蔗糖、乳糖對豬精液低溫(4℃)及冷凍保存的影響
發(fā)布時(shí)間:2018-01-05 13:24
本文關(guān)鍵詞:蔗糖、乳糖對豬精液低溫(4℃)及冷凍保存的影響 出處:《沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:由于常溫保存的豬精液人工輸精后受胎率和窩產(chǎn)仔數(shù)接近自然配種,所以至今為止常溫保存精液在豬人工授精中應(yīng)用最為普遍,但其應(yīng)用受時(shí)間和公豬年齡限制,不利于育種和品種改良。豬精液低溫及冷凍保存能克服常溫保存的弱點(diǎn),但人工輸精后受胎率和窩產(chǎn)仔數(shù)都不太理想。其主要原因在于低溫及冷凍保存后精子的品質(zhì)降低,而保存精子品質(zhì)受諸多因素的影響。因此,本試驗(yàn)研究了稀釋液配方、新鮮精液運(yùn)輸過程、稀釋方法、降溫方式等對豬精液低溫(4℃)保存的影響。在此基礎(chǔ)上,繼續(xù)探討了冷凍稀釋液配方、平衡時(shí)間及冷凍工藝等諸多因素對豬精液冷凍保存的影響。其試驗(yàn)結(jié)果如下:1.人工采精后,將盛裝精液的塑料瓶用毛巾包裹后放入泡沫箱運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室,其精子活率顯著高于其他各組(P0.05)。將鮮精與BF5稀釋液按1:2比例稀釋,用4層毛巾包裹法降溫至4℃,在此溫度下精子的有效存保存時(shí)間達(dá)5d,此時(shí)精子的活率、質(zhì)膜完整率和頂體完整率分別為47.25%、49.05%和55.03%,顯著高于其他各組(P0.05)。2.用SGY、LGY及BF5三個(gè)配方低溫(4℃)保存豬精液,保存的第2 d至第7 d為止BF5組的精子活率顯著高于LGY組(P0.05),但與SGY組基本上無顯著差異(P0.05)。當(dāng)SGY和LGY稀釋液中添加不同濃度EDTANa2時(shí),從保存的開始至第4d SGY+0.05%EDTANa2組的精子活率、質(zhì)膜完整率和頂體完整率均顯著高于0.0%組、0.15%組、0.25%組及BF5組。SGY+0.05%EDTANa2組的精子有效保存7 d,此時(shí)精子的活率和質(zhì)膜完整率最高,分別為42.53%和43.11%。3.用 SGYG、LGYG、BF5G、SGYGO、LGYGO、BF5GO 六個(gè)配方冷凍豬精液,冷凍解凍后精子各項(xiàng)指標(biāo),冷凍保存液中同時(shí)添加甘油和OEP組顯著高于相對應(yīng)只添加甘油組(P0.05);LGYGO組冷凍保存的精子活率、質(zhì)膜完整率和頂體完整率(30.22%、34.28%和 39.41%)顯著高于 SGYGO 組和 BF5GO 組(P0.05)。4.LGYGO中甘油的濃度調(diào)整為4.5%時(shí),冷凍解凍后精子的活率、質(zhì)膜完整率和頂體完整率顯著高于3.0%組、3.75%組及5.25%組(P0.05)。4.5%組精子活率、質(zhì)膜完整率和頂體完整率分別為38.98%、41.93%和45.28%。5.LGYGO中OEP的濃度調(diào)整為0.75%時(shí),冷凍解凍后精子的活率、質(zhì)膜完整率和頂體完整率分別為40.51%、43.87%和49.01%,均顯著高于0.5%組、1.0%組及1.25%組(P0.05)。6.LGYGO中乳糖的濃度調(diào)整為3.5%時(shí),冷凍解凍后精子品質(zhì)的3項(xiàng)指標(biāo)均顯著高于7.0%組和11.0%組(P0.05),3.5%組的精子活率、質(zhì)膜完整率和頂體完整率分別為38.86%、43.82%和 47.72%。7.冷凍前精液平衡分別設(shè)定為0h、1h、2h及3 h時(shí),冷凍解凍后精子的各項(xiàng)指標(biāo)1 h組和2 h組均顯著高于0 h組和3 h組(P0.05),但1 h組與2 h組間差異不顯著(P0.05)。平衡2 h后冷凍解凍的精子活率、質(zhì)膜完整率和頂體完整率分別為39.06%、46.18%和 48.78%。8.冷凍的精液用38℃孵育20 s組的方法解凍,其精子活率、質(zhì)膜完整率和頂體完整率顯著高于45℃孵育20 s組和70℃孵育5 s組(P0.05)9.平衡后精液置于3 cm處熏蒸冷凍,解凍后精子活率、質(zhì)膜完整率和頂體完整率,分別為43.09%、46.79%和47.92%,均顯著高于5 cm組和8 cm組(P0.05)。10.將平衡后的精液在距液氮面3 cm處熏蒸冷凍,解凍后精子的各項(xiàng)指標(biāo),熏蒸9 min組和11 min組顯著高于熏蒸7 min組和5 min組(P0.05),熏蒸9 min組精子活率、質(zhì)膜完整率和頂體完整率分別為47.83%、55.79%和63.13%,幾乎與熏蒸11 min組相等(P0.05)。11.將平衡后的精液分別裝入0.25 mL和0.5 mL細(xì)管,冷凍解凍后0.5 mL細(xì)管組精子活率、質(zhì)膜完整率和頂體完整率分別為51.83%、57.53%和63.24%,均顯著高于0.25 mL細(xì)管組(P0.05)。以上試驗(yàn)結(jié)果表明:1.在低溫(4℃)保存精液時(shí),用泡沫箱和毛巾組合運(yùn)輸精液,選用SGY+0.05%EDTANa2稀釋液,按1:2比例稀釋精液后用四層毛巾包裹降溫,得到較好的保存效果。2.在冷凍保存精液時(shí),使用含3.5%乳糖、4.5%甘油、0.75%OEP的LGYGO,精液用0.5 mL細(xì)管包裝,平衡時(shí)間2 h,放線速度30 s,距離液氮面3 cm處熏蒸9 min,38℃水浴解凍孵育20 s,可得到較高冷凍保存效果。
[Abstract]:The results were as follows : 1 . The sperm viability was significantly higher than that in other groups ( P0.05 ) . The sperm motility , the intact rate of plasma membrane and the intact rate of acrosome were 38.86 % , 43.87 % and 47.72 % , respectively . The sperm motility , the intact rate of plasma membrane and the intact rate of acrosome were 47.83 % , 55.79 % and 63.24 % , respectively .
【學(xué)位授予單位】:沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:S828
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本文編號:1383307
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