本文關(guān)鍵詞：內(nèi)生真菌Epichlo? bromicola菌種分離鑒定及其發(fā)酵物對(duì)擬南芥幼苗生長(zhǎng)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《內(nèi)蒙古大學(xué)》 2015年

內(nèi)生真菌Epichlo? bromicola菌種分離鑒定及其發(fā)酵物對(duì)擬南芥幼苗生長(zhǎng)的影響

文先  

【摘要】：Epichloe屬真菌是子囊菌門(mén)(Ascomycota)肉座菌目(Hypocreales)麥角菌科(Clavicipitaceae)的一類(lèi)與冷季型禾草共生的真菌。有研究發(fā)現(xiàn),從Epichloe屬真菌發(fā)酵物中分離所得的化合物主要為生物堿類(lèi)物質(zhì),其提高宿主植物抗蟲(chóng)活性和抗食草動(dòng)物能力。本研究以薏苡內(nèi)生真菌Epichloe屬真菌為研究對(duì)象,通過(guò)分子生物學(xué)方法鑒定其菌種,并分析該菌發(fā)酵物對(duì)擬南芥幼苗生長(zhǎng)的影響,為揭示內(nèi)生真菌影響植物生長(zhǎng)及其機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：1.本研究為了鑒定薏苡(Coix lachryma-jobi L. var. ma-yuen Stapf)內(nèi)生真菌—Epichloe屬的菌種,先提取了DNA并對(duì)其tub2和tef1基因序列進(jìn)行了克隆及系統(tǒng)發(fā)育分析。結(jié)果顯示,該菌株和Epichloe bromicola的親緣關(guān)系最近,且在同一分支上。對(duì)其進(jìn)一步進(jìn)行同源序列比對(duì)分析,發(fā)現(xiàn)克隆所得tef1和tub2基因序列與Epichloe bromicola的tef1和tub2序列相似度分別為98.67%和98.8%。結(jié)合形態(tài)學(xué)分析,推測(cè)本論文所用的菌株為Epichloe bromicola。2.通過(guò)大量發(fā)酵Epichloe bromicola,將所得的發(fā)酵物使用75%乙醇提取,再用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取,各萃取部位適量加到擬南芥幼苗1/2 MS培養(yǎng)基中,統(tǒng)計(jì)對(duì)擬南芥幼苗鮮重、擬南芥幼苗干重、擬南芥幼苗葉片數(shù)、擬南芥幼苗不定根數(shù)和擬南芥幼苗主根長(zhǎng)等5個(gè)生物量的影響。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明,Epichloe bromicola能夠促進(jìn)擬南芥幼苗鮮重、干重、葉片數(shù)和不定根數(shù)等生物量的增加,且這與Epichloe bromicola次生代謝產(chǎn)物有關(guān),具體作用物質(zhì)集中在二氯甲烷部位和乙酸乙酯部位；然而二氯甲烷部位、乙酸乙酯和正丁醇部位樣品抑制擬南芥幼苗主根生長(zhǎng)。3.為了尋找影響擬南芥幼苗生長(zhǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ),通過(guò)UPLC-HRMS法分析促進(jìn)擬南芥幼苗生長(zhǎng)的二氯甲烷和乙酸乙酯部位。結(jié)果發(fā)現(xiàn),二氯甲烷和乙酸乙酯部位樣品中都檢測(cè)到了生長(zhǎng)素吲哚乙酸、吲哚甲醛和吲哚乙醇等物質(zhì),故影響擬南芥幼苗生長(zhǎng)的物質(zhì)有可能是生長(zhǎng)素類(lèi)物質(zhì),后續(xù)還需從生長(zhǎng)素早期應(yīng)答相應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄等方面著手去進(jìn)一步研究闡明其作用機(jī)制。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：Q93;S567.219

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