本文關(guān)鍵詞： 蒙藥當(dāng)歸四味散 乳酸鏈球菌素 大鼠子宮內(nèi)膜炎 大腸桿菌 金黃色葡萄球菌 抗菌機(jī)理 結(jié)腸炎　出處：《內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：本文旨在通過分離鑒定出患牛的主要致病菌大腸桿菌(Escherichiacoli,E.coli)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)來建立大鼠子宮內(nèi)膜炎模型,并研究了蒙藥當(dāng)歸四味散(簡稱當(dāng)歸四味散)和乳酸鏈球菌素(nisin)對病原菌的抑菌作用機(jī)理及其對模型大鼠子宮內(nèi)膜炎的抗炎作用機(jī)制,以及子宮內(nèi)膜炎誘導(dǎo)大鼠結(jié)腸炎癥的關(guān)系做了詳細(xì)研究。研究分為4個(gè)試驗(yàn):試驗(yàn)1、對65頭確診為臨床型子宮內(nèi)膜炎荷斯坦奶牛采用棉拭子法采集子宮黏液;采用大鼠子宮灌注法對分離株進(jìn)行致病性試驗(yàn)、PCR方法鑒定毒力基因以及藥敏紙片法檢驗(yàn)分離株的耐藥情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn):從患子宮內(nèi)膜炎母牛子宮內(nèi)采集內(nèi)容物中最終分離鑒定出27株致病性E.coli和32株S.aures;并進(jìn)行PCR毒力基因檢測,其檢出率為;yjaAKpsMIIhlyAsfasirp2;而ChuA、PapC未被檢出;對分離鑒定、純化的32株致病性S.aureus進(jìn)行毒力基因檢測,發(fā)現(xiàn)毒力基因的檢出率從高到低:TSST-1ermAermCBlazSEB;而尚未檢測出etb、SEJ和SEE毒力基因;同時(shí),對致病性E.coli和S.aireus進(jìn)行耐藥性分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)這2種菌對青霉素、多西環(huán)素、多粘菌素B、阿莫西林和四環(huán)素等具有較高的耐藥性。試驗(yàn)2、分別采用酶標(biāo)比濁法、試劑盒法和鄰硝基苯B-D-半乳吡喃糖苷(ONPG)法研究當(dāng)歸四味散和nisin對致病菌E.coli和S.aureus生長曲線、膜電位、內(nèi)容物、細(xì)胞壁及細(xì)胞膜滲透性的影響。①當(dāng)歸四味散對致病性E.coli和S.aures.均具有抗菌作用,而nisin對致病性E.coli無抑菌效果,只對致病性S.aureus.具有抑菌效果。試驗(yàn)3、采用人工陰門灌注法制備大鼠子宮內(nèi)膜炎模型,選取70只SD大鼠,隨機(jī)分為陰性對照組(生理鹽水20 g/kg·b·w)、陽性對照組(0.13 g/kg環(huán)丙沙星)、模型組、nisin組(0.1 mg/mL)、當(dāng)歸四味散低(0.25 g/kg(b·w))、中(0.5 g/kg(b·w))、高(1 g/kg(b·w))劑量組,以上各用藥組分別連續(xù)灌服7天(2次/天),并在第5天末次給藥1 h后采集試驗(yàn)樣品,解剖后子宮充血、腫大、增厚及子宮內(nèi)部有蓄膿現(xiàn)象。麻醉后眼眶采血離心分離血清,利用ELISA試劑盒法來測定血清中以下指標(biāo):①與陰性對照組相比,當(dāng)歸四味散中、高劑量組、nisin組及陽性對照組使雌二醇(17 β-Estradiol)、孕酮(progesterone,P4)和催產(chǎn)素(oxytocin,OXT)的濃度增加,模型組逐漸降低。當(dāng)歸四味散高劑量組、nisin及陽性對照組中IL-6、IL-10、CINC-1、TNF-α和環(huán)氧化酶-2(cyclooxygenase,C0X-2)的濃度顯著低于模型組和陰性組(P0.05)。④在0～72 h之間,模型組中,MMP-9和TIMP-1的質(zhì)量濃度顯著低于生理鹽水組(P0.05),2)nisin和高劑量當(dāng)歸四味散組中MMP-9、TIMP-1、MMP-2和TIMP-2的質(zhì)量濃度均顯著高于生理鹽水組(P0.05),其中以nisin組和高劑量當(dāng)歸四味散效果最佳。試驗(yàn)4、研究了子宮內(nèi)膜炎導(dǎo)致結(jié)腸炎癥的作用機(jī)制,并取其子宮和結(jié)腸組織做勻漿,ELISA法檢測相關(guān)因子,試驗(yàn)表明,①建模72 h后,nisin組、當(dāng)歸四味散低、中、高劑量組以及陽性對照組對大鼠子宮組織勻漿中MP0、TXB2和OXT的濃度均顯著高于模型組(P0.05),并且降低6-K-PGF1α的濃度,維持PGI2/TXA2比值平衡,從而起到止血不留瘀,②通過對結(jié)腸組織中炎癥因子的檢測發(fā)現(xiàn),患子宮內(nèi)膜炎大鼠對結(jié)腸造成局部的炎癥。通過ELISA法檢測結(jié)腸組織勻漿中TNF-α、IL-1 β、IL-6、IL-8和IL-10的濃度,建模72 h后,當(dāng)歸四味散高劑量組和陽性對照組中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的濃度顯著低于陰性對照組(P0.05),模型組72 h持續(xù)升高。當(dāng)歸四味散高劑量組、nisin組與陽性對照組中IL-2和IFN-γ的濃度顯著高于其他各組(P0.05),其中以當(dāng)歸四味散高劑量組和陽性對照組效果最佳。結(jié)論:nisin及中、高劑量當(dāng)歸四味散可調(diào)高大鼠血清中17-Estradiol、P4、OXT、IL-6、IL-10、CINC-1、TNF-α、COX-2、MMP-9、TIMP-1 和 MMP-2、TIMP-2和子宮組織勻漿中MPO、OXT、TXB2及 6-K-PGF1。的濃度,降低結(jié)腸組織中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-2 和 IFN-γ的表達(dá)量。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S858.23

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1550470