【摘要】：被譽(yù)為“東方圣草”的蛹蟲(chóng)草是一種具有藥用及滋補(bǔ)功效的珍貴食藥用真菌。多方研究表明,蛹蟲(chóng)草所含的蟲(chóng)草素、蟲(chóng)草酸、蟲(chóng)草多糖、超氧化岐化酶(SOD)、維生素和礦質(zhì)元素等多種活性成分都遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)著名的珍貴中藥——冬蟲(chóng)夏草,臨床上常將蛹蟲(chóng)草作為冬蟲(chóng)夏草的替代品入藥[1],因此,蛹蟲(chóng)草的開(kāi)發(fā)前景十分廣闊。本研究以6個(gè)蛹蟲(chóng)草菌株為對(duì)象,分別進(jìn)行了分子鑒定、菌絲體培養(yǎng)特性研究,篩選出了優(yōu)勢(shì)菌種;采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化得到了蛹蟲(chóng)草液體菌種最適培養(yǎng)基配方;比較了各菌株栽培過(guò)程中生長(zhǎng)差異和子實(shí)體活性成分,同時(shí)研究了各菌株不同生長(zhǎng)階段的胞外酶活性變化,從而為蛹蟲(chóng)草優(yōu)良菌種的選育、培養(yǎng)條件的優(yōu)化及人工規(guī)�；耘嗵峁├碚摵图夹g(shù)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:(1)在6個(gè)蛹蟲(chóng)草菌種種質(zhì)篩選試驗(yàn)中,首先進(jìn)行拮抗試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)這6個(gè)菌株兩兩之間、同一菌株之間均存在拮抗現(xiàn)象;通過(guò)rDNA的ITS序列鑒定及進(jìn)化樹(shù)分析,鑒定這6個(gè)菌株均為蛹蟲(chóng)草菌,且親緣關(guān)系較近;最適培養(yǎng)條件下,CM3的菌絲生長(zhǎng)速度最快,CM8生長(zhǎng)速度最慢,但CM5的生長(zhǎng)勢(shì)最好;菌絲轉(zhuǎn)色培養(yǎng)表明CM4、CM5轉(zhuǎn)色快、顏色深,CM8不轉(zhuǎn)色;液體培養(yǎng)下,脫氫酶活性高的是CM5,最低的是CM8;CM5液體培養(yǎng)菌絲生物量最高,菌絲球大小均勻,密度大。在液體培養(yǎng)出菇試驗(yàn)中,CM5、CM4轉(zhuǎn)色后顏色橘黃,子座多而長(zhǎng),出草整齊,CM8不轉(zhuǎn)色,不出草。綜合分析得出,這6個(gè)供試菌株,CM5、CM4為優(yōu)良菌株,CM1次之,CM3與CM2較差,而CM8為不能出草的退化菌株。(2)篩選出優(yōu)勢(shì)種CM5為研究對(duì)象,以菌絲生物量為指標(biāo),優(yōu)化液體菌種培養(yǎng)基。結(jié)果表明:最適碳源為蔗糖,最適氮源為酵母粉,最適培養(yǎng)基配方為蔗糖3%、酵母粉1%、KH2PO4 0.2%和MgSO4 0.2%。(3)這6個(gè)菌株固體栽培研究和子實(shí)體活性成分檢測(cè)表明,CM5、CM4菌絲生長(zhǎng)快,潔白、濃密,長(zhǎng)勢(shì)良好,轉(zhuǎn)色快,顏色橘黃,原基分化早,形成子座多,產(chǎn)生的子實(shí)體粗細(xì)均勻,密度大,子實(shí)體頂端呈乳頭狀突起的子囊殼,出草整齊,無(wú)污染,生長(zhǎng)周期短,商品性狀良好,產(chǎn)量高;CM8不能轉(zhuǎn)色,不出草。5個(gè)出草菌株的子實(shí)體中蟲(chóng)草素含量最高的是CM4,最低的為CM2,蟲(chóng)草酸和蟲(chóng)草多糖含量最高的均為CM5,最低的均為CM1,此外,在這5個(gè)菌株的子實(shí)體中均檢測(cè)到了多種其他的活性成分。(4)這6個(gè)供試菌株的三種酶活性最高的是淀粉酶,其次是蛋白酶,最低的為纖維素酶,轉(zhuǎn)色能力好的菌株的纖維素酶和淀粉酶活性在轉(zhuǎn)色期達(dá)到峰值,纖維素酶活與子座的形成正相關(guān);而淀粉酶活性高則會(huì)抑制子座的正常分化,并與子實(shí)體的生長(zhǎng)正相關(guān);在子座形成期,蛋白酶活性高的菌株子座分化更佳,然而在子實(shí)體生長(zhǎng)時(shí)期蛋白酶活性低谷的菌株,產(chǎn)量更高,呈現(xiàn)一定的負(fù)相關(guān)。子實(shí)體形態(tài)好、產(chǎn)量高的優(yōu)良菌株CM4、CM5的纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶活性變化規(guī)律完全一致,而不轉(zhuǎn)色不出草的CM8的三種胞外酶的活性變化小,無(wú)明顯峰值出現(xiàn)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河南科技學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：S567.35

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本文編號(hào)：2371577