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毛花獼猴桃根活性部位與活性成分制備及其抗腫瘤活性研究

發(fā)布時間:2018-06-25 08:13

  本文選題:毛花獼猴桃根 + 抗腫瘤活性; 參考:《浙江大學(xué)》2015年碩士論文


【摘要】:毛花獼猴桃(Actinidia eriantha Benth.)又稱白山毛桃、毛冬瓜,為獼猴桃科獼猴桃屬植物。而白山毛桃根是畬族民間治療腫瘤的習(xí)用藥材,廣泛用于胃癌、乳腺癌、食道癌、鼻咽癌和肝癌等的治療,但相關(guān)的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及其作用機(jī)制尚不清楚,本研究旨在發(fā)現(xiàn)毛花獼猴桃根具有抗腫瘤作用的活性部位及成分,并初步探討它們的抗腫瘤機(jī)制。論文首先采用快速層析法將毛花獼猴桃根的乙醇總提物(AE-E)粗分,得到二氯甲烷洗脫物(AE-E/DM)及甲醇洗脫物(AE-E/M)兩個部位;綜合采用硅膠色譜柱層析法及葡聚糖凝膠純化法,分離得到單體化合物(AE-P);采用質(zhì)譜及核磁共振技術(shù)鑒定AE-P的結(jié)構(gòu)為2α,3α,24-三羥基-12-烯-28-烏蘇酸。論文還采用HPLC-PAD法測定了不同批次毛花獼猴桃根藥材及不同提取部位中2α,3α,24-三羥基-12-烯-28-烏蘇酸的含量。論文采用MTT法對毛花獼猴桃根的不同提取、分離部位及化合物2α,3α,24-三羥基-12-烯-28-烏蘇酸進(jìn)行了活性篩選,結(jié)果表明AE-E/DM對人肝癌細(xì)胞株HepG2,人前列腺癌細(xì)胞株pc3,人胃癌細(xì)胞株BGC-823,人結(jié)直腸腺癌sw620的增殖均有顯著地抑制作用,推測其可能為毛花獼猴桃根發(fā)揮抗腫瘤作用的潛在活性部位;2α,3α,24-三羥基-12-烯-28-烏蘇酸亦能顯著地抑制以上四種癌細(xì)胞增殖。論文采用人結(jié)直腸腺癌sw620裸鼠移植瘤模型對2α,3α,24-三羥基-12-烯-28-烏蘇酸的體內(nèi)抗腫瘤活性進(jìn)行了驗證,證實其能劑量依賴性的抑制人結(jié)直腸腺腫瘤的生長,推測其可能為毛花獼猴桃根發(fā)揮抗腫瘤作用的潛在活性成分之一。論文中進(jìn)一步采用AO/EB染色、流式細(xì)胞術(shù)以及western blot技術(shù)初步探討了2α,3α,24-三羥基-12-烯-28-烏蘇酸抗結(jié)直腸腺癌的作用機(jī)制。結(jié)果表明其能引起細(xì)胞凋亡,并伴隨自噬。本研究為揭示毛花獼猴桃根的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)奠定了一定的基礎(chǔ),為其進(jìn)一步在抗腫瘤領(lǐng)域的應(yīng)用提供了初步的科學(xué)數(shù)據(jù)。
[Abstract]:(Actinidia eriantha Benth. of Actinidia chinensis L. It is also called Baishan Maotao, the white winter melon, for the Actinidia family Actinidia plants. Peach root in Baishan Mountain is a folk medicine used in the treatment of cancer of she nationality. It is widely used in the treatment of gastric cancer, breast cancer, esophagus cancer, nasopharyngeal carcinoma and liver cancer. However, the relevant pharmacodynamic material basis and its mechanism of action are still unclear. The aim of this study was to find out the active parts and components of Actinidia deliciosa root with anti-tumor effect and to explore their anti-tumor mechanism. In this paper, the ethanol total extract (AE-E) of Actinidia chinensis root was extracted by rapid chromatography, and two parts of AE-E / M (AE-E / DM) and AE-E / M (AE-E / M) were obtained, and the silica gel chromatographic column chromatography and dextran gel purification were used. The monomer compound (AE-P) was isolated, and the structure of AE-P was identified by mass spectrometry and nuclear magnetic resonance (NMR). HPLC-pad method was also used to determine the content of 2 偽 -trihydroxy-12ene-28-ursolic acid in different batches of Actinidia chinensis root and its extracts. In this paper, MTT method was used to screen the different extraction, isolation site and activity of 2 偽 -trihydroxy-12-ene-28-ursolic acid from Actinidia chinensis root. The results showed that AE-E / DM could significantly inhibit the proliferation of human hepatoma cell line HepG2, human prostate cancer cell line pc3, human gastric cancer cell line BGC-823 and human colorectal adenocarcinoma sw620. The proliferation of these four kinds of cancer cells was also significantly inhibited by 2 偽 -trihydroxy-12en-28-ursolic acid. The in vivo antitumor activity of 2 偽 -3 偽 -trihydroxy-12-ene-28-ursolic acid was tested in nude mice with human colorectal adenocarcinoma (sw620). It was proved that it could inhibit the growth of human colorectal adenoma in a dose-dependent manner. It is speculated that it may be one of the potential active components of Actinidia chinensis root to play an anti-tumor effect. In this paper, AO-EB staining, flow cytometry and western blot technique were used to investigate the mechanism of anti-colorectal adenocarcinoma. The results showed that it could induce apoptosis, accompanied by autophagy. This study has laid a certain foundation for revealing the substance basis of medicinal effect of Actinidia chinensis root, and provided preliminary scientific data for its further application in the field of anti-tumor.
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:S663.4

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本文編號:2065264

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