【摘要】：小麥粉能被加工制成面包、面條、饅頭、餅干等多種食品,這種良好的加工品質(zhì)主要是由貯藏蛋白的組成成分和各成分的含量決定。優(yōu)質(zhì)強筋小麥品種新麥26,由河南省新鄉(xiāng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)院育成,其烘焙品質(zhì)優(yōu)良,具有超親的現(xiàn)象,超美麥DNS。目前,基于麥谷蛋白亞基組成成分尚不能解析其優(yōu)良加工品質(zhì)形成的分子基礎(chǔ)。本研究以新麥26及其雙親為研究材料,通過理化指標(biāo)的評價,構(gòu)建小麥成熟籽粒雙向電泳體系,基于該體系分離新麥26與雙親種子中差異表達的蛋白并進行質(zhì)譜分析,以解析新麥26良好加工品質(zhì)形成的分子機制,為優(yōu)質(zhì)小麥品質(zhì)相關(guān)基因分子聚合育種提供強有力的理論、方法和技術(shù)支撐。主要研究結(jié)果如下:1、新麥26在面筋品質(zhì)方面具有超親現(xiàn)象:利用品質(zhì)分析相關(guān)儀器對新麥26及其親本進行理化特性分析,結(jié)果表明:新麥26的穩(wěn)定時間為20min左右,形成時間為30min左右,均高于其雙親3-4倍;其弱化度低于父本濟南17,與母本新麥18持平;其測定的面筋峰值各項參數(shù)均高于父本,其中PMT(峰值時間)與AM(峰前值)兩項參數(shù)也高于母本。這些品質(zhì)理化特性均顯示新麥26在面筋品質(zhì)上超越雙親。2、小麥成熟籽粒雙向電泳體系的優(yōu)化:以鄭麥366成熟籽粒為材料,建立小麥籽粒雙向電泳的體系,結(jié)果表明:用直接裂解法提取小麥成熟籽粒蛋白,使用17cm pH5-8的IPG預(yù)制膠條,上樣量為500μg時為最適體系。利用該雙向體系對不同的小麥品種進行驗證,均獲得了清晰、蛋白點分辨率高的雙向電泳圖譜,證實該雙向電泳體系具有較好的重復(fù)性。3、新麥26及其雙親差異蛋白點分離與鑒定:利用建立的小麥成熟籽粒雙向電泳體系對新麥26及其雙親成熟籽粒進行差異蛋白分離,結(jié)果顯示:每個蛋白質(zhì)譜約得到700個蛋白點,通過顯著性分析發(fā)現(xiàn)154個蛋白點在新麥26與濟南17中存在差異,152個蛋白點在新麥26與新麥18中存在差異。綜合選取具有顯著差異的150個蛋白點進行質(zhì)譜分析,共有135個蛋白點得到成功注釋。其中新麥26與濟南17成熟籽粒的顯著性差異點有77個,在濟南17中強表達的有36個,包括一些醇溶蛋白和絲氨酸蛋白酶抑制劑等;在新麥26強表達的有41個,包括麥谷蛋白亞基,單體淀粉酶和一些球蛋白等;新麥26與新麥18成熟種子中顯著性差異的點有58個,在新麥18中強表達的有41個,包括一些醇溶蛋白,絲氨酸蛋白酶抑制劑和小麥糖等,在新麥26中強表達的有17個,包括高分子量麥谷蛋白亞基,部分球蛋白和線粒體ATP合酶前體等。4、初步解析了新麥26優(yōu)良加工品質(zhì)形成的分子基礎(chǔ):與品質(zhì)相關(guān)的蛋白質(zhì)主要包括麥谷蛋白和醇溶蛋白。根據(jù)差異表達蛋白質(zhì)功能注釋結(jié)果結(jié)合Real-time PCR驗證,發(fā)現(xiàn)在新麥26中醇溶蛋白的表達量受到抑制,其中γ-醇溶蛋白SSP6202和SSP9409的表達量分別在新麥26中下調(diào)了45倍和8倍;而麥谷蛋白的表達量普遍上調(diào),其中SSP3905為麥谷蛋白1Ax1亞基,其表達量在新麥26中提高了9倍。結(jié)果表明醇溶蛋白的減少和麥谷蛋白的增加可能是新麥26加工品質(zhì)具有超親效應(yīng)的主要原因。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S512.1

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本文編號：2377340