發(fā)布時間：2018-12-11 01:10

【摘要】：被譽為“東方圣草”的蛹蟲草是一種具有藥用及滋補功效的珍貴食藥用真菌。多方研究表明,蛹蟲草所含的蟲草素、蟲草酸、蟲草多糖、超氧化岐化酶(SOD)、維生素和礦質(zhì)元素等多種活性成分都遠遠超過著名的珍貴中藥——冬蟲夏草,臨床上常將蛹蟲草作為冬蟲夏草的替代品入藥[1],因此,蛹蟲草的開發(fā)前景十分廣闊。本研究以6個蛹蟲草菌株為對象,分別進行了分子鑒定、菌絲體培養(yǎng)特性研究,篩選出了優(yōu)勢菌種;采用正交實驗設(shè)計優(yōu)化得到了蛹蟲草液體菌種最適培養(yǎng)基配方;比較了各菌株栽培過程中生長差異和子實體活性成分,同時研究了各菌株不同生長階段的胞外酶活性變化,從而為蛹蟲草優(yōu)良菌種的選育、培養(yǎng)條件的優(yōu)化及人工規(guī)�；耘嗵峁├碚摵图夹g(shù)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:(1)在6個蛹蟲草菌種種質(zhì)篩選試驗中,首先進行拮抗試驗,發(fā)現(xiàn)這6個菌株兩兩之間、同一菌株之間均存在拮抗現(xiàn)象;通過rDNA的ITS序列鑒定及進化樹分析,鑒定這6個菌株均為蛹蟲草菌,且親緣關(guān)系較近;最適培養(yǎng)條件下,CM3的菌絲生長速度最快,CM8生長速度最慢,但CM5的生長勢最好;菌絲轉(zhuǎn)色培養(yǎng)表明CM4、CM5轉(zhuǎn)色快、顏色深,CM8不轉(zhuǎn)色;液體培養(yǎng)下,脫氫酶活性高的是CM5,最低的是CM8;CM5液體培養(yǎng)菌絲生物量最高,菌絲球大小均勻,密度大。在液體培養(yǎng)出菇試驗中,CM5、CM4轉(zhuǎn)色后顏色橘黃,子座多而長,出草整齊,CM8不轉(zhuǎn)色,不出草。綜合分析得出,這6個供試菌株,CM5、CM4為優(yōu)良菌株,CM1次之,CM3與CM2較差,而CM8為不能出草的退化菌株。(2)篩選出優(yōu)勢種CM5為研究對象,以菌絲生物量為指標(biāo),優(yōu)化液體菌種培養(yǎng)基。結(jié)果表明:最適碳源為蔗糖,最適氮源為酵母粉,最適培養(yǎng)基配方為蔗糖3%、酵母粉1%、KH2PO4 0.2%和MgSO4 0.2%。(3)這6個菌株固體栽培研究和子實體活性成分檢測表明,CM5、CM4菌絲生長快,潔白、濃密,長勢良好,轉(zhuǎn)色快,顏色橘黃,原基分化早,形成子座多,產(chǎn)生的子實體粗細均勻,密度大,子實體頂端呈乳頭狀突起的子囊殼,出草整齊,無污染,生長周期短,商品性狀良好,產(chǎn)量高;CM8不能轉(zhuǎn)色,不出草。5個出草菌株的子實體中蟲草素含量最高的是CM4,最低的為CM2,蟲草酸和蟲草多糖含量最高的均為CM5,最低的均為CM1,此外,在這5個菌株的子實體中均檢測到了多種其他的活性成分。(4)這6個供試菌株的三種酶活性最高的是淀粉酶,其次是蛋白酶,最低的為纖維素酶,轉(zhuǎn)色能力好的菌株的纖維素酶和淀粉酶活性在轉(zhuǎn)色期達到峰值,纖維素酶活與子座的形成正相關(guān);而淀粉酶活性高則會抑制子座的正常分化,并與子實體的生長正相關(guān);在子座形成期,蛋白酶活性高的菌株子座分化更佳,然而在子實體生長時期蛋白酶活性低谷的菌株,產(chǎn)量更高,呈現(xiàn)一定的負(fù)相關(guān)。子實體形態(tài)好、產(chǎn)量高的優(yōu)良菌株CM4、CM5的纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶活性變化規(guī)律完全一致,而不轉(zhuǎn)色不出草的CM8的三種胞外酶的活性變化小,無明顯峰值出現(xiàn)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河南科技學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S567.35

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本文編號：2371577