本文關(guān)鍵詞：多花水仙離體培養(yǎng)及多倍體誘導(dǎo)技術(shù)研究

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【摘要】：多花水仙為石蒜科水仙屬多年生球根類花卉,其球莖大,花朵多,開花期長(zhǎng),花香清雅,是具有較高觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值的一類花卉。由于多花水仙商品球繁殖率低,顏色單一,品種少,故改良水仙品種一直都是科學(xué)研究者們的研究重點(diǎn)。離體快速繁殖技術(shù)可以在極短的時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)大量?jī)?yōu)質(zhì)種苗,還可以用于人工種子的生產(chǎn)、原原種保存等工作,同時(shí)經(jīng)過(guò)染色體加倍的植株具有外形健壯,鱗片肥厚,高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)等優(yōu)點(diǎn)。因此,多花水仙的離體快繁和多倍體誘導(dǎo)的研究具有十分重要的理論和實(shí)際意義。本研究以漳州水仙和黃花水仙為試驗(yàn)材料,系統(tǒng)的研究了不同處理對(duì)鱗莖不同部位愈傷組織形成及分化的影響,從而篩選出最適漳州水仙和黃花水仙生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,為漳州水仙和黃花水仙的快速繁殖提供了技術(shù)指導(dǎo),也為多花水仙的遺傳轉(zhuǎn)化等研究工作奠定了基礎(chǔ)；同時(shí)本試驗(yàn)利用秋水仙素直接液體浸泡法和固體培養(yǎng)法來(lái)對(duì)漳州水仙和黃花水仙進(jìn)行多倍體誘導(dǎo),比較了不同濃度秋水仙素和不同時(shí)間組合對(duì)漳州水仙和黃花水仙的誘變效果,試圖探索出誘導(dǎo)多倍體的技術(shù)和方法,為培育具有更高觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值的水仙新品種奠定基礎(chǔ)。本研究主要獲得以下研究成果：1.用不同部位的水仙帶盤鱗片為外植體,以小球莖誘導(dǎo)率和小球莖的質(zhì)量為主要因素來(lái)篩選最佳培養(yǎng)基。漳州水仙外層鱗莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.2mg/L 6-BA+0.5mg/L 2,4-D+0.1mg/L KT,漳州水仙中層鱗莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.5mg/L 2,4-D+O.lmg/L KT,黃花水仙外層鱗莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.5mg/L 6-BA+1.0mg/L 2,4-D+O.lmg/L KT,黃花水仙中層鱗莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L 2,4-D+O.lmg/L KT。2.本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)水仙的外層鱗莖和中層鱗莖進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn),漳州水仙和黃花水仙外層的效果均不佳,容易褐化,影響了愈傷組織及小球莖的誘導(dǎo)。與外層鱗片相比,選擇漳州水仙和黃花水仙中層鱗莖作為外植體誘導(dǎo)效果較好。3.在組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,利用秋水仙素的直接液體浸泡法和固體培養(yǎng)法,比較不同秋水仙素濃度和不同時(shí)間組合對(duì)漳州水仙和黃花水仙的誘變效果。研究結(jié)果表明,兩種方法均能誘導(dǎo)出多倍體植株,但直接液體浸泡法比固體培養(yǎng)法的誘導(dǎo)率要高,死亡率也較高。4.通過(guò)用不同的預(yù)處理方法對(duì)黃花水仙根尖進(jìn)行處理可以發(fā)現(xiàn),秋水仙素、8-羥基喹啉、對(duì)二氯苯對(duì)中期染色體均有一定的凝縮作用,能達(dá)到較好的效果,而冰水對(duì)染色體的凝縮效果和分散效果均不佳；用0.2%秋水仙素處理8h的染色體形態(tài)較好,分散度適中,縊痕區(qū)比較清晰；用0.002 mol/L的8-羥基喹啉處理8h的染色體形態(tài)最好,分散度最好,縊痕區(qū)很清晰；用飽和對(duì)二氯苯溶液處理8h的染色體分散程度好,但凝縮效果不是很好,染色體較長(zhǎng),主縊痕和次縊痕不清晰。所以本試驗(yàn)前處理采用0.002 mol/L的8-羥基喹啉液浸泡8 h。5.經(jīng)秋水仙素誘導(dǎo)的植株與對(duì)照組植株比較發(fā)現(xiàn),變異植株鱗莖變大,氣孔也顯著變大,單位面積內(nèi)氣孔個(gè)數(shù)明顯減少,對(duì)變異植株進(jìn)行染色體鑒定發(fā)現(xiàn),漳州水仙中并未發(fā)現(xiàn)六倍體植株,黃花水仙中發(fā)現(xiàn)了四倍體植株,同時(shí)兩種水仙中均出現(xiàn)了非整倍體。
【關(guān)鍵詞】：漳州水仙 黃花水仙 愈傷組織 秋水仙素 多倍體
【學(xué)位授予單位】：福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S682.21
【目錄】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 縮寫詞11-12
• 第一章 前言12-22
• 1 多花水仙離體培養(yǎng)技術(shù)12-15
• 1.1 低溫預(yù)處理13
• 1.2 外植體的選擇13
• 1.3 外植體的消毒13-14
• 1.4 器官發(fā)生途徑14
• 1.5 培養(yǎng)基的選擇14-15
• 2 植物育種研究進(jìn)展15-17
• 2.1 傳統(tǒng)的育種方法15-16
• 2.1.1 選擇育種15
• 2.1.2 雜交育種15-16
• 2.1.3 誘變育種16
• 2.2 現(xiàn)代育種16-17
• 3 多倍體育種的研究進(jìn)展17-20
• 3.1 多倍體植物的特征17-18
• 3.2 多倍體誘發(fā)18-19
• 3.3 植物多倍體的鑒定19-20
• 3.3.1 形態(tài)鑒定法19
• 3.3.2 氣孔鑒定法19-20
• 3.3.3 染色體計(jì)數(shù)法20
• 3.3.4 分子水平鑒定法20
• 4 研究的目的和意義20-22
• 第二章 水仙離體再生體系的建立22-36
• 1 材料與方法22-23
• 1.1 供試材料22
• 1.2 試驗(yàn)方法22-23
• 1.2.1 外植體消毒22
• 1.2.2 培養(yǎng)基22-23
• 1.2.3 外植體的接種23
• 1.2.4 繼代增殖培養(yǎng)23
• 2 結(jié)果與分析23-34
• 2.1 漳州水仙組培苗的生長(zhǎng)特性23
• 2.2 相關(guān)性分析23-29
• 2.2.1 漳州水仙外層鱗莖生長(zhǎng)及分化的相關(guān)性分析23-25
• 2.2.2 漳州水仙中層鱗莖生長(zhǎng)及分化的相關(guān)性分析25-27
• 2.2.3 黃花水仙外層鱗莖生長(zhǎng)及分化的相關(guān)性分析27-28
• 2.2.4 黃花水仙中層鱗莖生長(zhǎng)及分化的相關(guān)性分析28-29
• 2.3 6-BA、2,4-D和KT最佳濃度組合的確定29-34
• 2.3.1 3種激素不同濃度組合對(duì)漳州水仙外層小球莖誘導(dǎo)影響29-31
• 2.3.2 3種激素不同濃度組合對(duì)漳州水仙中層小球莖誘導(dǎo)影響31
• 2.3.3 3種激素不同濃度組合對(duì)黃花水仙外層小球莖誘導(dǎo)影響31-32
• 2.3.4 3種激素不同濃度組合對(duì)黃花水仙中層小球莖誘導(dǎo)影響32-34
• 3 討論34-36
• 第三章 秋水仙素誘導(dǎo)多倍體36-45
• 1 材料與方法36-37
• 1.1 供試材料36
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法36-37
• 1.2.1 混合培養(yǎng)法36-37
• 1.2.2 浸泡培養(yǎng)法37
• 2 結(jié)果與分析37-44
• 2.1 漳州水仙多倍體誘導(dǎo)37-41
• 2.1.1 漳州水仙鱗莖片混合培養(yǎng)法的誘導(dǎo)效果37-38
• 2.1.2 漳州水仙鱗莖片浸泡培養(yǎng)法的誘導(dǎo)效果38-39
• 2.1.3 漳州水仙愈傷組織混合培養(yǎng)法的誘導(dǎo)效果39-40
• 2.1.4 漳州水仙愈傷組織浸泡培養(yǎng)法的誘導(dǎo)效果40-41
• 2.2 黃花水仙多倍體誘導(dǎo)41-44
• 2.2.1 黃花水仙愈傷組織混合培養(yǎng)法的誘導(dǎo)效果41-42
• 2.2.2 黃花水仙愈傷組織浸泡培養(yǎng)法的誘導(dǎo)效果42-44
• 3 討論44-45
• 第四章 多倍體鑒定45-57
• 1 材料與方法45-47
• 1.1 材料與試劑45
• 1.2 方法45-47
• 1.2.1 預(yù)處理45-46
• 1.2.2 固定46
• 1.2.3 解離46
• 1.2.4 壓片和染色46
• 1.2.5 鏡檢46
• 1.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析46
• 1.2.7 多倍體鑒定46-47
• 2 結(jié)果與分析47-55
• 2.1 不同預(yù)處理對(duì)二倍體黃花水仙根尖染色體數(shù)目的影響47-49
• 2.2 不同預(yù)處理對(duì)染色體形態(tài)的影響49-52
• 2.3 植株的倍性鑒定52-55
• 2.3.1 形態(tài)學(xué)鑒定52-53
• 2.3.2 氣孔鑒定53-54
• 2.3.3 染色體鑒定54-55
• 3 討論55-57
• 第五章 小結(jié)與展望57-59
• 1 小結(jié)57
• 2 創(chuàng)新點(diǎn)57-58
• 3 展望58-59
• 參考文獻(xiàn)59-64
• 附錄64-71
• 致謝71

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本文編號(hào)：1051352