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非標記熒光核酸適配體傳感器檢測果蔬中啶蟲脒和丙溴磷殘留的研究

發(fā)布時間:2017-12-30 06:05

  本文關(guān)鍵詞:非標記熒光核酸適配體傳感器檢測果蔬中啶蟲脒和丙溴磷殘留的研究 出處:《吉林大學》2017年碩士論文 論文類型:學位論文


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【摘要】:基于目前農(nóng)業(yè)發(fā)展的現(xiàn)狀,農(nóng)藥的使用對于農(nóng)業(yè)的發(fā)展來說可謂是其工業(yè)革命。農(nóng)藥的使用,可以解決病蟲害帶來的問題,也可以將糧食蔬菜等產(chǎn)量得以提高。但是,農(nóng)藥隨著使用量的不斷的增加,也會帶來一系列的負面作用,諸如污染水體與環(huán)境、影響人類的健康等。所以,對于農(nóng)藥的殘留檢測技術(shù)逐漸發(fā)展成為食品安全檢測的關(guān)鍵技術(shù)之一。核酸適配體由于具有特異性強、親和力高、適用范圍廣等特性,在傳感器的構(gòu)建方面,越來越多的被用作識別元件。三螺旋DNA分子開關(guān)(a Triple-helix Molecular Switch,THMS)作為一種識別元件,具有通用性好、穩(wěn)定性強等結(jié)構(gòu)優(yōu)勢;鋱離子(Tb3+)作為稀土離子中的一種,因其敏化特性而逐漸的被發(fā)現(xiàn)與利用。本論文以檢測果蔬中的兩種農(nóng)藥啶蟲脒和丙溴磷的殘留為主要目標,將核酸適配體分別與三螺旋DNA分子開關(guān)和Tb3+相結(jié)合,構(gòu)建了兩種非標記的熒光核酸適配體傳感器,從而實現(xiàn)對目標物的高效、靈敏的測定。研究的主要內(nèi)容如下:(1)基于核酸適配體的三螺旋DNA分子開關(guān),建立檢測啶蟲脒的檢測體系。以新型的三螺旋DNA分子開關(guān)為切入點,將三螺旋DNA通用性好、穩(wěn)定性好的結(jié)構(gòu)優(yōu)勢與核酸適配體的特異性識別的特性相結(jié)合,通過熒光分析實現(xiàn)對目標物啶蟲脒的高效、快速的測定。在最優(yōu)的實驗參數(shù)條件下,目標物的線性范圍是1-12μM(終濃度為100-1200nM),檢出限為9.12nM。該實驗方法快速、高效、靈敏、重現(xiàn)性好,可以滿足農(nóng)藥殘留快速篩查的需求。同時,這種構(gòu)建用于食品中農(nóng)藥殘留檢測的傳感新方法,可以為建立以適配體為識別元素的小分子有害物質(zhì)快速檢測的其他方法提供參考,并能拓展適配體結(jié)構(gòu)開關(guān)的應用。(2)基于Tb3+敏化熒光的核酸適配體傳感器的特異性,建立檢測丙溴磷的實驗體系,主要利用Tb3+的發(fā)光信號特性,將Tb3+作為熒光劑,構(gòu)建Tb3+敏化熒光的核酸適配體傳感器。利用單鏈DNA中鳥嘌呤堿基對Tb3+的熒光增大作用,以及核酸適配體的特異性識別能力來靈敏的檢測丙溴磷。在最優(yōu)的實驗條件下,丙溴磷的濃度線性范圍是1-12μM(終濃度為100-1200nM),檢出限是0.105μM。該實驗方法具有高效、靈敏、特異性強等優(yōu)點,可以滿足目標物丙溴磷的快速測定。與此同時,將Tb3+的發(fā)光特性與核酸適配體相結(jié)合,對于拓展稀土離子的應用與研究,具有十分重要的意義。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:吉林大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:S481.8

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本文編號:1353623

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