去整合素金屬蛋白酶 12(A Disintegrin And Metalloproteinase 12,ADAM12)是去整合素蛋白酶家族的一員,具有典型的蛋白水解酶功能。它有兩種構(gòu)型:穿膜全長型ADAM12L和分泌型ADAM12S。研究發(fā)現(xiàn),ADAM12在小細胞肺癌(Small cell lung cancer,SCLC)組織中高表達,在SCLC患者的血清和尿液中顯著高于正常人,并與SCLC患者的生存率呈負相關(guān)。ADAM12S可以促進SCLC細胞的增殖、遷移和侵襲,但其具體作用機制尚不清楚。本論文旨在尋找ADAM12S在SCLC細胞中調(diào)控的蛋白以及潛在水解底物,以期闡明其促進SCLC細胞增殖和轉(zhuǎn)移的分子機制。第一部分定量蛋白組學和生化方法發(fā)現(xiàn)ADAM12S促進SCLC細胞增殖和轉(zhuǎn)移的新機制目的:在SCLC細胞株中對ADAM12S調(diào)控的蛋白進行系統(tǒng)的鑒定,尋找ADAM12S影響SCLC細胞增殖和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵蛋白。方法:qRT-PCR方法檢測不同SCLC細胞株中ADAM12S的mRNA水平,篩選出低表達和高表達的細胞株;利用慢病毒載體pLVX-IRES-ZsGreenl構(gòu)建ADAM12S過...

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【學位級別】：博士

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圖１．ＡＤＡＭ１２Ｓ表達穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的構(gòu)建

第三章?分泌型去整合素金屬蛋白酶ＡＤＡＭ１２Ｓ促進小細胞肺癌細胞增殖和轉(zhuǎn)移的分子機制研究??Ａ?Ｃ??氏?１５０－??ｉ?＾?Ｃｔｒｌ?ＡＤＡＭ１２Ｓ??§?ＯＪ１００－?■??——??＾?＜?圓?９５—?ＡＤＡＭ１２Ｓ??｜?（Ｔ?５０－?■????｜?ｎ?ｆｔ?＿?▲?３４－....

圖２．?ＡＤＡＭ１２Ｓ促進Ｈ１６８８細胞的增殖、遷移和侵襲

分泌型去整合素金屬蛋白酶ＡＤＡＭ１２Ｓ促進小細胞肺癌細胞增殖和轉(zhuǎn)移的分子機制研宄?第三章??２．ＡＤＡＭ１２Ｓ促進小細胞肺癌細胞的增殖、遷移和侵襲??為了進一步探索ＡＤＡＭ１２Ｓ促進小細胞肺癌細胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移的分子機制，??我們首先重復(fù)了文獻報道的結(jié)果［３１］。我們用ＣＣＫ....

圖３．?Ｈ１６８８細胞中ＡＤＡＭ１２Ｓ調(diào)控的蛋白的鑒定

分泌型去整合素金屬蛋白酶ＡＤＡＭ１２Ｓ促進小細胞肺癌細胞增殖和轉(zhuǎn)移的分子機制研宄?第三章??多肽樣品，進行ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析，用ＭａｘＱｕａｎｔ軟件搜索質(zhì)譜數(shù)據(jù)獲得蛋白質(zhì)的相對??豐度及其鑒定結(jié)果。為了獲得有統(tǒng)計意義的結(jié)果，我們進行了三次生物學重復(fù)實驗。??用三次生物學重復(fù)的－....

圖７．?ＡＤＡＭ１２Ｓ通過ＨＫ１促進小細胞肺癌的增殖、遷移和侵襲

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本文編號：3921195