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短喙—侏儒綜合征病鴨體內(nèi)鴨圓環(huán)病毒的檢測(cè)及全基因序列分析

發(fā)布時(shí)間:2018-02-01 19:56

  本文關(guān)鍵詞: 鴨圓環(huán)病毒 短喙-侏儒綜合征 PCR檢測(cè) 全基因組序列 出處:《山東農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


【摘要】:自2014年下半年以來(lái),山東、安徽、江蘇等地的櫻桃谷鴨流行一種以大舌、短喙、生長(zhǎng)障礙為主要特征的新發(fā)疾病,該病主要引起雛鴨上下喙萎縮變短,舌頭外伸、腫脹,感染后期脛骨和翅骨易發(fā)生骨折,體重明顯低于健康鴨只,導(dǎo)致出欄合格率下降,造成較大的經(jīng)濟(jì)損失,經(jīng)陳少鶯等人的分離鑒定,確定該病病原為一種新型小鵝瘟病毒(NGPV)或GPV變異株。在用NGPV陽(yáng)性樣品感染鴨只時(shí),僅有少數(shù)鴨只可以復(fù)制出與自然病例類似的短喙癥狀,實(shí)驗(yàn)室造病率較低,因此該病的發(fā)生絕不僅僅是NGPV單獨(dú)造成的,還有其他致病因素參與其中,因本病有著與家禽圓環(huán)病毒相似的臨床癥狀,如鸚鵡喙羽病病毒常常導(dǎo)致患病的鸚鵡出現(xiàn)鳥喙變形、嚴(yán)重脫毛及體重減輕,鵝的圓環(huán)病毒引起機(jī)體的矮小綜合征,并且Du CV的免疫抑制使其與其他疾病具有較高的混合感染率,因此我們懷疑短喙-侏儒綜合征病鴨體內(nèi)協(xié)同感染了鴨圓環(huán)病毒。為了解鴨圓環(huán)病毒在短喙侏儒綜合征發(fā)病鴨群中的流行變異情況以及危害程度,明確發(fā)病鴨群的的鴨圓環(huán)基因型及序列,為疾病的防治提供依據(jù),本實(shí)驗(yàn)將完成以下研究?jī)?nèi)容。1.短喙侏儒綜合征發(fā)病鴨群中鴨圓環(huán)病毒的檢測(cè)本試驗(yàn)從山東、江蘇、安徽等地的24個(gè)鴨群的147只病死鴨中采取了心、肝、脾、肺、腎等8個(gè)組織器官,采用常規(guī)PCR方法對(duì)其進(jìn)行圓環(huán)病毒的檢測(cè),結(jié)果顯示,Du CV陽(yáng)性個(gè)體感染率達(dá)53.06%(78/147),群體感染率為83.3%(20/24),對(duì)79只具有典型大舌短喙特征的鴨子進(jìn)行了Du CV和NGPV的共感染檢測(cè),Du CV與NGPV的混合感染率為53.16%(42/79)。2.鴨圓環(huán)病毒的全基因測(cè)序及序列分析篩選部分陽(yáng)性樣品進(jìn)行全基因組擴(kuò)增共獲得4個(gè)全基因組序列,其中兩株基因組大小為1993nt,另兩株為1995nt,與已報(bào)道的其他毒株基因組大小一致。基因組內(nèi)包含3個(gè)主要的閱讀框,V1/rep、C1/cap和C2/ORF3,所得到4個(gè)毒株在上述編碼區(qū)均沒(méi)有插入或缺失現(xiàn)象存在。根據(jù)全基因序列以及兩個(gè)主要病毒蛋白核苷酸序列繪制的進(jìn)化樹也一致顯示所得的4株序列為基因1型。
[Abstract]:Since the second half of 2014, Cherry Valley Ducks in Shandong, Anhui and Jiangsu provinces have developed a new disease characterized by large tongue, short beak and growth disorder. Tongue extension, swelling, tibia and wing bones are prone to fracture at the later stage of infection, weight is significantly lower than the healthy duck, resulting in a decline in the qualification rate, resulting in greater economic losses, identified by Chen Shaoying and others. When infected with NGPV positive samples, only a few ducks could replicate short-beak symptoms similar to those of natural cases. Laboratory disease rate is low, so the occurrence of the disease is not only caused by NGPV alone, there are other pathogenic factors involved, because this disease has similar clinical symptoms as poultry circovirus. Such as parrot beak feather virus often lead to sick parrot beak deformation, severe hair loss and weight loss, goose circovirus caused the body's dwarf syndrome. And the immunosuppression of du CV makes it have a high mixed infection rate with other diseases. Therefore, we suspect that the duck circovirus was co-infected with the short-beaked dwarf syndrome duck. In order to understand the prevalence of duck circovirus in the short-beaked dwarf syndrome infected ducks and the degree of harm. In order to provide basis for prevention and treatment of the disease, the genotype and sequence of duck ring were identified. Detection of Duck circovirus in Ducks with short beak dwarf syndrome. 147 dead ducks from 24 ducks in Shandong, Jiangsu and Anhui provinces were selected in this experiment. Liver, spleen, lung, kidney and other eight tissues and organs were detected by conventional PCR method. The results showed that the infection rate of DuCV positive individuals was 53.0678 / 147). The coinfection rate of du CV and NGPV was detected in 79 ducks with typical large tongue and short beak. The mixed infection rate of du CV and NGPV was 53.16% and 42 / 79). 2. The whole gene sequencing and sequence analysis of duck circovirus were used to amplify the whole genome of duck circovirus. The genome size of two strains was 1993ntand the other two were 1995nt, which were the same as those of other virulent strains reported. The genome contained three main reading frames V1 / rep. C1 / cap and C2 / ORF3. None of the 4 strains were inserted or deleted in the coding region. The phylogenetic tree drawn from the whole gene sequence and the nucleotide sequences of the two main viral proteins also showed that the 4 strains were gene 1. Type.
【學(xué)位授予單位】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:S858.32

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1482746

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