方面：MS>WPM>B5，萌發(fā)率分別為26.78%、16.10%、5.16%；成苗率情況：MS>WPM>B5,萌發(fā)率分別為11.25%、7.05%、0.32%。在B5培養(yǎng)基上難以萌發(fā)成苗，WPM培養(yǎng)基萌發(fā)率較低，成苗情況較差。MS培養(yǎng)基與其他培養(yǎng)基誘導(dǎo)萌發(fā)成苗情況差異顯著。如圖3-A，將已發(fā)育成熟顏色轉(zhuǎn)綠的子葉形體細(xì)胞胚接種至MS培養(yǎng)基7d后，胚根長(zhǎng)出，子葉膨大（見(jiàn)圖2-A），培養(yǎng)至30d后胚芽萌發(fā)長(zhǎng)出（見(jiàn)圖2-B），胚根伸長(zhǎng)至3cm左右，再培養(yǎng)60d長(zhǎng)成完整植株（見(jiàn)圖2-C）。經(jīng)過(guò)多重比較與方差性分析，選擇用MS培養(yǎng)基時(shí)，萌發(fā)率與成苗率均與其他培養(yǎng)基呈現(xiàn)顯著差異（P<0.05），因此MS培養(yǎng)基最適誘導(dǎo)流蘇體細(xì)胞胚萌發(fā)成苗。表10基本培養(yǎng)基對(duì)流蘇體細(xì)胞胚萌發(fā)成苗的影響Table10EffectofbasicmediumonthegerminationandseedlingformationofsomaticembryoofChionanthusretusus組別Group基本培養(yǎng)基basalculturemedium萌發(fā)率Germinationrate（%）成苗率Seedlingrate（%）1B55.16±1.13c0.32±1.12c2WPM16.10±1.16b7.05±1.16b3MS26.78±2.78a11.25±3.02c圖2流蘇體細(xì)胞胚萌發(fā)成苗過(guò)程Fig.2ProcessofsomaticembryogerminationandseedlingformationofChionanthusretusus。A、接種至MS培養(yǎng)基7d后胚根長(zhǎng)出B、30d胚芽萌發(fā)C100d長(zhǎng)成3cm左右無(wú)菌苗3.1.5不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)流蘇體細(xì)胞胚萌發(fā)成苗的影響由表11可以看出，以MS及基本培養(yǎng)基，單獨(dú)添加1.0mg/L6-BA，培養(yǎng)7d后有胚根長(zhǎng)出，體細(xì)胞胚萌發(fā)率為30.21%，成苗率為13.2%。保持6-BA濃度1.0mg/L不變，ABC

流蘇體細(xì)胞胚發(fā)生及莖段再生體系的構(gòu)建203.1.6.2體細(xì)胞胚發(fā)生過(guò)程中可溶性蛋白含量的變化由圖4可以看出，可溶性蛋白在幼胚體細(xì)胞胚發(fā)生過(guò)程中呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)�？扇苄缘鞍缀吭�0-45d平穩(wěn)上升，表明幼胚非胚性愈傷組織向胚性愈傷組織轉(zhuǎn)變過(guò)程中，可溶性蛋白得到積累；在45-60d時(shí)，可溶性蛋白含量顯著上升，并在60d時(shí)達(dá)到峰值為4.18mg/g，此時(shí)處于體細(xì)胞胚分化初期；在60-90d可溶性蛋白含量下降，在90d時(shí)可溶性蛋白含量為1.1mg/g，表明在幼胚體細(xì)胞胚分化后期及萌發(fā)過(guò)程中可溶性蛋白質(zhì)被消耗。圖4體胚發(fā)生過(guò)程中可溶性蛋白含量的變化Fig4Changesofsolublesugarincallus圖3體胚發(fā)生過(guò)程中可溶性糖含量的變化Fig3Changesofsolublesugarincallus


本文編號(hào)：2901375