目的:探究由GPER介導(dǎo)的雌激素對TNBC細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移的影響及其相關(guān)機(jī)制。方法:(1)運用mRNA以及l(fā)ncRNA芯片檢測分析潛在的、受GPER調(diào)節(jié)的mRNA和lncRNA,用qRT-PCR驗證mRNA和lncRNA芯片結(jié)果。利用DAVID v.6.8 KEGG數(shù)據(jù)庫進(jìn)行信號通路富集分析。(2)利用qRT-PCR檢測96對TNBC與癌旁組織中VGLUT2的表達(dá)情況。應(yīng)用免疫組化(IHC)檢測TNBC組織切片中GPER與VGLUT2的表達(dá)情況。通過對IHC結(jié)果評分,分析GPER與VGLUT2的相關(guān)性。應(yīng)用免疫印跡實驗(western blotting)驗證TNBC細(xì)胞中GPER與VGLUT2的關(guān)系。使用谷氨酸檢測試劑盒檢測GPER激活與抑制時,TNBC細(xì)胞釋放的谷氨酸水平。(3)利用qRT-PCR檢測96例TNBC患者中l(wèi)ncRNA-Glu的水平,驗證TNBC細(xì)胞中GPER與lncRNA-Glu的關(guān)系。應(yīng)用RNA pull-down實驗和RNA免疫沉淀反應(yīng)實驗(RIP)驗證lncRNA-Glu與VGLUT2的結(jié)合。通過谷氨酸攝取實驗分析lncRNA-Glu與VGLUT2的結(jié)合對谷氨酸的...

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
中文摘要
英文摘要
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 三陰型乳腺癌中由GPER介導(dǎo)的m RNA和 lncRNA表達(dá)譜
    1 材料和方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 GPER激活引起VGLUT2 上調(diào)
    1 材料和方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 GPER激活引起lncRNA-Glu下調(diào),下調(diào)的lncRNA-Glu引起VGLUT2的谷氨酸轉(zhuǎn)運活性及轉(zhuǎn)錄活性升高
    1 材料和方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第四部分 GPER介導(dǎo)的c AMP-PKA信號以及l(fā)ncRNA-Glu-VGLUT2 信號活化協(xié)同地促進(jìn)谷氨酸分泌
    1 材料和方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第五部分 NMDAR-CaMK/MEK-MAPK信號受GPER介導(dǎo)的谷氨酸分泌激活,從而促進(jìn)TNBC細(xì)胞侵襲
    1 材料和方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第六部分 體內(nèi)實驗驗證GPER的激活促進(jìn)TNBC腫瘤轉(zhuǎn)移
    1 材料和方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
附圖及附表
文獻(xiàn)綜述:雌激素受體GPER在乳腺癌中功能的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀博士期間發(fā)表論文及科研情況



本文編號：3993557