本試驗(yàn)選取了兩株產(chǎn)乳酸芽胞桿菌BLZ01和SPL01,用試劑盒測定乳酸類型,并根據(jù)細(xì)菌菌落形態(tài)和生理生化特征對(duì)BLZ01和SPL01進(jìn)行初步的鑒定,再結(jié)合16SrRNA測序結(jié)果鑒定該兩株芽胞桿菌。通過單因素試驗(yàn),對(duì)它們的培養(yǎng)基進(jìn)行了初步的優(yōu)化。采用動(dòng)物試驗(yàn),研究它們對(duì)肉雞生長性能、屠宰性能、部分免疫指標(biāo)及腸道菌群數(shù)量和多樣性的影響。試驗(yàn)主要內(nèi)容和結(jié)果如下：1.通過對(duì)細(xì)菌培養(yǎng)、革蘭染色,對(duì)BLZ01和SPL01進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析。再結(jié)合它們各自的生理生化特征及16S rRNA分析。結(jié)果,BLZ01被鑒定為產(chǎn)左旋乳酸的巨大芽胞桿菌(Bacillus megaterium), SPLO1為產(chǎn)乳酸的蠟樣芽胞桿菌(Bacillus cereus)。2.使用單因素試驗(yàn),運(yùn)用生產(chǎn)中經(jīng)常使用的發(fā)酵原材料,把BLZ01與SPL01的培養(yǎng)基進(jìn)行初步優(yōu)化。結(jié)果,芽胞桿菌BLZ01的最佳培養(yǎng)基為：葡萄糖10 g/L,玉米粉10 g/L,黃豆粉15 g/L,菜籽粕5g/L,魚粉10 g/L,尿素2 g/L,碳酸鈣2g/L氯化鈉5g/L, MgSO4 0.2g/L, pH為7.2～7.5。芽胞桿菌SPL01的最佳培養(yǎng)基為：葡萄糖10 g/L,玉米粉1 0g/L,黃豆粉10 g/L,菜籽粕5 g/L,魚粉10g/L,尿素2 g/L,碳酸鈣5 g/L,氯化鈉5g/L, MgSO4 0.5 g/L。3.選取150羽7日齡肉雞進(jìn)行試驗(yàn),隨機(jī)分成5組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10只。其中A為對(duì)照組,飼喂基礎(chǔ)日糧；B組飼喂基礎(chǔ)日糧添加0.05%巨大芽胞桿菌BLZ01菌粉；C組飼喂基礎(chǔ)日糧添加0.05%蠟樣芽胞桿菌SPL01菌粉；D組飼喂基礎(chǔ)日糧添加0.05%巨大芽胞桿菌BLZ01菌粉和0.05%蠟樣芽胞桿菌SPL01菌粉；E組飼喂基礎(chǔ)日糧添加0.1%添加巨大芽胞桿菌BLZ01菌粉和0.1%蠟樣芽胞桿菌SPL01菌粉。(1)生長性能：在平均日增重方面,四個(gè)試驗(yàn)組均顯著性高于對(duì)照組(P0.05),雖然復(fù)合活菌制劑D組和E組均高于單菌制劑B組和C組,但差異不顯著(P0.05)。在料重比方面,四個(gè)試驗(yàn)組均低于對(duì)照組。在屠宰性能方面,四個(gè)試驗(yàn)組的凈膛率、胸肌率和腿肌率均顯著性高于對(duì)照組(P0.05),且復(fù)合活菌制劑D組的胸肌率均顯著性高于B組和C組(P0.05),且復(fù)合活菌制劑E組的屠宰率、腿肌率均顯著性高于B組和C組(P0.05)。在基礎(chǔ)日糧中添加BLZ01和SPL01菌粉均能顯著性提高肉雞的增重及屠宰性能,且能降低料重比,同時(shí)BLZ01和SPL01的復(fù)合活菌制劑效果更優(yōu)于它們各自的單菌制劑效果。(2)肉雞免疫性能：雖然BLZ01和SPL01能提高部分肉雞的免疫器官指數(shù)和新城疫抗體效價(jià),但我們認(rèn)為它們不具有顯著性提高肉雞免疫功能的作用。(3)肉雞腸道菌群：四個(gè)試驗(yàn)組回腸的乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量均高于對(duì)照組,除C組乳酸桿菌差異不顯著(P0.05),其它組差異均顯著(P0.05)；盲腸中乳酸菌數(shù)量高于對(duì)照組,但差異不顯著(P0.05)。四個(gè)試驗(yàn)組回腸、盲腸的大腸桿菌和腸球菌數(shù)量均有所下降,且存在顯著性差異(P0.05)。說明BLZ01和SPL01具有促進(jìn)肉雞腸道中乳酸桿菌和雙歧桿菌有益菌生長的作用,同時(shí)抑制大腸桿菌等病原菌的繁殖。(4) PCR-DGGE結(jié)果：通過Quantity one軟件分析發(fā)現(xiàn),肉雞回腸、盲腸中均存在各自的特異性菌群,且存在較大的差異,即使飼喂BLZ01和SPL01均不能改變這種差異。在基礎(chǔ)日糧中添加BLZ01和SPL01可使肉雞回腸、盲腸的腸道菌群種類發(fā)生了較大的變化,且腸道菌種數(shù)量也得到了提高�；厥盏臈l帶中已培養(yǎng)出的細(xì)菌是以乳桿菌屬為主,包括唾液乳桿菌、口乳桿菌、乳酸桿菌和德氏乳桿菌,占已培養(yǎng)出細(xì)菌條帶的44.4%。說明BLZ01和SPL01具有提高肉雞腸道菌群的多樣性和種群密度的作用。
【學(xué)位單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：S831.5

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本文編號(hào)：2816387