背景:主動脈夾層(aortic dissection,AD)是心血管疾病中較為兇險的一種疾病,其發(fā)病急進展快,一經發(fā)現(xiàn)需要立即給予醫(yī)療處理,否則會出現(xiàn)致命性風險。AD的主要發(fā)病原因是血液由血管的內膜破口進入血管中層,在血壓的驅動下在血管夾層中向前流動從而撕裂血管。臨床常見的癥狀為突發(fā)的前胸及后背部劇烈的疼痛。主動脈夾層常見的發(fā)病因素包括遺傳性因素如馬凡綜合癥,Ehlers-Danlos綜合癥,和非遺傳性因素如主動脈中層囊性壞死、高血壓、動脈粥樣硬化、梅毒性大動脈炎、創(chuàng)傷性動脈瘤等,其中高血壓被認為是最主要的誘發(fā)因素。目前關于主動脈夾層的具體發(fā)病機制尚無明確定論,主要認為和血管中層平滑肌細胞增殖和凋亡失衡有關。已有研究表明,主動脈夾層組織中血管平滑肌的增殖程度明顯高于正常人的升主動脈組織,并通過一系列體內和體外實驗驗證編碼平滑肌細胞收縮的標志蛋白增高/減低對主動脈血管平滑肌細胞增殖的影響。當前這一災難性疾病尚缺乏早期有效的診斷措施,特別是血清學診斷標志物,目前尚無集特異性和敏感性一體的AD血清診療標志物。大部分AD患者仍是通過發(fā)病后行主動脈血管造影來明確診斷。但因臨床以胸背部疼痛為首發(fā)癥...

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【學位級別】：博士

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中文摘要
Abstract
中英文縮略表
綜述 長鏈非編碼RNA在心血管疾病中的研究進展
    參考文獻
第1章 緒論
第2章 主動脈夾層升主動脈組織特點及增殖型血管平滑肌細胞模型誘導
    概述
    2.1 實驗材料
        2.1.1 主動脈夾層患者入組及對照體系建立
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 實驗儀器
    2.2 方法
        2.2.1 升主動脈組織HE染色法
        2.2.2 升主動脈組織免疫組化
    2.3 結果
        2.3.1 入組患者信息
        2.3.2 血管形態(tài)學特點
        2.3.3 人升主動脈血管平滑肌細胞增殖型細胞模型誘導
    2.4 討論
    2.5 小結
第3章 主動脈夾層患者升主動脈血管平滑肌細胞長鏈非編碼RNA和m RNA表達譜的研究
    概述
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗試劑
        3.1.2 實驗儀器
        3.1.3 lncRNA和 m RNA芯片信息
    3.2 方法
        3.2.1 實驗組和對照組組織RNA提取
        3.2.2 lncRNA和 m RNA基因芯片檢測
        3.2.3 基因芯片實時定量PCR驗證
        3.2.4 統(tǒng)計學分析
    3.3 結果
        3.3.1 升主動脈樣本檢測
        3.3.2 RNA瓊脂糖凝膠電泳
        3.3.3 標記效率質控
        3.3.4 lncRNA和 mRNA高通量基因芯片結果
        3.3.5 lncRNA和 mRNA高通量基因芯片原始和矯正結果
        3.3.6 差異表達lncRNA高通量基因芯片結果篩選
        3.3.7 差異表達m RNA高通量基因芯片結果篩選
        3.3.8 實時定量PCR驗證lncRNA和 mRNA高通量基因芯片準確性
    3.4 討論
第4章 主動脈夾層患者升主動脈平滑肌組織差異表達lncRNA和 mRNA的現(xiàn)代高通量生物信息學分析
    概述
    4.1 生物信息學研究工具
    4.2 研究方法
        4.2.1 差異表達m RNA高通量基因芯片現(xiàn)代生物信息學分析
        4.2.2 差異表達lncRNA和 miRNA ceRNA調控網(wǎng)絡構建
        4.2.3 韋恩分析
    4.3 結果
        4.3.1 交叉融合分析主動脈夾層基因測序
        4.3.2 共同表達差異基因富集分析
        4.3.3 共表達差異基因蛋白互作網(wǎng)絡
        4.3.4 主動脈夾層核心發(fā)病基因預測
        4.3.5 lncRNA及 miRNA預測以及韋恩分析
        4.3.6 lncRNA及miRNA以及mRNA調控網(wǎng)絡
    4.4 討論
第5章 linc01278 在主動脈夾層血管平滑肌細胞增殖及表型轉化過程中的分子機制
    概述
    5.1 實驗材料
        5.1.1 實驗試劑
        5.1.2 實驗儀器
    5.2 實驗方法
        5.2.1熒光原位雜交實驗
        5.2.2 linc01278 干擾實驗
        5.2.3 linc01278 過表達實驗
        5.2.4 細胞增殖實驗
        5.2.5 細胞遷移實驗
    5.3 結果
        5.3.1 熒光原位雜交確認linc01278 位于細胞質中
        5.3.2 敲低linc01278 后主動脈夾層血管平滑肌細胞發(fā)生表型轉換
        5.3.3 過表達linc01278 后主動脈夾層血管平滑肌細胞發(fā)生表型轉換
    5.4 討論
第6章 miR-500b-5p與 linc01278和ACTG2 結合位點驗證
    概述
    6.1 實驗材料
        6.1.1 實驗試劑
        6.1.2 實驗儀器
        6.1.3 熒光素酶報告基因質粒
    6.2 實驗方法
        6.2.1 linc01278和ACTG2 結合位點序列合成
        6.2.2 將位點序列插入熒光素酶報告基因質粒
        6.2.3 將帶有目的序列的pGL6-miR質粒轉染293T細胞
        6.2.4 螢光素酶報告基因檢測
        6.2.5 統(tǒng)計學分析
    6.3 結果
        6.3.1 linc01278與miR-500b-5p結合位點驗證
        6.3.2 ACTG2與miR-500b-5p的結合位點驗證
    6.4 討論
第7章 結論
創(chuàng)新點與不足之處
參考文獻
作者簡介及在學期間所取得的科研成果
致謝



本文編號：3823816