非標(biāo)記熒光核酸適配體傳感器檢測果蔬中啶蟲脒和丙溴磷殘留的研究
本文關(guān)鍵詞:非標(biāo)記熒光核酸適配體傳感器檢測果蔬中啶蟲脒和丙溴磷殘留的研究 出處:《吉林大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
更多相關(guān)文章: 三螺旋DNA分子開關(guān) 核酸適配體 稀土離子 熒光 啶蟲脒 丙溴磷
【摘要】:基于目前農(nóng)業(yè)發(fā)展的現(xiàn)狀,農(nóng)藥的使用對于農(nóng)業(yè)的發(fā)展來說可謂是其工業(yè)革命。農(nóng)藥的使用,可以解決病蟲害帶來的問題,也可以將糧食蔬菜等產(chǎn)量得以提高。但是,農(nóng)藥隨著使用量的不斷的增加,也會帶來一系列的負(fù)面作用,諸如污染水體與環(huán)境、影響人類的健康等。所以,對于農(nóng)藥的殘留檢測技術(shù)逐漸發(fā)展成為食品安全檢測的關(guān)鍵技術(shù)之一。核酸適配體由于具有特異性強、親和力高、適用范圍廣等特性,在傳感器的構(gòu)建方面,越來越多的被用作識別元件。三螺旋DNA分子開關(guān)(a Triple-helix Molecular Switch,THMS)作為一種識別元件,具有通用性好、穩(wěn)定性強等結(jié)構(gòu)優(yōu)勢;鋱離子(Tb3+)作為稀土離子中的一種,因其敏化特性而逐漸的被發(fā)現(xiàn)與利用。本論文以檢測果蔬中的兩種農(nóng)藥啶蟲脒和丙溴磷的殘留為主要目標(biāo),將核酸適配體分別與三螺旋DNA分子開關(guān)和Tb3+相結(jié)合,構(gòu)建了兩種非標(biāo)記的熒光核酸適配體傳感器,從而實現(xiàn)對目標(biāo)物的高效、靈敏的測定。研究的主要內(nèi)容如下:(1)基于核酸適配體的三螺旋DNA分子開關(guān),建立檢測啶蟲脒的檢測體系。以新型的三螺旋DNA分子開關(guān)為切入點,將三螺旋DNA通用性好、穩(wěn)定性好的結(jié)構(gòu)優(yōu)勢與核酸適配體的特異性識別的特性相結(jié)合,通過熒光分析實現(xiàn)對目標(biāo)物啶蟲脒的高效、快速的測定。在最優(yōu)的實驗參數(shù)條件下,目標(biāo)物的線性范圍是1-12μM(終濃度為100-1200nM),檢出限為9.12nM。該實驗方法快速、高效、靈敏、重現(xiàn)性好,可以滿足農(nóng)藥殘留快速篩查的需求。同時,這種構(gòu)建用于食品中農(nóng)藥殘留檢測的傳感新方法,可以為建立以適配體為識別元素的小分子有害物質(zhì)快速檢測的其他方法提供參考,并能拓展適配體結(jié)構(gòu)開關(guān)的應(yīng)用。(2)基于Tb3+敏化熒光的核酸適配體傳感器的特異性,建立檢測丙溴磷的實驗體系,主要利用Tb3+的發(fā)光信號特性,將Tb3+作為熒光劑,構(gòu)建Tb3+敏化熒光的核酸適配體傳感器。利用單鏈DNA中鳥嘌呤堿基對Tb3+的熒光增大作用,以及核酸適配體的特異性識別能力來靈敏的檢測丙溴磷。在最優(yōu)的實驗條件下,丙溴磷的濃度線性范圍是1-12μM(終濃度為100-1200nM),檢出限是0.105μM。該實驗方法具有高效、靈敏、特異性強等優(yōu)點,可以滿足目標(biāo)物丙溴磷的快速測定。與此同時,將Tb3+的發(fā)光特性與核酸適配體相結(jié)合,對于拓展稀土離子的應(yīng)用與研究,具有十分重要的意義。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:S481.8
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,本文編號:1353623
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