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大苞鞘石斛快繁體系構(gòu)建及多倍體誘導(dǎo)

發(fā)布時(shí)間:2017-11-12 06:07

  本文關(guān)鍵詞:大苞鞘石斛快繁體系構(gòu)建及多倍體誘導(dǎo)


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【摘要】:石斛屬(Dendrobium)植物具不僅具有極高的藥用價(jià)值,而且大部分具有極高的觀賞價(jià)值。近年來,由于人們不合理采挖和生鏡的破壞,野生石斛資源日益稀少,處于瀕危狀態(tài)。隨著人們生活水平和審美需求的提高,對(duì)植物多樣性、觀賞價(jià)值和栽培特性的要求也逐漸提高。現(xiàn)在廣泛栽培的觀賞石斛多是通過原生種雜交選育出來的優(yōu)良品種。我國(guó)在石斛屬植物育種方面的研究較西方國(guó)家落后,近幾年才出現(xiàn)一些學(xué)者開展雜交育種和倍性育種的研究。因此,本研究選擇觀賞價(jià)值和藥用價(jià)值都很高的大苞鞘石斛(D.wardianum)為材料,觀察其在引種地的生物學(xué)特性和適應(yīng)性,開展其組培快繁和多倍體育種的研究,以期為野生石斛屬植物的保護(hù)、開發(fā)、利用和種質(zhì)創(chuàng)新提供理論和實(shí)踐依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.大苞鞘石斛在引種地花期為4-5月,單花花期可達(dá)15-20 d;在7-8月,因高溫濕熱,假鱗莖腐爛嚴(yán)重,在林內(nèi)郁閉度較高的生境中受害較輕。大苞鞘石斛自交高度親和,不存在自動(dòng)的自花授粉,人工自花授粉、同株異花授粉、異株異花授粉的坐果率分別為85.71%、76.67、84.21%,自然條件下的結(jié)果率為14%,存在傳粉昆蟲。不同授粉方式產(chǎn)生的種子生活力差異較大,TTC檢測(cè)結(jié)果以同株異花授粉的種子活力最高,可達(dá)59.99%;異株異花授粉的種子活力次之,為51.55%;自花授粉和自然結(jié)果的種子生活力最低,分別為3.94%和0.00%。種子萌發(fā)法測(cè)得的種子活力較TTC法的高,同株異花授粉、異株異花授粉、自花授粉和自然結(jié)果的種子生活力分別為60.73%、57.60%、4.00%、1.27%。2.大苞鞘石斛胚培養(yǎng)及植株再生研究結(jié)果表明,大苞鞘石斛種胚萌發(fā)和原球莖膨大的最適培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 1.0 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1+香蕉泥50 g·L-1,萌發(fā)率達(dá)91.29%;葉芽分化的最適培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 0.5 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+香蕉泥50 g·L-1;干物質(zhì)積累的最適培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 2.0 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+香蕉泥200g.L-1;叢生芽增殖的最佳培養(yǎng)基為1/2MS+BA 0.5 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1+香蕉泥100 g·L-1,平均增殖系數(shù)達(dá)6.33;叢生芽生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 0.5 mg·L-1+6-BA 3.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+香蕉泥50 g·L-1+土豆泥50 g·L-1。3.大苞鞘石斛不定芽誘導(dǎo)和原球莖懸浮培養(yǎng)研究結(jié)果表明:大苞鞘石斛不定芽增殖和誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)配方為1/2MS+NAA 0.5mg·L-1+IBA 0.2mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+KT 1.0 mg·L-1,增殖系數(shù)達(dá)5.07,不定芽誘導(dǎo)率達(dá)100%,新芽整齊健壯;不定芽誘導(dǎo)的最佳基本培養(yǎng)基為TH培養(yǎng)基,不定芽誘導(dǎo)率為100%,增殖系數(shù)達(dá)到6.0。適合大苞鞘石斛原球莖懸浮培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基為B5和MS培養(yǎng)基,其增殖系數(shù)分別為4.310和4.028,多糖含量分別為7.08%和7.12%;添加物為香蕉+椰子汁時(shí),增殖系數(shù)和多糖含量最高,分別為3.91和9.97%;適合原球莖懸浮培養(yǎng)的激素組合為NAA 0.5 mg·L-1+6-BA 0.2 mg·L-1。4.大苞鞘石斛多倍體誘導(dǎo)結(jié)果表明,浸泡法以秋水仙素濃度為0.10%,處理時(shí)間為12h,誘變率最高,達(dá)26.0%,死亡率較低;混配法以秋水仙素濃度為0.03%的誘導(dǎo)效果最好,誘變率達(dá)34.0%。秋水仙素濃度和處理時(shí)間對(duì)植株的死亡率有重要影響,隨著秋水仙素濃度和處理時(shí)間的增加而增高。秋水仙素對(duì)植株后期培養(yǎng)有毒害作用,混配法較浸泡法持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),經(jīng)多代培養(yǎng)后的生長(zhǎng)性狀仍表現(xiàn)出明顯的毒副作用。大苞鞘石斛多倍體植株與二倍體植株存在明顯差異:形態(tài)上表現(xiàn)為植株粗矮、節(jié)間短、葉片寬厚,且生長(zhǎng)緩慢;細(xì)胞學(xué)水平上表現(xiàn)為氣孔和保衛(wèi)細(xì)胞增大,單位面積氣孔數(shù)減少;染色體水平上表現(xiàn)為二倍體細(xì)胞的染色體為2n=2x=38,四倍體細(xì)胞的染色體數(shù)則為2n=4x=76。
【學(xué)位授予單位】:福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S682.31

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本文編號(hào):1174638

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