本文選題：豬 + 皮質(zhì)醇　； 參考：《華中農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：應(yīng)激反應(yīng)與動(dòng)物肉質(zhì)性狀緊密相連。皮質(zhì)醇是引起動(dòng)物應(yīng)激反應(yīng)的重要激素,通常由下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)軸分泌,目前關(guān)于皮質(zhì)醇是如何影響肉質(zhì)以及通過何種方式導(dǎo)致肉質(zhì)發(fā)生變化并不完全清楚。因此,本試驗(yàn)通過建立應(yīng)激模型,研究應(yīng)激后皮質(zhì)醇對(duì)豬肉質(zhì)以及血液的生化指標(biāo)的影響,闡述皮質(zhì)醇影響肉質(zhì)的內(nèi)在分子調(diào)控機(jī)制。本研究不僅發(fā)現(xiàn)了影響肉質(zhì)劣變的重要基因和調(diào)控網(wǎng)絡(luò),而且為選育抗應(yīng)激和高品質(zhì)的肉質(zhì)豬提供了一定的理論依據(jù),主要的研究結(jié)果如下:1.皮質(zhì)醇影響肉質(zhì)指標(biāo)和血液指標(biāo)皮質(zhì)醇組仔豬飼喂含氫化可的松(天然皮質(zhì)醇的類似物)的日糧,屠宰后檢測(cè)所有受試豬背最長(zhǎng)肌和血液相關(guān)指標(biāo)。與對(duì)照組相比,皮質(zhì)醇組仔豬增重率顯著下降大約3.4倍,皮質(zhì)醇組1 h肉色明顯上升,24 h肉色值略高于對(duì)照組,僅增加了7%;24 h滴水損失有大幅度的下降,降低了63%;與肉質(zhì)性狀相關(guān)聯(lián)的蛋白如CAST、calpain1、calpain2和ATF4表達(dá)水平都有明顯的上升,Desmin、Myo D1和IGF-1的表達(dá)水平要顯著下降。血清中皮質(zhì)醇含量明顯高于對(duì)照組,升高了大約4.8倍,而肌酸激酶的含量受到了顯著抑制作用,下降了大約2.6倍。2.皮質(zhì)醇引起肌肉組織損傷和肌細(xì)胞凋亡運(yùn)用HE和TUNEL方法檢測(cè)和驗(yàn)證了豬肌肉組織受損情況和細(xì)胞凋亡情況,分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),皮質(zhì)醇組仔豬背最長(zhǎng)肌肌肉組織受損嚴(yán)重,肌纖維間隙增大,凋亡細(xì)胞數(shù)增多,肌束比率和細(xì)胞凋亡率極顯著上升,凋亡率升高大約3.7倍。3.皮質(zhì)醇影響鈣離子通道相關(guān)基因和細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的表達(dá)定量PCR檢測(cè)鈣離子通道和細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的表達(dá)水平,結(jié)果表明皮質(zhì)醇可誘導(dǎo)鈣離子通道基因(SERCA1、IP3R1)和細(xì)胞凋亡基因(Bcl-2、BAX、Caspase-3)的上調(diào)表達(dá),導(dǎo)致骨骼肌細(xì)胞凋亡,推測(cè)這些基因可能在皮質(zhì)醇影響肉質(zhì)的分子機(jī)制中扮演重要角色。4.皮質(zhì)醇誘導(dǎo)差異表達(dá)基因的表達(dá)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果表明TLR3和IL-1RAP在皮質(zhì)醇組中上調(diào)表達(dá)并且富集得分較高。通過免疫組化和Western blot的試驗(yàn)證實(shí)皮質(zhì)醇組TLR3和IL-1RAP的蛋白表達(dá)水平遠(yuǎn)高于對(duì)照組。測(cè)序結(jié)果篩選出223個(gè)差異表達(dá)基因其中包括80個(gè)上調(diào)差異表達(dá)基因,143個(gè)下調(diào)差異表達(dá)基因。有204個(gè)差異基因富集到GO條目,140個(gè)差異基因被注釋到KEGG代謝通路。發(fā)現(xiàn)大量差異表達(dá)基因如TLR3、IL-1RAP、TGFβ1、CCL2、SPP1、GPX2、CD3ε、CCR5、ATF3和STC1介入炎癥反應(yīng)、防御反應(yīng)和損傷應(yīng)答的過程。這些差異表達(dá)基因可能在皮質(zhì)醇影響肉質(zhì)下降的機(jī)制中發(fā)揮一定的作用。本研究結(jié)論是:1.本試驗(yàn)篩選出大量的差異表達(dá)基因,其中有部分差異表達(dá)基因如TLR3、IL-1RAP、TGFβ1、CCL2、SPP1、GPX2、CD3ε、CCR5、ATF3和STC1等參與鈣離子通道和細(xì)胞凋亡的調(diào)控過程,這些基因可能受到皮質(zhì)醇的調(diào)控作用。2.皮質(zhì)醇可能通過影響TLR3和IL-1RAP的表達(dá)活化轉(zhuǎn)錄因子NF-κB,從而引起骨骼肌細(xì)胞的凋亡。并且NF-κB也可以作用于如Caspase-3、Bcl-2和BAX等與鈣離子通道和細(xì)胞凋亡相關(guān)基因來引起細(xì)胞凋亡導(dǎo)致肌肉的理化性質(zhì)改變,最終導(dǎo)致肉質(zhì)改變。
[Abstract]:The effects of cortisol on meat quality and blood biochemical indexes were studied by means of HE and TUNEL methods . The results were as follows : 1 . A large number of differentially expressed genes , such as TLR3 , IL - 1RAP , TGF 尾1 , CCL2 , SPP1 , GPX2 , CD3 蔚 , CCR5 , ATF3 and STC1 , were involved in inflammatory reaction , defense response and injury response .
【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S828

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1 萬學(xué)斌;基于轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)分析皮質(zhì)醇對(duì)豬肉質(zhì)的影響[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

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本文編號(hào)：1984413