【摘要】：川黃柏在我國的利用歷史悠久,是我國傳統(tǒng)的大宗木本藥材,且其內(nèi)皮富含多種生物堿成分,國內(nèi)外醫(yī)學應用價值極高。由于自然和人為等因素的影響,近幾年來川黃柏的野生資源越來越少;基于此,本實驗試圖建立川黃柏的高效再生體系,同時探討外源激素對當年生川黃柏幼苗生長生理特性及主要藥用成分含量的影響。鐵皮石斛是我國新興的名貴森林藥材,本文同時探究了外源6-BA和GA3對鐵皮石斛幼苗NaCl脅迫生長的影響。全文結(jié)果如下:1.以健康、飽滿的川黃柏種子為供試材料,得到川黃柏種子最佳消毒:75%酒精消毒45 s和0.1%升汞消毒20 min組合;種子預處理方式:經(jīng)98%H2SO4浸泡20min破殼后,4℃下1.0mol·L-1GA3浸種24h;無菌幼苗子葉和根段的愈傷組織誘導培養(yǎng)基配方為:MS+2.0mg·L-16-BA+1.5mg·L-1NAA,莖段愈傷組織誘導的培養(yǎng)基配方為:MS+2.0mg·L-16-BA+(0.5、1.0、1.5)mg·L-1NAA;不定芽分化的培養(yǎng)基配方為:MS+2.0 mg·L-1 6-BA;不定芽增殖的培養(yǎng)基配方為:MS+0.5mg·L-16-BA+0.4mg·L-12,4-D;不定芽生根的培養(yǎng)基配方為:1/2MS+2.0 mg-L-1 IBA+0.5%活性炭;生根的組培苗連續(xù)煉苗7 d后,移栽至滅菌混合基質(zhì)(珍珠巖:泥炭土 =1:4)中,連續(xù)培養(yǎng)15 d,植株成活率為80%,植株長勢較好。2.本試驗研究以川黃柏幼苗為實驗材料,使用不同濃度的6-BA、NAA和GA3進行葉片噴施處理。在川黃柏幼苗生長的不同階段,分別測定了幼苗的生物量、葉綠素、滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)及抗氧化酶活性等生理學方面的變化,同時也測定了幼苗各器官中的藥用成分含量。在我們的試驗中,較幼苗初期相比,不同濃度的激素均能促進幼苗葉片和株高的提高,外源激素對促進幼苗根和莖的木質(zhì)化效果好于葉片,且一定濃度的6-BA對增強植物光合作用的效果優(yōu)于其余兩種激素。隨著幼苗生長,各處理組中可溶性糖含量保持較穩(wěn)定的狀態(tài),可溶性蛋白質(zhì)含量逐漸降低,而MDA含量在一定程度上隨幼苗生長有所提高。隨幼苗生長表現(xiàn)出來的還有SOD活性和Vc含量的降低,POD活性稍微增強后出現(xiàn)驟降;其中較對照組相比,15.0 mg·L-1 GA3明顯抑制了幼苗生長中后期SOD、POD和CAT的活性。3.對照組和處理組幼苗各組織部位的藥用成分含量表現(xiàn)為:在第40 d,不同濃度6-BA處理組小檗堿含量在莖皮中的含量遠高于對照組的含量,在根皮和葉片中的含量沒有顯著變化;其中較對照組相比,小檗堿最大含量出現(xiàn)在30.0 mg·L-1 6-BA處理組的第40d,為46.15mg·g~(-1),較對照組提高17.68%,含量分布為葉片莖皮根皮。在第40 d,10.0 mg·L-L-1NAA處理組黃柏堿在葉片和莖皮中的含量均顯著高于對照組和其他處理組含量,該處理組幼苗總黃柏堿含量最高,為14.20 mg·g~(-1),較對照組含量提高127.71%,含量分布為莖皮葉片根皮。在第40 d,20.0 mg·L-1 6-BA處理組中幼苗各部位的巴馬汀含量均高于對照組和其他處理組,總含量為10.60 mg·g~(-1),較對照組含量提高了 55.85%,分布水平為莖皮根皮葉片;其中巴馬汀在NAA和GA3處理組的葉片和根皮存在量極低,幼苗前期并未檢測到其存在。在當年生幼苗中,各藥用成分的含量水平總體表現(xiàn)為,小檗堿含量最多,其次是黃柏堿,巴馬汀含量最低。4.外源激素對脅迫下鐵皮石斛生長的影響表現(xiàn)為:2.0 mg·L-1 6-BA可以顯著提高NaCl脅迫下鐵皮石斛幼苗根的生長率,而4.0 mg·L-1 GA3則顯著的提高其根的生長率;2.0mg·L-16-BA則可以降低葉綠素b含量,而4.0mg·L-16-BA則可以提高葉綠素的含量,且不同濃度6-BA對葉綠素a和類胡蘿卜素的含量無顯著性影響;2.0 mg·L-1GA3均可以提高葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素的含量,而6.0 mg·L-1 GA3則降低葉綠素b含量;4.0 mg·L-16-BA和6.0 mg·L-1 GA3均可以提高可溶性糖含量。川黃柏再生體系的建立為小檗堿、黃柏堿和巴馬汀等次生代謝產(chǎn)物的提取提供了大量優(yōu)質(zhì)愈傷組織,同時,川黃柏藥用成分的激素調(diào)控研究也為幼苗葉片作為藥用原料提供了科學依據(jù);噴施適當濃度的外源植物激素也可以緩解鹽脅迫對鐵皮石斛生長的抑制,促進鐵皮石斛中可溶性多糖的合成與積累。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：中南林業(yè)科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S567.19
，

本文編號：2382470