本文關(guān)鍵詞：長(zhǎng)牡蠣不同選育群體雜交子代的雜種優(yōu)勢(shì)及微衛(wèi)星分析

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【摘要】：長(zhǎng)牡蠣(Crassostrea gigas)是一種在我國(guó)乃至全世界范圍內(nèi)被廣泛養(yǎng)殖的重要經(jīng)濟(jì)貝類,因?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)豐富,味道鮮美,素有“海中牛奶”的美稱。我國(guó)的牡蠣養(yǎng)殖規(guī)模較大,市場(chǎng)需求居高不下,而長(zhǎng)期的人工養(yǎng)殖容易導(dǎo)致牡蠣的種質(zhì)衰退,造成長(zhǎng)牡蠣的品質(zhì)下降。因此,為了推動(dòng)我國(guó)牡蠣養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展,滿足市場(chǎng)的需求,培育抗逆性好、生長(zhǎng)快、繁殖力高等優(yōu)良特性的品種已是勢(shì)在必行。本研究結(jié)合選擇育種,利用分別已連續(xù)選育5代和6代的長(zhǎng)牡蠣中國(guó)群體和日本群體進(jìn)行完全雙列雜交,研究了長(zhǎng)牡蠣不同種群雜交的雜種優(yōu)勢(shì)并進(jìn)行了微衛(wèi)星分析,旨在為長(zhǎng)牡蠣的雜交育種提供理論依據(jù),主要結(jié)果如下：1.長(zhǎng)牡蠣中國(guó)群體和日本群體雜交子代的雜種優(yōu)勢(shì)和配合力分析以長(zhǎng)牡蠣中國(guó)群體(C)連續(xù)選育5代和日本群體(J)連續(xù)選育6代的個(gè)體作為親本進(jìn)行完全雙列雜交,比較分析了幼蟲(chóng)期、稚貝期和養(yǎng)成期3個(gè)階段各實(shí)驗(yàn)組生長(zhǎng)與存活情況,研究了長(zhǎng)牡蠣不同種群雜交的雜種優(yōu)勢(shì),并進(jìn)行了配合力分析。結(jié)果表明,幼蟲(chóng)期,雜交組生長(zhǎng)與存活性狀表現(xiàn)出微弱的雜種優(yōu)勢(shì),而日本群體一般配合力(GCA)較高。自交組JJ(J♀×J(?))和反交組JC(J♀×C(?))表現(xiàn)出明顯的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì),而自交組CC(C♀×C(?))和正交組CJ(C♀×(?))存活率較高,表明幼蟲(chóng)期存在顯著的母性效應(yīng)。其中正交組CJ存活率最高,雜種優(yōu)勢(shì)率為4.67%～40.30%。稚貝及養(yǎng)成期,雜交組各生長(zhǎng)性狀(殼高、殼長(zhǎng)、殼寬和總重)表現(xiàn)出顯著的雜種優(yōu)勢(shì),總重的雜種優(yōu)勢(shì)率最高,為13.61%～21.71%。其中正交組CJ各生長(zhǎng)性狀的雜種優(yōu)勢(shì)率均表現(xiàn)為正值。從整個(gè)生長(zhǎng)階段來(lái)看,長(zhǎng)牡蠣中國(guó)群體的母本一般配合力和日本群體的父本一般配合力在生長(zhǎng)后期較高,而雜交組特殊配合力(SCA)總體表現(xiàn)為正效應(yīng),表明正交組CJ是最適的雜交組合,具有很大的生產(chǎn)潛力。2.長(zhǎng)牡蠣微衛(wèi)星標(biāo)記的分離及特性從長(zhǎng)牡蠣的EST序列和全基因組序列中總共開(kāi)發(fā)了480個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記。這些標(biāo)記位點(diǎn)等位基因數(shù)量為2-33個(gè),觀測(cè)雜合度和期望雜合度分別為0-1.0000和0.0655～0.9690。經(jīng)過(guò)Bonferroni校正,共196個(gè)位點(diǎn)顯著偏離哈迪-溫伯格平衡,23對(duì)位點(diǎn)呈現(xiàn)連鎖不平衡。這些位點(diǎn)為長(zhǎng)牡蠣QTL定位以及遺傳多樣性評(píng)價(jià)提供了有用工具。3.長(zhǎng)牡蠣群體微衛(wèi)星遺傳多樣性及其與生長(zhǎng)性狀的相關(guān)性分析應(yīng)用30個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)長(zhǎng)牡蠣中國(guó)群體(C)和日本群體(J)的完全雙列雜交子代進(jìn)行遺傳多樣性分析,并且分析了長(zhǎng)牡蠣微衛(wèi)星標(biāo)記與生長(zhǎng)性狀的相關(guān)性。結(jié)果表明,4個(gè)群體中平均等位基因數(shù)量為7.4-10.8,平均觀測(cè)雜合度和期望雜合度分別為0.5247-0.5742和0.7042-0.7520,平均多態(tài)信息含量為0.6572-0.7139,雜交后代與親本自繁后代的遺傳多樣性并沒(méi)有顯著的差異性(P0.05)�；谶z傳距離構(gòu)建的UPGMA系統(tǒng)樹(shù)顯示,反交群體(J♀×C(?),JC)與日本群體的親緣關(guān)系較近,而正交群體(C♀×J(?), CJ)介于兩親本群體之間。采用最小二乘法分析微衛(wèi)星位點(diǎn)與生長(zhǎng)性狀的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)6個(gè)位點(diǎn)在長(zhǎng)牡蠣不同群體中與生長(zhǎng)性狀呈現(xiàn)相關(guān)性。不同基因型間的多重比較表明,CgGJ152位點(diǎn)BD基因型與殼長(zhǎng)、殼寬性狀呈正相關(guān),而且等位基因C可能比等位基因D更有優(yōu)勢(shì)；CgEJ493位點(diǎn)的AC基因型、CgGJ222位點(diǎn)的DD基因型、CgGJ246位點(diǎn)的等位基因E與長(zhǎng)牡蠣的生長(zhǎng)性狀呈正相關(guān)；而CgEJ041位點(diǎn)的CC基因型、CgEJ538位點(diǎn)的AB基因型、CgGJ222位點(diǎn)的BE基因型與長(zhǎng)牡蠣的生長(zhǎng)性狀呈負(fù)相關(guān),這些標(biāo)記可望應(yīng)用于長(zhǎng)牡蠣的分子標(biāo)記輔助選擇育種。4.基于微衛(wèi)星標(biāo)記的長(zhǎng)牡蠣雜合度與適合度相關(guān)性分析雜合度與適合度相關(guān)性(Heterozygosity-fitness correlation, HFC)的研究常被用來(lái)檢測(cè)個(gè)體的遺傳多樣性與適合度間的關(guān)聯(lián)性。本研究以長(zhǎng)牡蠣完全雙列雜交群體為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,在1齡的4個(gè)長(zhǎng)牡蠣雜交群體中應(yīng)用30個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)分析個(gè)體的多位點(diǎn)雜合度(Multilocus heterozygosity, MLH)、單位點(diǎn)雜合度(Single-locus heterozygosity, SLH)與生長(zhǎng)性狀的相關(guān)性。研究結(jié)果表明,長(zhǎng)牡蠣個(gè)體的MLH與殼寬、體重具有正相關(guān)性；而SLH與殼高、殼長(zhǎng)呈正相關(guān)。由于群體分層以及多個(gè)群體的混合數(shù)據(jù)會(huì)影響HFC的檢測(cè),因此,采用群體生長(zhǎng)性狀值的離差再次分析HFC,結(jié)果沒(méi)有發(fā)現(xiàn)雜合度與適合度有任何相關(guān)性。這說(shuō)明在進(jìn)行HFC研究時(shí)應(yīng)該慎重對(duì)不同的群體進(jìn)行混合。而長(zhǎng)牡蠣樣本個(gè)體的年齡、樣本大小和使用的微衛(wèi)星標(biāo)記的數(shù)量等都可能會(huì)影響HFC的檢測(cè)。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S917.4

【參考文獻(xiàn)】

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