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牛樟芝人工培養(yǎng)工藝及三萜類成分產(chǎn)生規(guī)律的研究

發(fā)布時間:2018-05-19 21:16

  本文選題:牛樟芝 + 菌絲體 ; 參考:《魯東大學》2017年碩士論文


【摘要】:牛樟芝,又名牛樟菇,只生長在臺灣高山林區(qū)的珍稀食藥用真菌。三萜類物質(zhì)是其主要的活性物質(zhì)之一。目前,人工牛樟芝子實體培育難和液體發(fā)酵三萜類物質(zhì)產(chǎn)量低的問題仍是困擾研究者的主要問題。本論文對牛樟芝菌絲體的固體和液體培養(yǎng)特性進行研究,并以總三萜含量為主要目標,對液態(tài)發(fā)酵的條件和液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基進行了優(yōu)化;利用不同段木栽培牛樟芝;對牛樟芝菌絲固體培養(yǎng)的三萜類物質(zhì)產(chǎn)生的規(guī)律進行了分析,添加不同種類中藥提取物來提高牛樟芝液體發(fā)酵產(chǎn)三萜類物質(zhì)含量。研究了牛樟芝的固體培養(yǎng)特性,采用不同固體培養(yǎng)基對牛樟芝進行培養(yǎng),觀察牛樟芝菌絲體的生長狀況,對牛樟芝菌絲體的特點進行研究,并測定三萜物質(zhì)在牛樟芝菌絲中的含量。在不同的固體瓊脂培養(yǎng)基上牛樟芝菌絲體生長狀況都呈現(xiàn)良好的狀態(tài),速度差別大,菌絲體的形態(tài)有較大的不同。胡蘿卜培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基和麥麩培養(yǎng)基比較適合于牛樟芝的生長。在GPY和胡蘿卜培養(yǎng)基中總三萜含量是最高的。牛樟芝菌絲體在所試碳源配制成的培養(yǎng)基中都可以生長,在所實驗的碳源中,以果糖、木糖醇、麥芽糖、甘露糖、木糖、葡萄糖為碳源時,牛樟芝菌絲生長狀況較好,但是在葡萄糖為碳源時樟芝菌絲體總三萜含量高,麥芽糖和甘露糖作為碳源,總三萜含量也相對較高。除了以尿素為氮源未見到肉眼可辨的生長外,牛樟芝在不同所試氮源配制成的培養(yǎng)基中生長速度和菌絲形態(tài)有較大差別,牛樟芝菌絲體在以魚蛋白胨和硫酸銨為氮源時總三萜含量較高。研究了牛樟芝的液體培養(yǎng)特性,采用不同的液體培養(yǎng)基對牛樟芝進行培養(yǎng),觀察其對牛樟芝菌絲的生長和總三萜含量的影響。以牛樟芝菌絲體總三萜含量為目標,通過單個因子對牛樟芝液體發(fā)酵的影響實驗,從而得到牛樟芝菌絲生長所需適宜培養(yǎng)條件,得到的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)時間20天,初始pH4,瓶裝量150mL,轉速120rpm。在搖瓶培養(yǎng)的基礎上,通過單因素實驗篩選出牛樟芝液體發(fā)酵的最佳碳源、氮源和生長因子,最適培養(yǎng)基配方:碳源為木糖,氮源為硝酸鈉,生長因子為玉米漿。研究了牛樟芝子實體的培養(yǎng)工藝,將老齡的蘋果木、梨木、板栗木、柞木鋸成一定長度的木樁,將鋸好的木樁在水中浸泡10天,接種牛樟芝,進行營養(yǎng)生長管理和生殖生長管理,最終在廢棄的老齡蘋果木上長出了牛樟芝的子實體。然后進行子實體的中試生產(chǎn)實驗。在50L的種子罐中投料30L,置于28℃下培養(yǎng)3到5天。將液體種子接到蘋果木、梨木、板栗木、柞木段木培養(yǎng)基上,進行營養(yǎng)生長管理和生殖生長管理,最終在老齡蘋果木上長出了牛樟芝的子實體。研究了牛樟芝菌絲不同培養(yǎng)時期體內(nèi)三萜類物質(zhì)的性質(zhì)和含量。采用不同固體培養(yǎng)基對牛樟芝進行培養(yǎng),觀察牛樟芝菌絲體的生長狀況,測定不同時期牛樟芝菌絲體中總三萜的含量以及變化規(guī)律,利用高效液相色譜法對物質(zhì)種類進行初步分析,并對其三萜類成分在不同培養(yǎng)基不同培養(yǎng)時期的變化規(guī)律進行了探討。結果表明:牛樟芝在六種培養(yǎng)基上培養(yǎng)兩個月,菌絲體中總三萜含量除了在胡蘿卜培養(yǎng)基50天至60天時出現(xiàn)下降以外,在其他五種培養(yǎng)基上基本都會出現(xiàn)呈上升的趨勢。三萜類物質(zhì)的種類和含量在同一培養(yǎng)基的不同時期以及不同培養(yǎng)基的同一時期都呈現(xiàn)出一定的規(guī)律性和差異性。研究了不同中藥醇提或水提物對牛樟芝在液體培養(yǎng)中生物量和三萜類物質(zhì)含量的影響。將不同中藥的水提物和醇提物分別加入到發(fā)酵基礎培養(yǎng)基中,培養(yǎng)20天后測定牛樟芝菌絲體生物量和三萜含量。結果表明,薏苡仁水提物添加濃度在0.6%時,對牛樟芝生長有抑制作用,但是在加入其它水提物的情況下都會對其生長有不同程度的促進。枸杞水提物對三萜類物質(zhì)含量和牛樟芝生長也均有促進作用。高濃度陳皮和當歸醇提物對牛樟芝菌絲生長和三萜物質(zhì)的提高會起到明顯的抑制作用。連翹醇提物對三萜類物質(zhì)含量的促進作用最明顯。
[Abstract]:This paper studied the solid and liquid culture characteristics of Antrodia cinnamomea mycelia . The effects of different traditional Chinese medicines on the growth and growth of Antrodia camphora were studied .
【學位授予單位】:魯東大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:S646

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1 王升杴;林,

本文編號:1911718


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