本文關鍵詞：二氯喹啉酸降解菌篩選、鑒定和應用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《中國農(nóng)業(yè)科學院》 2015年

二氯喹啉酸降解菌篩選、鑒定和應用研究

張順  

【摘要】：二氯喹啉酸(quinclorac)作為激素類除草劑,在稻田稗草防治過程中得到廣泛應用,但由于其半衰期長,在稻田自然環(huán)境中降解緩慢,連年積累使下茬煙草葉片產(chǎn)生泡狀斑、向背面卷曲,嚴重者葉片革質(zhì)呈長條狀,失去使用價值和經(jīng)濟價值,給煙葉生產(chǎn)帶來嚴重影響。為解決二氯喹啉酸殘留污染造成的藥害問題,本研究進行了二氯喹啉酸降解菌的篩選、鑒定和應用研究,主要研究內(nèi)容如下:(1)我們從常年施用二氯喹啉酸的稻田土壤取樣,對土壤樣品進行馴化、富集培養(yǎng)和篩選培養(yǎng),初步挑選到12株長勢良好具有二氯喹啉酸降解潛力的菌株,并編號保存。將初步篩選到的12株菌株接種到二氯喹啉酸無機鹽培養(yǎng)基中,在28℃、150 rpm搖床上培養(yǎng)7 d,用高效液相色譜儀(HPLC)檢測二氯喹啉酸殘留量并計算降解率,其中降解菌MC-10降解率可達90%,作為進一步研究對象。(2)我們通過菌落形態(tài)學觀察、電子顯微鏡菌體形態(tài)觀察、生理生化試驗鑒定初步確定降解菌MC-10屬于節(jié)桿菌屬。為進一步確定其種屬,我們提取了降解菌MC-10 DNA,對其16S rDNA進行測序與NCBI數(shù)據(jù)庫中序列比對,構建系統(tǒng)發(fā)育樹最終確定其為節(jié)桿屬菌(Arthrobacter sp.)。(3)通過梯度對比試驗確定降解菌MC-10最佳降解條件為30℃、pH=7,接種量為5%時,對二氯喹啉酸濃度在1 mg/kg-100 mg/kg之間7 d降解率均能達到60%以上,能較好適應外界環(huán)境變化,具有移植到田間降解土壤中殘留二氯喹啉酸的潛力。(4)通過活菌菌落計數(shù)法調(diào)查接種到土壤中的降解菌MC-10數(shù)量變化,降解菌MC-10在土壤中含量隨時間推移逐漸減少,在30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)50 d后降解菌在土壤中含量穩(wěn)定在106 cfu/g,表明降解菌MC-10能夠在土壤中較好定殖。(5)將降解菌MC-10接種到10 mg/kg二氯喹啉酸毒土中,在30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7 d后,通過高效液相色譜法測定土壤中殘留二氯喹啉酸含量為1.76 mg/kg,7 d有效降解率可達70%。(6)為了解降解菌MC-10對煙草藥害緩解作用,在溫室進行盆栽試驗,調(diào)查結果表明在煙苗移栽前30 d接種降解菌MC-10處理組能夠有效緩解二氯喹啉酸藥害,移栽后60 d藥害緩解率可達80%以上;移栽后再將降解菌MC-10接種到土壤中的處理,在一定程度能夠緩解二氯喹啉酸藥害,降低二氯喹啉酸藥害抑制率,移栽后60 d藥害緩解率在40%左右,因此我們應當在煙草移栽前進行土壤處理以最大限度減輕二氯喹啉酸殘留對煙草生長的影響。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：X172;S482.4
【目錄】：

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