本文關(guān)鍵詞： 雞 禽腺病毒 病毒分離鑒定 免疫原性　出處：《內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】："心包積液肝炎綜合征"(hydropericardium-hepatitis syndrome,HHS)是由禽腺病毒4型引起的一種以雞的心包積液和包涵體肝炎為特征的疾病。自2015年7月我國多個省相繼暴發(fā)了該病,且多個品種雞都易感。本研究應(yīng)用ELISA檢測病雞血清抗體、PCR擴(kuò)增病毒的hexon基因、病料接種SPF雞胚卵黃囊分離病毒、動物回歸實(shí)驗(yàn)、滅活病毒免疫試驗(yàn)等方法對該病進(jìn)行臨床調(diào)查、病毒的分離鑒定、毒株免疫原性研究,結(jié)果表明:(1)5個發(fā)病雞場均有禽腺病毒感染,PCR擴(kuò)增出了 4個大小為2819bp左右的目的基因,4個毒株同源性較高,均屬于禽腺病毒4型;(2)從一個雞場的病料接種雞胚分離到一株無血凝性的病毒毒株,該毒株回歸動物復(fù)制出了與該病相同的臨床癥狀,在電鏡下觀察到肝細(xì)胞中有典型的腺病毒粒子。分離到的毒株通過卵黃囊、絨毛尿囊膜和尿囊腔三個途徑感染雞胚,發(fā)現(xiàn)通過絨毛尿囊膜感染雞胚最適合病毒的增值,用該途徑分離的毒株ELD50為105.1/0.1mL,該毒株能夠使LMH細(xì)胞產(chǎn)生明顯病變:(3)毒株感染34dSPF雞第3d開始出現(xiàn)臨床癥狀,4d～6d為死亡高峰期,第7d后病雞開始恢復(fù),發(fā)病率為75%,死亡率為67.86%。雞感染病毒后第6d開始出現(xiàn)血清抗體,第10d抗體水平達(dá)到峰值。發(fā)病雞眼觀病變主要出現(xiàn)在肝臟,尤其是感染后第5d病變最嚴(yán)重,病理組織學(xué)檢查見肝細(xì)胞核內(nèi)有嗜酸性和嗜堿性的包涵體。免疫組織化學(xué)染色顯示,病毒抗原主要分布在肝細(xì)胞、脾臟的網(wǎng)狀細(xì)胞和腎臟的腎小管上皮細(xì)胞中;(4)分離毒株滅活后分0.2mL/只、0.3mL/只、0.5mL/只和1mL/只四個不同劑量免疫21d SPF雞,32d后攻毒,攻毒后對照雞80%死亡,免疫組100%存活。結(jié)論:調(diào)查的5個發(fā)病雞場均感染了 FAdV,用其中一個發(fā)病雞場的病料分離到一株FAdV 4型的強(qiáng)毒力毒株,該毒株滅活后免疫雞群,對雞有良好的保護(hù)效果。
[Abstract]:Hydropericardium-hepatitis syndrome (HHSS) is a disease caused by avian adenovirus type 4, characterized by pericardial effusion and inclusion body hepatitis in chickens. In this study, the hexon gene of the virus was amplified by ELISA in serum of infected chicken. The virus was isolated from yolk sac of chicken embryo inoculated with SPF, the animal regression test and the immunoassay of inactivated virus were used to investigate the disease. The isolation and identification of the virus and the study of the immunogenicity of the virus strains showed that the four target genes of about 2819 BP in size were amplified by PCR from all the 5 infected chicken farms, and the four strains had high homology. Both belong to Avian adenovirus type 4 (AAV4) A virus strain without hemagglutination was isolated from chicken embryo inoculated in a chicken farm, and the virus returned to animal to replicate the same clinical symptoms as the disease. Typical adenovirus particles were observed in hepatocytes under electron microscope. The virus strains were infected by yolk sac, chorioallantoic membrane and allantoic cavity. The virus strain ELD50 isolated by this route was 105.1 / 0.1 mL. The strain could cause obvious pathological changes in LMH cells. The virus strain infected with LMH strain on the third day of infection began to appear clinical symptoms on the 3rd day. The peak of death was 4 days after infection, and the sick chicken began to recover after 7 days. The morbidity was 75 and the mortality was 67.86.The antibody level of serum began to appear at the 6th day after infection, and the antibody level reached the peak on the 10th day. The pathological changes in the eyes of the affected chicken mainly occurred in the liver, especially on the 5th day after infection. Histopathological examination showed that there were eosinophilic and basophilic inclusion bodies in the nucleus of the liver. Spleen reticular cells and renal tubular epithelial cells were inactivated. After inactivation, the virus strains were divided into 0. 2 mL / 0. 3 mL / L and 1 mL / 4 different doses immunized with different doses for 21 d SPF chickens for 32 days, and then the control chickens died after attack. Conclusion: five infected chicken farms were infected with FAdV. A virulent strain of FAdV 4 was isolated from one of the infected chicken farms. After inactivation of the virus strain, the chickens were immunized with a good protective effect.
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S852.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1500648