本文關(guān)鍵詞：貓皰疹病毒Ⅰ型gI基因序列分析及PCR檢測(cè)方法的建立　出處：《內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 貓病毒性鼻氣管炎 貓皰疹病毒Ⅰ型 gI基因 PCR 檢測(cè)

【摘要】：貓病毒性鼻氣管炎(Feline viral rhinotracheitis,FVR)又稱貓傳染性鼻氣管炎,是由貓皰疹病毒Ⅰ型(Feline herpesvirus type 1,FHV-1)引起貓科動(dòng)物的一種急性高度接觸性傳染病,以上呼吸道癥狀為特征。主要侵害幼貓,發(fā)病率可高達(dá)100%,病死率50%。成年貓也可感染但病死率低,康復(fù)動(dòng)物多成為帶毒動(dòng)物可間歇性向體外排毒。該病在臨床癥狀上很難與貓其它上呼吸道疾病鑒別,目前獸醫(yī)臨床對(duì)該病尚未有快速準(zhǔn)確的診斷方法,只能通過(guò)較為復(fù)雜繁瑣的實(shí)驗(yàn)室診斷來(lái)確診該病。但無(wú)論病原分離培養(yǎng)還是血清學(xué)診斷,因?qū)嶒?yàn)周期長(zhǎng)、敏感性差等原因均未大范圍的應(yīng)用于臨床。PCR診斷方法克服了傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室診斷的諸多弊端是診斷該病較為理想的方法。本實(shí)驗(yàn)旨在建立一種特異性強(qiáng)、敏感性高的檢測(cè)FHV-1的PCR方法。根據(jù)GenBank發(fā)表的FHV-1基因序列選取gI基因?yàn)榘谢蛟O(shè)計(jì)合成特異性引物,對(duì)疑似病料進(jìn)行PCR擴(kuò)增并克隆FHV-1 gI全基因和制備標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性質(zhì)粒。對(duì)已建立的PCR診斷方法進(jìn)行優(yōu)化同時(shí)對(duì)已優(yōu)化PCR診斷方法進(jìn)行敏感性、特異性、重復(fù)性試驗(yàn)驗(yàn)證,并依賴本實(shí)驗(yàn)建立的FHV-1 PCR方法對(duì)46份臨床樣本進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果成功從疑似病料中擴(kuò)增出FHV-1 gI基因并對(duì)其克隆制備標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性質(zhì)粒,對(duì)質(zhì)粒測(cè)序分析顯示所克隆的FHV-1 gI基因全長(zhǎng)1155 bp與FHV-1各分離株同源性均在99.7%以上,進(jìn)化樹(shù)分析結(jié)果顯示與澳大利亞株(KR381787.1)親緣關(guān)系最近。同時(shí)對(duì)PCR方法優(yōu)化確定最佳退火溫度為56℃C,最低檢測(cè)DNA模板濃度為3.23×103 copies/μL(即最低可檢測(cè)136.5 fg/μL的目標(biāo)DNA)。在特異性檢測(cè)方面該方法可特異性檢出FHV-1無(wú)法檢出犬細(xì)小病毒(CPV)、犬瘟熱病毒(CDV)、綿羊肺炎支原體(Movis)、牛支原體(M.bovis)、牛皰疹病毒Ⅰ型(BHV-1)。另外運(yùn)用本實(shí)驗(yàn)所建立的PCR診斷方法對(duì)46份臨床待檢樣本進(jìn)行檢測(cè),檢出陽(yáng)性為28份,陽(yáng)性率為60.87%,對(duì)陽(yáng)性樣本PCR產(chǎn)物進(jìn)行序列分析與GenBank登錄的FHV-1代表株同源性均為99%以上。表明所建立的PCR診斷方法具有特異性強(qiáng),敏感性高的特點(diǎn),可運(yùn)用于臨床樣本的快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)。
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S852.65

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 虎俊隆;皰疹病毒與神經(jīng)節(jié)[J];固原師專學(xué)報(bào);2004年06期

2 張長(zhǎng)品,申昆玲,江載芳;兒童人皰疹病毒6、7、8型感染的研究進(jìn)展[J];中華兒科雜志;1998年11期

3 中野和司,王艦,周正任;皰疹病毒與趨化因子[J];日本醫(yī)學(xué)介紹;2000年04期

4 王建華;新型人皰疹病毒8型[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).流行病學(xué)傳染病學(xué)分冊(cè);2000年01期

5 李秉鴻;一種新的神經(jīng)性馬皰疹病毒[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2001年02期

6 孫照剛,徐玉輝,張曼夫;一種獨(dú)特的皰疹病毒—雞傳染性喉氣管炎病毒[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2005年09期

7 肖洋;;人皰疹病毒6型的研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)雜志;2006年05期

8 嚴(yán)玉辰,李福琛,劉學(xué)禮,王樹(shù)蕙,張玉琴,魏桂珍,趙之信,蔡保建;豚鼠潛在的類皰疹病毒的研究[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);1981年01期

9 彭瑚,房益蘭,楚雍烈;人類6型皰疹病毒[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);1991年04期

10 李彬,郭永建;人皰疹病毒6型的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).流行病學(xué)傳染病學(xué)分冊(cè);2004年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 田志軍;仇華吉;童光志;;一種豬皰疹病毒的分離與鑒定[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì)第十二次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

2 劉寶山;張繼一;;貓皰疹病毒1型糖蛋白研究進(jìn)展[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第七屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第十三次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（上冊(cè)）[C];2009年

3 劉超;邱亞峰;馬志永;;α-皰疹病毒與宿主細(xì)胞骨架相互作用的研究進(jìn)展[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會(huì)第二次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

4 李玉峰;史玉穎;馬秀麗;吳靜;于可響;林樹(shù)乾;黃兵;;禽皰疹病毒特有基因序列同源性分析[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)禽病學(xué)分會(huì)第十四次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

5 黃瑜;程龍飛;李文楊;蘇敬良;莊向生;;鴨皰疹病毒Ⅱ型(暫定名)的分離鑒定[A];第四屆中國(guó)畜牧獸醫(yī)青年科技工作者學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2001年

6 葛菡;程安春;汪銘書(shū);朱德康;羅啟慧;賈仁勇;郭宇飛;陳孝躍;;皰疹病毒胸苷激酶基因的研究進(jìn)展[A];第四屆第九次全國(guó)學(xué)術(shù)研討會(huì)暨飼料和動(dòng)物源食品安全戰(zhàn)略論壇論文集（下冊(cè)）[C];2008年

7 鄭之北;吳亦棟;尚世強(qiáng);杜立中;;兒科常見(jiàn)人皰疹病毒的檢測(cè)及基因分型[A];2007年浙江省兒科學(xué)、小兒外科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

8 周榮;劉文寬;曾文鋌;劉倩;許元生;;皰疹病毒是引起“自疑陰滋病人”癥狀的病原體嗎?[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點(diǎn)研討會(huì)論文集[C];2011年

9 柯浩;劉振興;郝樂(lè);馬艷平;馮國(guó)清;馬江耀;梁志凌;陳棠堂;顏遠(yuǎn)義;王先科;;我國(guó)鯉科皰疹病毒3型病毒病流行病學(xué)調(diào)查[A];中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)魚(yú)病專業(yè)委員會(huì)2013年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2013年

10 凌勇;楊君敬;何誠(chéng);;禽新發(fā)生皰疹病毒的分離與初步鑒定[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)禽病學(xué)分會(huì)第十五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 何德功;鯉魚(yú)皰疹病毒在日本大面積感染[N];新華每日電訊;2003年

2 高潔;皰疹病毒易感染哪些部位[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2009年

3 武漢協(xié)和醫(yī)院皮膚性病科 馮愛(ài)平;慎防皰疹病毒侵襲胎兒[N];家庭醫(yī)生報(bào);2005年

4 新華;英國(guó)研究用皰疹病毒治腦癌[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2000年

5 呂乃群;嘴起皰說(shuō)明您累了[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2006年

6 記者邰舉;皰疹病毒感染機(jī)理被發(fā)現(xiàn)[N];科技日?qǐng)?bào);2002年

7 新訊;皰疹病毒誘發(fā)慢性疲勞[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2001年

8 束梅英;皰疹病毒：癌細(xì)胞的克星[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2001年

9 本報(bào)特約撰稿人 陳本川;藥物副作用壁壘久攻難破[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

10 王馨立;以毒攻毒[N];文匯報(bào);2000年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前7條

1 劉軍;PACS-1在單純皰疹病毒I型糖蛋白B定位于分泌高爾基體網(wǎng)絡(luò)中的作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2001年

2 齊眉;人皰疹病毒8型重組蛋白的制備和應(yīng)用及其感染的流行病學(xué)調(diào)查[D];山東大學(xué);2006年

3 張晨飛;MDV-1 CVI988疫苗株VP22及UL13蛋白功能初步研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2009年

4 朱洪偉;鴨腸炎病毒UL15及UL41基因的鑒定[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

5 魏榮;兩種重組火雞皰疹病毒rHVT-gB1/EGFP和rHVT-EGFP的構(gòu)建[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2001年

6 秦宇;干擾素調(diào)節(jié)因子7對(duì)人類8型皰疹病毒基因表達(dá)的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2009年

7 馬光剛;馬皰疹病毒Ⅰ型改造活疫苗的構(gòu)建及其作為活載體的應(yīng)用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 姚卓鳳;鯽感染鯉皰疹病毒Ⅱ的組織病理學(xué)研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

2 夏俊洋;牡蠣皰疹病毒魁蚶株基因組測(cè)定與分析[D];中國(guó)海洋大學(xué);2015年

3 趙盼盼;野鴿皰疹病毒的分離鑒定及UL27基因生物信息學(xué)分析[D];東北林業(yè)大學(xué);2016年

4 高文輝;牡蠣皰疹病毒巢式PCR檢測(cè)法及基因分型系統(tǒng)的建立[D];上海海洋大學(xué);2016年

5 楊永龍;新疆伊犁地區(qū)馬皰疹病毒1型的分離鑒定及其gB和gD基因的序列分析[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

6 李航;貓皰疹病毒Ⅰ型gI基因序列分析及PCR檢測(cè)方法的建立[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

7 馬建強(qiáng);異基因造血干細(xì)胞移植人皰疹病毒7型感染的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2011年

8 羅丹;鯉皰疹病毒Ⅱ型4種檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

9 劉平平;馬皰疹病毒Ⅰ型TK基因啟動(dòng)子的定位及特點(diǎn)的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

10 張心聲;人皰疹病毒8型（HHV-8）的基因表達(dá)及流行病學(xué)調(diào)查研究[D];山東大學(xué);2005年

，

本文編號(hào)：1328973