本文關(guān)鍵詞：黑龍江部分地區(qū)肉牛大腸桿菌耐藥基因與毒力基因檢測(cè)及耐藥性分析

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【摘要】：大腸桿菌(Escherichia coli)是一種人畜共患的重要食源性病原菌,隨著抗菌藥物的大量使用,其耐藥性和危害日趨嚴(yán)重,嚴(yán)重威脅著人畜健康。我國(guó)肉牛養(yǎng)殖量位居國(guó)際第三位,伴隨國(guó)家糧改飼政策的實(shí)施,適度規(guī)�；B(yǎng)殖將逐漸成為行業(yè)主體。但近年來(lái)關(guān)于規(guī)�；�(chǎng)大腸桿菌引起犢牛腹瀉、出血性腸炎、敗血癥等的報(bào)道日漸增多,大腸桿菌超級(jí)耐藥菌株、耐藥性及其危害引起關(guān)注。因此,對(duì)肉牛源致病菌大腸桿菌毒力基因、耐藥基因和耐藥性的檢測(cè)和分析,對(duì)于有效預(yù)防和控制大腸桿菌病具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本研究首先從黑龍江省不同地區(qū)腹瀉犢牛分離鑒定獲得71株大腸桿菌,通過(guò)PCR方法對(duì)分離株進(jìn)行LEE毒力島(eae A)、耶爾森毒力島或致病島(Fyu A、irp2)、菌毛(K88、K99、F41、F18、987P)、不耐熱腸毒素(LT)、耐熱腸毒素(Sta、Stb)、溶血素基因(hyl A)、志賀毒素(Stx1、Stx2)等14種毒力基因進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明69%分離株攜帶毒力基因,irp2基因檢出率最高(49.3%);其次是Fyu A(47.9%),F41和Stx1檢出率為15.5%,K99、hyl A、Sta檢出率為1.41%。未能檢測(cè)出LT、Stb、K88、F18、Stx2、987P毒力基因。采用Kirby-Bauer紙片擴(kuò)散法對(duì)71株大腸桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),結(jié)果顯示,71株大腸桿菌對(duì)青霉素、氨芐西林、四環(huán)素、甲氧芐啶等藥物具有較強(qiáng)的耐藥性,其中青霉素的耐藥率98.4%,氨芐西林的耐藥率90.1%,甲氧嘧啶、四環(huán)素的耐藥率73.2%,多粘菌素耐藥率最低1.4%;對(duì)多粘菌素B和氟苯尼考較為敏感,分別達(dá)87.3%和60.6%。通過(guò)PCR的方法對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)bla TEM、bla SHV、bla OXA,氨基糖苷類(lèi)aac(3′)-IIa、aad A1、aad B,四環(huán)素類(lèi)tet A、tet B、tet C,氯霉素類(lèi)flo R、磺胺類(lèi)Sul1、Sul2,喹諾酮類(lèi)Gyr A、Gyr B、Par C等15種耐藥基因進(jìn)行檢測(cè)。其中bla TEM、Gyr A和Gyr B檢出率最高,為98.6%。其次tet A、Par C檢出率為97.2%,aad A1、tet B、Sul2檢出率也超過(guò)了80%,tet C檢出率最低,為2.8%。15種耐藥基因型(tet C除外)和耐藥表型的陽(yáng)性符合率大于50%。綜上所述,黑龍江部分牛場(chǎng)大腸桿菌分離株的多重耐藥性及耐藥基因的存在情況較為普遍,耐藥性與耐藥基因的檢出率基本呈正相關(guān)。從臨床出現(xiàn)腹瀉癥狀犢牛糞便分離的大腸桿菌多數(shù)攜帶數(shù)量不一的毒力基因。檢出的菌毛毒力基因以K99、F41為主,腸毒素毒力基因以Sta為主。本研究對(duì)人畜共患大腸桿菌病的預(yù)防和控制提供了理論指導(dǎo)。
【學(xué)位授予單位】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：S852.61

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本文編號(hào)：1277084